提高保加利亚乳杆菌抗冷冻性的研究

保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)L.b-DR经脱脂乳培养基和MRS培养基活化、菊芋汁复合培养基培养、离心收获菌体,以12%脱脂乳作为冷冻保护剂,进行了冷冻试验。研究了在培养基中添加活性成分、培养基的起始pH值、培养温度、细胞收获的菌龄、保护剂的pH值对细胞冷冻存活率的影响。结果表明:在菊芋汁复合培养基中添加0.1%甘油或0.5%VE、培养基的起始pH值为6.0、37℃培养、对数末期或稳定初期收获菌体、保护剂pH值调至6.0,可显著提高保加利亚乳杆菌L.b-DR的冷冻存活率(P<0.05)。     

响应面法优化直投式酸奶发酵剂的工艺研究

直投式酸奶发酵剂因活性高、稳定性好、使用简便,已成为酸奶发酵剂的主要发展方向。嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus,St)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus,Lb)经活化和纯化后,以存活率为指标,对混合发酵液的菌种混合比例、离心条件、预冻条件进行单因素试验。试验结果表明混合发酵液的最佳制备条件为:St∶Lb=1∶1(体积比)、离心速度3 000 r/min、离心时间10 min、预冻温度-80℃、预冻时间1 h;采用响应面法对冻干菌悬液的保护剂p H、保护剂和菌泥平衡时间、保护剂和菌泥混合比例进行优化试验,结果表明冻干菌悬液最佳制备条件为:保护剂p H6.6、平衡时间30 min、保护剂和菌泥混合比例2∶1(m L/g),此时St存活率63.77%、Lb存活率66.03%,具有较好的市场前景和应用价值。     

保加利亚乳杆菌冻干菌种的研究

对酸奶发酵菌种之一--保加利亚乳杆菌的增菌培养基进行了筛选,得到了高活菌数的保加利亚乳杆菌增菌培养基,并进行冷冻升华干燥得到保加利亚乳杆菌的冻干菌种。结果表明:在添加有10%麦芽汁、10%番茄汁、0.05%CaCO3、1.0%乳糖的MRS基础培养基中培养保加利亚乳杆菌18h后活菌数可达到3.96×1011cfu/g。其冻干菌种的活菌数为2.53×1011cfu/g。     

益生菌冻干保护剂及工艺优化研究

目的 为提高保加利亚乳杆菌冻干粉存活率。方法 本研究采用真空冷冻干燥法,以保加利亚乳杆菌为研究对象,研究冻干保护剂对益生菌冻干存活率的影响。 结果 通过单因素和正交试验筛选出最优组合。结果表明：经-80 ℃预冻1 h,冷冻干燥48 h(?40 ℃、25 Pa)后,益生菌保加利亚乳杆菌的最佳冻干保护剂为甘油2%,脱脂乳6%,L-半胱氨酸3%,木聚糖10%,在此优化条件下,存活率为82.75%。结论 在冷冻干燥过程中加入冻干保护剂可以提高保加利亚乳杆菌存活率,为下一步其他益生菌的冻干研究提供有效参考。     

预培养冷冻干燥制备植物乳杆菌发酵剂

为提高菌体冷冻干燥存活率,制备发酵活力高的植物乳杆菌发酵剂,通过在MRS培养基和蕉杆培养基中比较不同收获期的菌体发酵活力,确定菌体培养最佳收获期;通过单因素实验和正交实验考察预培养时间、温度和保护剂海藻糖浓度对冻干存活率的影响;比较冻干发酵剂和新鲜菌液在MRS培养基和蕉杆培养基中的发酵活力。结果表明:对数末期为培养植物乳杆菌S14的最佳收获期;预培养的最优条件为温度37℃,预培养时间45 min,海藻糖浓度10%,冻干存活率达89.9%;植物乳杆菌S14冻干发酵剂的发酵活力与新鲜菌液的发酵活力十分接近。该发酵剂适用于蕉秆青贮发酵。     

乳酸菌直投发酵剂培养与冷干条件的优化

采用响应面法对保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus)和嗜热链球菌的增菌(Streptococcusther-mophilus)培养基进行了优化,并且对其冻干保护剂进行了筛选,结果表明通过流加碱控制保加利亚乳杆菌的pH值为5.8,嗜热链球菌的pH值为6.4,培养15h,菌体的浓度分别达到1.24×109cfu/mL和8.05×108cfu/mL。离心收集到的菌体,在-70℃的冰箱先预冻3h,然后在冷阱温度-51℃、真空度9Pa冻24h,最终可以得到含活菌数为1.43×1010cfu/g的高活力酸乳发酵剂。     

乳酸菌冷冻保护剂配方设计

乳酸菌浓缩发酵剂的制备过程中,冷冻对菌体的损伤比较明显。通过在保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌菌悬液中添加不同的保护剂并测定冷冻前后乳酸菌菌数,筛选出适用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌的保护剂。最终确定的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌保护剂配方为:蔗糖浓度为10%,脱脂乳浓度为10%,谷氨酸钠浓度为5%。菌体经冷冻处理后,冷冻存活率可达到95.0%,比不添加保护剂的菌体存活率大大提高。此配方也简单易得,完全可以满足生产需要。     

保加利亚乳杆菌微囊化活菌制剂的研究

制备保加利亚乳杆菌的微囊化制剂。液体发酵法制备保加利亚乳杆菌,以海藻酸钠为囊材制备保加利亚乳杆菌微囊。微囊化保加利亚乳杆菌的冻干存活率为45.07%,与传统方法(冻干存活率为44.35%)相比,差异无统计学意义。人体胃液和肠液耐受性试验结果显示,在人体胃液中微囊化的菌体3 h后菌体存活率达到71.16%,而对照的存活率仅为16.47%;在人体肠液中微囊化的菌体6 h后菌体存活率达到71.67%,而对照的存活率仅为30.46%。微囊起到了保护保加利亚乳杆菌免受人体胃液和肠液破坏的作用。     

瑞士乳杆菌增菌培养基的筛选

以冻干后菌体的存活率为依据,首先筛选出存活率最高的瑞士乳杆菌基础培养基为10%的脱脂乳培养基;然后分别采用单因素实验和正交实验,优化培养基成分及用量;最后确定瑞士乳杆菌的增菌培养基配方为:10%脱脂乳+0.1%乳糖+1.0%酵母膏+10%麦芽汁+1.0g/100mL柠檬酸三钠.在此优化培养基中,瑞士乳杆菌培养至10h左右,其活菌数可达8.16×109cfu/mL.     

泡菜直投式菌剂制备及应用研究

本研究采用自行分离选育的植物乳杆菌进行增菌培养,确定了植物乳杆菌的增菌最佳培养基成分为:以添加2%的葡萄糖、1%的蛋白胨为基础培养基,加入5%蕃茄汁、6%辣椒汁、7.5%莴苣汁,增菌最佳培养条件为:培养温度为30℃、振荡频率为50r/min、发酵期间pH为6的条件下,植物乳杆菌的最高活菌数达3.56×109cfu/ml,5%麦芽糊精+5%蔗糖+0.8%海藻糖+0.2%吐温作为冻干保护剂所得结果最好,植物乳杆菌菌体的冷冻存活率为83.6%、冻干存活率为80.6%、冻干菌粉活菌数为2.37×1010cfu/g。使用直投式功能菌剂发酵青菜,在30℃条件下,盐水浓度为6%￣8%,青菜发酵时间为4d,在25℃条件下,青菜发酵时间为5d,泡青菜产品具有较浓的乳酸发酵的香气,酸味纯正,滋味浓郁,酸度适中。     

含水量对植物乳杆菌冻干粉细胞活性的影响及其贮藏稳定性的研究

应用真空冷冻干燥技术,研究不同含水量对冻干产品中植物乳杆菌细胞活性的影响和不同保藏温度条件下样品中细胞存活率与复苏活力随时间变化的规律,并建立适用于判定菌体细胞冷冻干燥工艺终点的有效方法。结果表明：具有不同含水量的样品中,植物乳杆菌细胞的存活率间无显著性差异,但随着样品中含水量的降低,植物乳杆菌细胞进入对数生长期的时间逐渐延长,复苏活力也呈下降趋势。贮藏稳定性实验结果表明,－ 20℃条件下,植物乳杆菌细胞的存活率一直呈现上升趋势,到第515 天可达91.46%;4℃条件下,28d 内植物乳杆菌细胞的存活率呈上升趋势,到第515 天其存活率又下降到53.16%。综上所述,解析干燥初期是植物乳杆菌菌体冻干工艺理想的终点,比较适于植物乳杆菌发酵剂短期和长期保藏的温度条件分别是4℃和－ 20℃。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌冻干工艺条件的研究

试验对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的冻干工艺进行了研究,结果表明：两菌的最佳离心条件为：转速4000r／min,时间10min;最佳预冻温度和预冻时间为在一20℃预冻3h;冻干保护剂的最佳pH为6．5;保护剂与菌泥的最佳平衡时间为30min;保护剂与菌泥的最佳配比为4：1;最佳装液厚度为7mm;冻干菌粉的最佳含水量为2％-3％。     

植物乳杆菌Lp-2分批发酵工艺的研究

研究和发酵条件对植物乳杆菌Lp-2高密度增殖的影响。经过对缓冲盐法和化学中和法对比,确定了植物乳杆菌高密度增殖发酵最佳方法为化学中和法并对其进行了详尽地研究。最后,进行了培养工艺的放大。试验表明,在32℃、100r/min的培养条件下在3t发酵罐培养9.6h,所得菌体的最大产量为9.3×109cfu/mL。     

响应面法优化纳豆芽孢杆菌产纳豆激酶培养条件

采用单因素试验及响应面试验对纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）培养条件进行优化。在单因素试验的基础上,取影响纳豆激酶活力的5个重要条件因子（培养温度、培养时间、初始pH、接种量、菌龄）设计5因素3水平的响应面试验,建立以纳豆激酶活力为响应值的多元二次回归方程。结果表明,纳豆芽孢杆菌最佳培养条件为：培养温度34℃、培养基初始pH值为7.5、接种量3%、培养时间95 h、菌龄17.5 h。在此最佳条件下,纳豆激酶活力达到5 087 FU/mL,较优化前提高了18.83%。     

复合微生物酸浆豆干发酵剂的影响因素分析

目的分析副干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌3种商业菌株复配而成的复合发酵剂的影响因素。方法选取乳糖添加量、黄浆水初始pH、乳酸菌接种量、培养温度、培养时间为考察因素,以产酸量为评价指标,进行正交实验并与单一发酵剂豆干比较。结果各因素对产酸量的影响由大到小依次为培养温度、乳酸菌接种量、黄浆水初始pH值和乳糖添加量,其中培养温度对产酸量影响显著。发酵剂最优制作工艺为:菌种复配比例为副干酪乳杆菌:嗜酸乳杆菌:植物乳杆菌=1:1:2、乳糖添加量2%、黄浆水初始pH值5.5、乳酸菌接种量8%、培养温度37℃、培养时间60 h。结论复合发酵剂豆干的出品率、质地、保水性、口感及感官评价上整体优于单一发酵剂豆干,本研究为酸浆豆干的工业化生产提供了理论依据。     

高活性益生菌发酵枸杞粉的真空冷冻干燥工艺优化

以植物乳杆菌发酵枸杞浆为研究对象,通过差示扫描量热仪和冻干显微镜分析益生菌发酵枸杞浆的物性参数,采用正交试验对保护剂进行选择和优化,并绘制冻干曲线,旨在开发出一套制备富含活性益生菌的发酵枸杞粉的工艺方法。结果表明：运用差示扫描量热仪,采用经过退火处理的连续扫描法,在退火温度－5 ℃、升温速率5 ℃/min条件下,测得的益生菌发酵枸杞浆物料的物性参数为：共融点－5.28 ℃,结晶点－19.59 ℃,玻璃态转化温度－31.82 ℃,崩解温度约－36 ℃。根据已确立的参数确定发酵枸杞浆的预冻温度为－40 ℃,预冻时间为4 h,升华干燥阶段的温度为－45 ℃。最佳复配保护剂组合为：20%麦芽糊精、14%乳糖、6%海藻糖。复配后样品的升华干燥温度为－30 ℃,分别绘制真空冷冻干燥过程中的冻干曲线。益生菌发酵枸杞冻干粉后活菌数达9.6（lg（CFU/g））,含水量低于3%,色泽完好,复水性强,产品质量佳。     

纳豆制备及冷藏干燥制品条件优化研究

论文以蛋白酶活力为指标,对蚋豆的发酵条件和后熟条件进行了优化研究,试验结果表明,适宜的纳豆发酵条件为NaCl浓度2.5％、时间28 h、pH 7.0、温度40℃,适宜的纳豆后熟温度为4℃、后热时间26 h.用此工艺制备纳豆,经冷冻干燥4℃保存一个月后,纳豆菌数量为3.43×109 cuf/g,蛋白质含量为12.50％、脂肪含量为9.5％、水份含量为60.45％、氨基酸态氮含量为0.590％、糖类含量为4.19％,这些研究结果为进一步开发纳豆休闲食品提供了理论基础.     

冷胁迫对冷冻干燥罗伊氏乳酸杆菌细胞膜流动性的影响

以DPH(1,6-二苯基-1,3,5-己三烯)为荧光探剂,优化了测定罗伊氏乳酸杆菌细胞膜流动性的条件,其最佳测定条件为:激发波长360nm,发射波长430nm,菌浓度OD0.8,30℃孵育时间为20min。同时研究冷胁迫处理对冷冻干燥存活率。细胞活力及细胞膜流动的影响,研究表明冷胁迫能改善乳酸菌的冷冻干燥存活率,同时在一定的条件下,冻干后细胞的流动性也有所改变,说明经过一定的冷胁迫处理后,增加了细胞的抗性,从而提高细胞的冷冻存活率。     

酸-冷交互胁迫对保护冷冻干燥发酵乳杆菌活性的作用

为探究酸-冷交互胁迫对冷冻干燥发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)ATm的影响,考察酸-冷交互胁迫的处理方式对细胞存活率、滞后时间以及酸化速率的影响,同时测定交互胁迫对乳酸脱氢酶、ATP酶活性以及细胞膜完整性的影响。结果表明,pH 4.5、4℃酸-冷交互胁迫能够显著提高细胞冷冻干燥存活率及酸化速率,其中冷冻干燥存活率能够达到87.19%,优于单因素胁迫;pH 4.5、4℃酸-冷交互胁迫能够提高发酵乳杆菌ATm的冷冻干燥存活率保护其活性,提高酶活性,维持细胞膜完整性。     

嗜酸乳杆菌冻干保护剂及其直投式复合发酵剂的开发

为提高嗜酸乳杆菌冻干存活率和研发以嗜酸乳杆菌冻干菌粉为基础的直投式复合发酵剂,本研究以嗜酸乳杆菌为试验菌株,在单因素实验、析因实验和最陡爬坡实验的基础上采用响应面分析优化了嗜酸乳杆菌真空冷冻干燥的保护剂配方。优化后将嗜酸乳杆菌冻干菌粉与肉糖葡萄球菌冻干菌粉以一定质量比复合并应用于萨拉米香肠的制备中。结果表明,嗜酸乳杆菌最佳冻干保护剂(以11%脱脂乳为基础)配方为:海藻糖3.03 g/100 mL、甘油9.50 g/100 mL、谷氨酸钠3.50 g/100 mL,此条件下,嗜酸乳杆菌冻干存活率高达81.24%;嗜酸乳杆菌与肉糖葡萄球菌的冻干菌粉最佳比例为1:2,直投式复合发酵剂最佳接种量为10~8 cfu/g。与对照组相比,该直投式复合发酵剂生产的萨拉米香肠酸味柔和,色泽、硬度、弹性良好,总体接受度最高。