罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

大菱鲆鱼皮多肽液的制备及其抗运动疲劳作用

利用热水水解法制备大菱鲆鱼皮胶原蛋白。以制备的胶原蛋白为原料,利用复合蛋白酶酶解法制备大菱鲆鱼皮多肽液,并利用单因素和正交试验对复合蛋白酶酶解大菱鲆鱼皮胶原蛋白的工艺进行优化,并对得到的大菱鲆鱼皮多肽液的抗运动疲劳作用进行研究。结果表明,复合蛋白酶酶解法制备大菱鲆鱼皮多肽液的最佳酶解工艺为:温度50℃,p H 6.5,酶用量0.08%,酶解时间8 h。在此工艺条件下大菱鲆鱼皮胶原蛋白的水解度为68.35%。小鼠负重游泳实验和抗疲劳生化指标结果表明大菱鲆鱼皮多肽液具有良好的抗运动疲劳能力。     

长鳍金枪鱼鱼皮胶原蛋白肽制备工艺的研究

以长鳍金枪鱼鱼皮为原料,采用碱热复合酶三步水解法制备胶原蛋白多肽。以水解度、氮回收率和水解产物分子量为指标,通过单因素和多因素正交设计试验,确定最佳酶解条件。结果表明:碱处理为第一步,鱼皮经过0.1 mol/L Ca(OH)_2反复清洗数次,最后清水冲洗干净;热处理为第二步,鱼皮于水浴锅中90℃处理30 min;酶解为第三步,梯度加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶,酶解的最佳工艺条件为:复合酶料比1∶200(g/g),料水比1∶2.5(g/m L),酶解温度55℃,p H为9.0~6.5,酶解总时间为4 h,水解度平均能达到30%,酶解液脱色的最佳条件为,活性炭添加量2%,自然pH,温度70℃,时间30 min,经过浓缩喷雾干燥后的胶原蛋白粉末经过HPLC分析,得到分子量在3 kD以下的多肽占到85%以上。     

酶解制备玉米寡肽的研究

为了高效制备玉米寡肽,本实验对玉米蛋白粉进行超声预处理,以寡肽得率为评价指标,采用复合蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种蛋白酶对其进行水解,筛选出碱性蛋白酶为制备玉米寡肽的最适水解用酶。通过单因素实验和响应面分析确定制备玉米寡肽的最适工艺条件为:加酶量2660U/g、底物浓度8.0g/100mL、反应温度57.0℃、反应pH为9.0、反应时间3h。在该条件下制备的玉米酶解产物的寡肽得率为34.34%±0.22%,与理论预测值的相对误差在±1%以内。     

pH值渐变条件下双酶协同水解猪皮制备胶原蛋白寡肽的研究

本文研究了在没有外加碱的pH渐变条件下,用枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)双酶协同水解从猪皮胶原蛋白制备寡肽水解物的可行性。考察了单酶单因素水解条件、双酶加入方式对猪皮降解率和蛋白质水解度的影响,并在此基础上通过正交试验进一步优化出双酶一次性投料方案下水解猪皮的最佳条件:水解温度为60℃,碱性蛋白酶加入量为25μl/g蛋白,酸性蛋白酶加入量为4%(g/g),底物浓度为60g/L,水解时间为12h。在上述最佳条件下,新鲜猪皮的降解率可达94.7%,蛋白质的水解度可达17.7%,水解物中分子量小于1000(10个氨基酸以下的肽)的寡肽选择性达到了42.5%。结果表明,在不外加碱的条件下,采用双酶协同水解方法能够显著提高猪皮降解率,特别是蛋白质水解度。     

多酶复合水解法生产高水解度大豆寡肽的工艺优化

为提高大豆蛋白的水解度,生产低分子量大豆寡肽,采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,并采用中心组合试验和Box-Behnken试验对复合酶的组成和酶解工艺进行了优化。研究结果表明:复合酶的最佳组成为碱性蛋白酶38.4%、风味蛋白酶27.2%、中性蛋白酶34.4%。最佳水解条件为pH 8.79、温度50.46℃、底物浓度10%g/ml,在此条件下酶解6 h,大豆分离蛋白的水解度可达28.7%,寡肽收率高达83.56%,所得大豆寡肽产品中肽含量高达81.3%,数均分子量低至850,各理化指标均符合国标GB/T22492-2008对一级大豆寡肽产品的质量要求。     

鸽肉寡肽的制备及分子量分布

以鸽肉为原料,用风味蛋白酶催化水解鸽肉来制备鸽肉寡肽。采用10%(w/v)三氯乙酸沉淀水解物中大分子蛋白质再结合双缩脲试剂来测定水解物中寡肽含量;用单因素实验和正交实验研究水和鸽肉之比、pH、水解温度、水解时间和酶用量对鸽肉水解物中寡肽含量的影响;用液相色谱质谱联用检验寡肽的分子量。以水解液中寡肽含量为衡量因子,通过正交实验优化鸽肉蛋白适宜水解条件。结果表明鸽肉蛋白适宜水解条件为酶解时间3.5h、水解温度50℃、风味蛋白酶添加量2100u/g、水与鸽肉之比5∶1(m/v)、pH6.5,寡肽吸光度值为0.308,其对应寡肽浓度和含量为别为0.056g/mL和28%。     

复合酶水解蚕蛹蛋白制备功能性寡肽的工艺研究

为了制备分子量低、肽含量高的蚕蛹功能性寡肽,本文采用单素实验与响应面分析法,对不同蛋白酶及其不同组合、温度、pH值、底物浓度、酶的添加量等因素对蚕蛹分离蛋白水解工艺的影响进行了研究.研究结果表明,多酶复合水解可显著提高蚕蛹蛋白的水解度和寡肽得率,其中胰酶、风味蛋白酶与中性蛋白酶是最佳多酶组合,其最佳水解条件为底物浓度7.33％、酶添加量[E]/[S]3.62％、pH7.38、水解温度54.6℃、水解时间6h.在此条件下,蚕蛹蛋白的水解度高达29.2％,寡肽得率高达为81.14％.酶解后产品数均分子量为665.5 Da,重均分子量为726.9 Da,肽含量高达74.6％,而游离氨基酸含量仅为7.33％,表明复合酶解虽然提高了蚕蛹蛋白的水解度,但主要产物仍然是低分子寡肽,并没有大量生成游离氨基酸.     

酶法制取鲮鱼皮胶原蛋白寡肽工艺的研究

本文以水解度为指标,在2709碱性蛋白酶、537酸性蛋白酶、A.S.1.398中性蛋白酶三种蛋白酶中确定2709碱性蛋白酶为最佳水解用酶.在单因素试验的基础上利用通过响应面法优化2709碱性蛋白酶水解鲮鱼皮制取胶原蛋白寡肽的最佳工艺条件为:底物浓度120g/L,pH值10.0,酶与底物比2200U/g,温度50℃,水解时间2h,最大水解度为28.23%.     

酶法制备香菇多肽的研究

目的:为了使香菇蛋白更易被人体所吸收,提高香菇蛋白在人体内的利用率。方法:以香菇为原料,用酶法制备香菇多肽。实验以香菇多肽得率作为指标,比较了胃蛋白酶、3.350酸性蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶等多种酶的酶解效果。结果:香菇多肽工艺的最佳制备条件为:加酶量3000 U/g,p H9.0,温度45℃,酶解时间4 h,在此条件下酶解得率为92.7%。G25凝胶层析色谱分析表明,香菇多肽分子量主要为1000~5000 u和1000 u两部分,其中分子量1000 u的寡肽的比例占总多肽的68.38%。香菇多肽的氨基酸分析可知,香菇多肽保留了蛋白的大部分营养物质。结论:胰蛋白酶的酶解效果最佳。在最佳酶解条件下,营养物质得到了充分的保留,所得香菇多肽多为寡肽,利于人体吸收。     

酶法制取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽的工艺

利用酶工程技术,以罗非鱼鱼鳞为研究对象,研究开发罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽制品。以蛋白酶种类、底物浓度、酶解时间、加酶量、温度、pH为实验因素,以胶原蛋白的提取率、平均分子量等为指标,确定酶解最佳条件为:在pH6,温度50℃,底物浓度150 g/L,加酶量1%MG+1%HHM的条件下,水解12 h,可得胶原提取率为55%,平均分子量为920 u左右。     

咸蛋清蛋白深度酶解工艺优化研究

以咸蛋清为原料,用酸性蛋白酶对其进行酶解,以蛋白回收率和水解度为指标,通过单因素实验考察了酶解时间、加酶量、pH和酶解温度对咸蛋清深度酶解的影响,优化了咸蛋清蛋白深度酶解工艺,并对最佳工艺条件下获得的咸蛋清蛋白酶解液进行肽分子量分布的测定。研究结果表明:咸蛋清蛋白深度酶解最佳工艺条件是:稀释后的咸蛋清调节pH至4.0,酸性蛋白酶的加酶量为0.3%(E/S),温度为55℃,酶解时间为48h;此最佳工艺得到的咸蛋清蛋白酶解液中肽分子量主要为3000u以下,其中分子量为1000~3000u占49.28%,分子量为1000u以下占35.73%。     

酶法水解真鲷鱼皮和鱼鳞制取胶原蛋白肽

以真鲷鱼鱼皮、鱼鳞为材料,研究了酶法制取胶原蛋白肽工艺。以水解度为指标,研究蛋白酶种类、酶解条件对水解度的影响,并采用正交试验对鱼皮、鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化。结果表明,采用胰蛋白酶水解鱼皮,在加酶量950 U/g,pH 7.0,温度55℃,料液比1︰8,酶解反应6 h的优化条件下,胶原蛋白时水解度最高,达到29.73%;高压液相色谱(HPLC)分析表明,水解液中甘氨酸含量最高,不含色氨酸,符合胶原蛋白氨基酸特征。     

双酶法制备低苦味大豆寡肽的研究

利用中性蛋白酶和Flavourzyme双酶法,对大豆分离蛋白进行水解制备大豆寡肽,讨论中性蛋白酶和Flavourzyme的最佳酶解条件,以及大豆寡肽的苦味值变化。大豆分离蛋白的预处理条件为温度90℃、时间10min;中性蛋白酶的最佳酶解条件为底物浓度4%、反应温度50℃、时间4h、pH8.5、酶用量6%,水解度(DH)可达21.46%;Flavourzyme的最佳酶解条件为反应温度50℃、时间6h、pH7.0、酶用量3%。采用双酶中性蛋白酶-Flavourzyme生产的大豆寡肽,苦味明显降低。     

微波双酶协同水解大豆分离蛋白制备小分子肽的研究

研究微波加热条件下，用碱性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解大豆分离蛋白。以氨基氮为评价指标，确定了单酶水解工艺，双酶分步水解的顺序和制备小分子大豆多肽的最佳条件，并通过毛细管电泳方法对水解多肽的分子量进行测定。实验表明：双酶水解优于单酶，制得的大豆肽分子量主要集中在5000以下。     

酶解法制备鹿茸多肽的研究

研究酶解法制备鹿茸多肽的条件,采用双酶水解的方法制备鹿茸多肽。在相同的条件下,用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶水解鹿茸蛋白。以水解度和多肽得率为指标,确定了胰蛋白酶和复合蛋白酶为最佳酶系组合。通过单因素实验和正交实验得出最佳的酶解工艺条件:温度48℃、pH7.2、底物浓度7.5%、酶与底物浓度比6000U/g,两种酶比例为1:1,水解时间4h。在此条件下用胰蛋白酶和复合蛋白酶对鹿茸蛋白水解,水解度为32.5%,多肽得率为72.8%。     

固定化酶水解鱿鱼碎肉制备高F值寡肽的工艺优化

为了研究鱿鱼碎肉通过固定化双酶水解法制备高F值寡肽的工艺,以蛋白质水解度为指标,通过单因素和正交试验确定固定化胃蛋白酶和固定化风味酶的最佳酶解条件。第1步采用固定化胃蛋白酶,其最佳酶解条件是:料水比1∶5、加酶量26.83 U/g鱿鱼碎肉、水解时间5 h、水解温度55℃;第2步采用固定化风味酶,其最佳酶解条件是:加酶量1 692 U/g鱿鱼碎肉、pH 7.0、水解温度55℃、水解时间3 h;两步酶解后的总水解度为(32.09±0.58)%,OD_(280)为0.238±0.001。酶解液经多级活性炭串联吸附脱除芳香族氨基酸后,支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值(F值)大于20。鱿鱼碎肉经固定化胃蛋白酶和固定化风味蛋白酶分步水解后,活性炭串联吸附脱芳后可制备高F值寡肽。     

微波辅助酶解提取硫酸软骨素下脚料中胶原蛋白肽的工艺研究

以生产硫酸软骨素的下脚料为原料,采用微波辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度、相对分子量分布为指标确定最佳水解条件。通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及风味蛋白酶进行筛选,确定风味蛋白酶水解产物的水解度最高;研究了加酶量、底物浓度、反应温度、pH对酶解反应的影响,确定酶解的最优工艺条件为:加酶量6%,底物浓度10%,反应温度50℃,pH7.0。此外,与单独的酶解相比,微波辅助酶解缩短了酶解时间近50%,分子量小于1 000的胶原蛋白肽比例占91.2%。     

米糟蛋白酶解制备高F值寡肽的研究

以米糟蛋白为原料,利用双酶水解法制备高F值寡肽,研究了水解酶以及高F值获得的关键条件.结果显示,用碱性蛋白酶作为第一步水解酶,木瓜蛋白酶作为第二步水解酶,水解芳香族氨基酸的效果较好.其水解度分别为28.5%和18.2%.利用SephadexG-25柱层析分离寡肽,纯净水洗脱时去除芳香族氨基酸的效果好,寡肽F值为24.80,其中芳香族氨基酸含量为1.89%,相对分子质量为200Da～1000Da,符合高F值寡肽的要求,其得率为25.19%.     

微波酸处理对骨胶原蛋白酶解效果的影响研究

以骨胶原蛋白为原料,采用微波酸处理辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度及抗氧化能力为指标确定最佳水解条件。通过比较实验确定最佳微波酸处理条件为:微波功率510W作用270s;通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶水解结果比较,确定中性蛋白酶水解产物的水解度及ABTS、DPPH自由基清除率最高;通过单因素实验及正交实验优化中性酶最佳酶解条件为:酶与底物比10%,底物浓度4%,反应温度55℃,pH7.0。结果表明,与单独酶解相比,微波酸处理能够使骨胶原蛋白酶解时间缩短1/2,水解度上升3.2%,产物的ABTS、DPPH自由基清除率分别提高8.7%和3.1%。