一株产白藜芦醇真菌的分离及培养

在虎杖组织培养过程中分离出1株真菌,对其发酵液提取物进行TLC和HPLC分析证明,该菌株能产生白藜芦醇,并对其培养条件及白藜芦醇积累特性进行了初步研究。结果表明,培养时间、温度、pH值、接种量对白藜芦醇积累均有较大影响。通过单因素和正交试验得到最佳培养条件为:20g/L蔗糖、2g/LNH4NO3、自然pH值(6.8～7.0)、温度为28℃、培养时间7d、接种量为培养基装液量的10%,转速100r/min,其白藜芦醇含量约为39.58μg/L。     

一株高产类胡萝卜素酵母Rhodotorrula.sp色素组分及摇瓶发酵研究

对一株高产类胡萝卜素的红酵母Rhodotorrula.sp的色素组分、生长及色素积累的动态变化和摇瓶最佳生理条件进行了研究。结果表明该株酵母色素含量高、色素主要成分为β－胡萝卜素；色素积累起始于对数期末期和稳定期初期；在本实验条件下，红酵母Rhodotorual.sp的最佳摇瓶发酵条件为蔗糖30g/L、硫酸铵10g/L、酵母膏3g/L、MgCl20.3g/L、接种量30ml/L、恒pH6.0和培养基装量100ml/500ml；经72h培养其生物量、类胡萝卜素含量和产量分别达8．72g/L、1359．7μg/g和11．86mg/L。     

食药用大型真菌抗氧化活性菌株的筛选及其培养条件优化

对10种野生食药用大型真菌进行具有抗氧化活性菌株的筛选,并对高效抗氧化活性菌株进行发酵培养条件的优化,为将其投入工业化生产提供依据。以发酵粗提液的DPPH自由基清除率为指标,采用单因素和正交试验法优化大型真菌液体发酵的培养条件,并验证。结果表明,在供试的10种真菌中,有4株具有良好的抗氧化活性,占40%,其中以木耳Auricuiaria auricular CZSWXY0012的抗氧化活性为最高。最优的发酵培养条件为:葡萄糖25g/L,酵母膏2g/L,MgSO40.2g/L,CuSO4 6 mg/L,K2HPO4 3.2g/L,pH 6.0,温度27℃,装液量100mL/250mL,发酵培养8d。野生食药用大型真菌为天然抗氧化剂的开发和利用提供了宝贵的资源。     

响应面法优化蛹虫草菌丝液体发酵产虫草素培养基

探究利用响应面法优化蛹虫草液体发酵产虫草素的条件,以提高虫草素积累量。以虫草素积累量为指标,同时测定对应的菌丝体产率,利用Plackett-Burman实验筛选影响虫草素积累量的关键因素,再以最陡爬坡实验逼近最大虫草素积累量响应区域,最后应用Box-Behnken方法优化培养基;对虫草素积累量和对应的菌丝体产率数据进行相关性分析。结果表明:在25℃,无光照,160 r/min,p H自然,5 m L/100 m L接种量,优化培养基为:KNO_30.04 g/100 m L,酵母浸膏1.50 g/100 m L,Fe SO_4·7H_2O 0.03 g/100 m L,KH_2PO_40.2 g/100 m L,葡萄糖3.82 g/100 m L,Zn SO_4·7H_2O 0.06 g/100 m L,Mg SO_4·7H_2O 0.13 g/100 m L,维生素B_10.08 g/100 m,虫草素积累量达到852.621μg/m L;在同等条件下,利用优化培养基发酵8 d+静置10 d后,虫草素积累量达到936.225μg/m L。在本实验多组分的条件下,菌丝体产率小于0.857 g/100m L时,虫草素生成的效率较高,而菌丝体产率大于1.703 g/100 m L时,虫草素积累量开始下降;发酵第8 d虫草素积累量和菌丝体产率存在极显著相关关系。     

产菊粉酶菌株的筛选及产酶条件优化

从盐碱地菊芋根际土壤中筛选出112株产菊粉酶菌株,并从中得到一株酶活较高的真菌A-6,经菌落观察以及采用真菌通用引物ITS1和ITS4 PCR扩增RNA基因序列,测序鉴定结果为烟曲霉Aspergillus fumigatus。对其产酶条件进行单因素分析结果显示,真菌A-6的pH耐受范围较广,且具有一定的耐盐性。经正交实验进行产酶条件优化,确定了A-6的最佳产酶条件为菊芋提取液(EJA)100g/L,酵母膏(YE)25g/L,NaCl为5g/L,NH4H2PO45g/L,pH为5,30℃,170r/min下振荡培养3d,酶活最高为13.29U/mL。     

药用真菌液化苦瓜渣获取膳食纤维的研究

对药用真菌Irpex lacteus CD液化苦瓜渣获取功能性膳食纤维饮品的可行性、液化机理及培养条件进行了研究。结果表明,药用真菌能较好地液化苦瓜渣,在保持皂苷含量的同时,发酵液中膳食纤维含量明显增加。液化的主要机理在于,药用真菌对苦瓜渣中的纤维素成分进行了有效的降解。在优化条件为:转速150 r/ min、加水量60 mL、种龄3 d、培养时间3 d,发酵液中皂苷、SDF和IDF含量分别能达到0.71 g/L、3.76g/L和5.86 g/L。该研究为获取功能性膳食纤维蔬菜饮品提供了新的思路。     

产γ-亚麻酸诱变菌拉曼被孢霉HLY0902的发酵条件优化

采用正交实验和单因素实验,分别对诱变菌拉曼被孢霉HLY0902的培养基及培养条件进行优化,以期提高γ-亚麻酸(GLA)的产量。结果表明:当发酵培养基组成为葡萄糖100 g/L、酵母浸粉10 g/L、KH_2PO_44 g/L、Na NO_31 g/L、Mg SO_4·7H_2O 0.5 g/L时,GLA的产量最大,可达1.05g/L,较优化前提高了43.8%;最优培养条件为接种量10%,装液量20%,发酵时间168 h,适合菌体生长和油脂积累的p H为5.5、发酵温度为22℃,适合GLA积累的p H为7.5、发酵温度为20℃。通过该系列的优化研究,诱变菌拉曼被孢霉HLY0902产GLA的能力显著提高。     

花生根细胞悬浮培养制备白藜芦醇条件的优化

以花生根愈伤组织为材料,采用二次通用旋转组合试验设计,优化花生根细胞悬浮培养产白藜芦醇的条件,探讨影响花生根细胞悬浮培养产白藜芦醇的最佳工艺参数。当摇床转速为130r/min、接种量为38.00g/L、pH5.80、蔗糖质量浓度为40.00g/L时,培养15d,花生根细胞增殖倍数最大为(4.71±0.04)倍,白藜芦醇产量达到907.3μg/g。     

褶皱假丝酵母产脂肪酶条件及酶学性质研究

对一株来源于海洋有产脂肪酶能力的褶皱假丝酵母产酶条件进行研究,探讨了碳源、氮源、pH、培养温度对该菌产脂肪酶的影响。结果显示:在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:蔗糖5 g/L,橄榄油5 g/L,MgSO4·7H2O1 g/L,K2HPO41 g/L,(NH4)2SO410 g/L,起始pH为7.0,接种量10%,在30℃、200 r/min下培养36 h,产酶能力达到4 351.6 U/mL。该菌所产脂肪酶的最适反应pH为7.0,最适反应温度为37℃,Ca2+、Mg2+对酶活有一定的促进作用。     

富铁酵母培养条件优化及分析

通过在培养基中添加Fe2+的方法制备富铁酵母。测定富铁酵母生物量及铁的含量。对培养条件进行了优化。确定培养条件为:培养温度28℃,摇床转数200r/min,培养基Fe2+添加浓度为100mg/L,装液量60mL/250mL三角瓶,接种量10%(v/v),pH值为6.0,培养时间72h。在此优化条件下获得的富铁酵母生物量可达到4.112g/L±0.17g/L,铁含量可达7.505mg/g±0.33mg/g。其中有机铁含量为81.4%。对空白酵母和富铁酵母进行红外光谱分析,比较了酵母富集Fe2+前后吸收峰的变化,并对空白酵母和富铁酵母中的17种氨基酸的组成进行分析。     

干红葡萄酒酿造过程中白藜芦醇的变化

采用赤霞珠、玫瑰香为原料,单品种发酵酿造干红葡萄酒,发酵期间葡萄酒中的白藜芦醇的变化情况直接采用HPLC直接进样方法检测。主发酵温度控制在26℃左右,主发酵前添加60mg／L的二氧化硫,在后发酵时补充加入10mg／L的SO2,能有效降低白藜芦醇的损失。两个单品种酿造的干红葡萄酒经过苹果酸一乳酸发酵后白藜芦醇总量都略微提高,分别达到4．92mg／L和3．87mg／L。     

四种食用菌菌丝体富集有机钙能力的研究

目的:从硫磺菌、茯苓、红曲和蜜环菌中筛选富钙率和钙有机化程度高的食用菌,并研究富钙高的硫磺菌液体培养时富钙对主要活性成分齿孔酸含量的影响。方法:采用生物富集方法研究无机钙的添加对四种食用菌生长的影响,采用静置浸出法分析菌丝体钙有机化程度,并用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）分析硫磺菌主要活性成分齿孔酸的含量。结果:固态培养时,在适宜的加钙量下,硫磺菌的生长均优于茯苓、蜜环菌、红曲。液态培养在加钙量为100 mg/L时,硫磺菌的富钙率显著高于茯苓、蜜环菌和红曲。硫磺菌液态培养加钙量为100 mg/L时,可以达到93.51%的富钙率、85.85%的钙有机化程度和18.34 mg/g的齿孔酸含量,因此硫磺菌具有成为功能性新型补钙产品开发利用的潜质。     

Impact of Using Exopolysaccharides (EPS)-Producing Strain on Qualities of Half-Fat Cheddar Cheese

Yield, textural, proteolysis, melting, and sensory properties of exopolysaccharide-producing Lactobacillus paracasei on properties of half-fat (about 16 g fat/100 g cheese) Cheddar cheese during ripening at 8℃ for up to six months were investigated. The results revealed that B-3 cheese, made with 2.0% (v/v) high yield exopolysaccharide-producing L. paracasei in combination with 0.011% (w/w) commercial Cheddar culture (B-3 cheese), had a 10.15, 7.71, and 10.04% separately increase in moisture content and had a 7.70, 5.05, and 6.76% separately increase in yield compared with B-2, B-4, and B-5 cheese, texture and melting characteristics were significantly improved (P < 0.05), sensory score surpassed B-4 and B-5 cheese and was similar to the full-fat one. Any differences of B-3 cheese detected among half-fat Cheddar cheeses were attributed to the presence of high yield exopolysaccharide-producing L. paracasei.     

产白藜芦醇葡萄内生菌的分离与鉴定

从酿酒葡萄梅洛特的葡萄皮、葡萄穗轴及梗中分离出30株葡萄内生菌,经过摇瓶液体发酵后检测发酵液提取物,发现有7株内生真菌具有产白藜芦醇的能力。其中菌株MG1发酵产白藜芦醇的能力稳定、产量高,达97μg/L,其他几株菌株白藜芦醇产量较低且不稳定。对菌株MG1的分类鉴定进行重点研究,结合形态学特征及分子生物检测结果,鉴定其为链格孢属菌。     

虎杖内生真菌Aspergillus aculeatus HZ001产β-葡萄糖苷酶的酶学特性

中药虎杖含有丰富的虎杖苷,利用生物转化技术将其转化为白藜芦醇是制备天然白藜芦醇的有效方法。虎杖内生真菌Aspergillus aculeatus HZ001细胞可催化虎杖苷转化为白藜芦醇,该文对该菌株产胞内β-葡萄糖苷酶的酶学性质进行研究。结果表明:该酶的最适反应温度为60℃,在低于60℃时有较好的稳定性;最适反应pH为4.8,在pH 3.6~4.0时有较好的稳定性;Fe^2+对其活力有激活作用,相对酶活力可达到120%,Ca^2+、Co^2+、Mg^2+等离子对酶活力有明显的抑制作用,其中Co^2+的抑制作用最明显;十二烷基硫酸钠、巯基乙醇、二甲基亚砜和乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)4种抑制剂对该酶活力具有抑制作用,其中EDTA的抑制效果最为明显,相对酶活力仅有10%左右。在最适催化条件下,进行酶催化动力学分析,米氏常数K m值为2.571 mmol/L,最大反应速率V max值为0.594μmol/(mL·h)。     

液相色谱-质谱法检测保健食品中白藜芦醇及白藜芦醇苷

目的 建立液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS)分析保健食品中白藜芦醇及白藜芦醇苷顺反结构(顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇苷、反式白藜芦醇苷)含量的分析方法。方法 保健食品经80%乙醇于低温条件下避光提取,经液相色谱柱分离后,在多反应监测(multiple response monitoring, MRM)模式下进行白藜芦醇及白藜芦醇苷顺反结构含量的测定,外标法定量。结果 白藜芦醇及白藜芦醇苷顺反结构在5-200μg/L范围内呈现良好线性关系,相关系数均大于0.999,方法检出限为0.02-1.00μg/L,定量限为0.06-3.00μg/L,平均回收率为94.4%-115.7%,相对标准偏差为0.8%-7.6%(n=6)。结论 该方法针对保健食品基质,具有保护白藜芦醇及白藜芦醇苷结构的特点,操作简便且回收率高,满足保健食品中白藜芦醇及白藜芦醇苷顺反结构含量的检测要求。     

HPLC法测定不同品种花生根中白藜芦醇的含量

本研究采用高效液相色谱法(HPLC)测定河南产花育20、豫花11、豫花14、豫花15、红花1号、海花1号、丰花5号、白沙17A共八种花生根中白黎芦醇的含量,结果表明:这八种花生品种中以红花1号花生根中白黎芦醇含量最高,为103-3μg/g,不同品种花生根中白黎芦醇含量差异比较大。     

富含S-腺苷甲硫氨酸面包酵母的发酵工艺优化

对摇瓶发酵生产富含S-腺苷甲硫氨酸的面包酵母的培养条件和培养基成分进行了优化,单因子实验结果表明,发酵最适pH值为5.0,最适装液量为70/250 mL,最佳接种量为2%。正交优化实验结果表明,最佳培养基成分为12°Brix糖蜜,另加酵母粉6.667g/L,(NH4)2SO4 2.829g/L,MgSO4 0.2g/L,ZnSO4 0.1g/L,KH2PO4 1g/L,在该条件下,S-腺苷甲硫氨酸产量为14.26 mg/L,含量为1.64 mg/g,分别提高了76.5%和84.3%。     

桑黄黄酮高产菌株筛选及菌丝体提取物生物活性研究

以菌丝生长速度、总黄酮含量及产量为主要指标,筛选桑黄菌株,获得了桑黄黄酮高产菌株;运用HPLC对菌丝体醇提物黄酮类化合物的种类及含量进行了比较,并进一步考察了菌丝体醇提物对L1210肿瘤细胞的抑制作用及对超氧阴离子自由基的清除作用。结果表明,PB-10菌株醇提物黄酮类化合物的种类及含量明显多于其他菌株,适宜作为桑黄黄酮发酵用菌株。PB-10菌株醇提物在250μg/mL浓度下,对L1210细胞抑制率可达82%;对超氧阴离子自由基清除的IC50值为2.3μg/mL,清除作用与总黄酮含量存在明显的量效关系。