菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质研究

[目的]研究菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质.[方法]从一株碱性蛋白酶生产菌株I13中得到了碱性蛋白酶粗酶液,并研究了温度和pH对该酶液酶活力的影响.[结果]所产碱性蛋白酶的最适反应温度为40℃,在20～30℃范围内仍保持了最大活力的40%以上;最适反应pH为10.5,在pH 8.0-11.0范围内保持了最大活性的90%以上,有较宽的pH谱.[结论]该碱性蛋白酶具有开发成为洗衣粉添加剂的巨大潜力.     

斑菌发酵产胆红素氧化酶及其对酸性靛蓝脱色的研究

[目的] 提高漆斑菌(Myrothecium sp.IMER1)产胆红素氧化酶产量,并研究其酶液对酸性靛蓝脱色性能.[方法]筛选合适的产酶培养基,研究外加碳源、温度、pH 值等条件对产酶量的影响.提取粗酶液并对酸性靛蓝进行了脱色研究,用紫外-可见分光光度计扫描其在200～800 nm波长的变化.[结果] 漆斑菌在PDB培养基上生长良好且产酶量最大;当以PDB培养基为基本培养基时,葡萄糖是其产酶的最适外加碳源,该菌最适产酶的温度和pH值分别是28 ℃和7.0.该酶在2 h内对酸性靛蓝脱色率可达到82%,酸性靛蓝降解液的扫描光谱图证实了染料分子的结构受到了破坏.[结论]试验结果为提高胆红素氧化酶产量提供了试验依据,证实了该酶在印染废水的脱色净化处理中具有潜在的应用前景.     

脂肪酶产生菌的筛选·产酶条件及酶特性研究

[目的]筛选脂肪酶高活性菌株作为脂肪酶生产菌株和脂肪酶基因的供体菌.[方法]从油脂厂等地采集26份含菌样品,采用溴甲酚紫平板对样品进行初筛,以产脂肪酶发酵培养基摇瓶复筛,获得1株产脂肪酶活性较高的菌株09-7-1,经鉴定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger).采用正交试验对影响该菌株产酶的因素进行了研究,并探讨了该菌株所产脂肪酶的性质.[结果]该菌株最佳产酶条件:碳源为0.5%的可溶性淀粉,氮源为0.2%的酵母膏,培养温度为32℃,发酵液pH为5.2,该菌株最初发酵液中酶活力为13.164 U/ml,优化后酶活力达24.112 U/ml,是最初酶活力的1.83倍.该菌株所产脂肪酶最适作用温度为30℃,最适作用pH为7.0;酶液在60℃保温90 min后,活性损失较少,pH为5.5～10.0内稳定.[结论]该研究可为脂肪酶生产和基因研究奠定基础.     

发芽粟谷中谷氨酸脱羧酶的主要酶学性质初探

[目的]探讨发芽粟谷[Setaria italica (L.)Beauv.]中谷氨酸脱羧酶(GAD)的主要酶学性质.[方法]以发芽粟谷为试材,研究发芽粟谷GAD的活性及其主要酶学性质.[结果]发芽粟谷GAD最适温度为40℃, 其耐热性较差,32℃保温1h后其酶活保持率为86.3%;发芽粟谷GAD最适pH值为5.5,在pH值5.0～5.5范围内酶活保持率在80.0%以上;发芽粟GAD对Glu的Km为22.36mmol/L,Vmax为2.28 μmol/min;Ca2+、Mg2+、Li+、PLP和VB6对发芽粟谷GAD活力具有促进作用,而Zn2+、La3+、Cu2+起抑制作用,Mn2+、Na+、Fe2+和EGTA则无显著影响.[结论]该研究可为利用发芽粟谷内源GAD富集GABA提供理论依据.     

皂苷鼠李糖苷酶RhaG和RhaD的酶反应特性研究

[目的]研究皂苷鼠李糖苷酶RhaG 和RhaD 的酶反应特性.[方法]对微生物Absidia sp.G3g 菌产的人参皂苷糖苷酶(RhaG)和Absidia sp.DOd菌产的薯蓣皂苷糖苷酶(RhaD)分别进行分离纯化,并对2种提纯酶的分子量和酶性质进行了研究.[结果]RhaG 和RhaD 的酶蛋白分子质量分别为61、56 kDa.RhaG的酶反应最适pH为5.0,pH 稳定范围为3.0-7.0;最适温度为40℃,30～60℃温度稳定性较好;米式常数Km为9.523 mmol/L.RhaD的酶反应最适pH为5.0,pH稳定范围为3.0～7.0;最适温度为40℃,30～50℃温度稳定性较好;米式常数Km为8.834 mmol/L.[结论]该研究为进一步探明2 种酶间的差别奠定了基础.     

黑曲霉葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质研究

[目的]分离能水解獐牙菜苦苷的胞外β-葡萄糖苷酶,并研究其分子量、最适催化温度、最适pH、稳定性及催化特征.[方法]黑曲霉液体发酵3 d,收集培养液,培养液经盐析、柱分离得到1个β-葡萄糖苷酶.[结果]该β-葡萄糖苷酶的分子量的86 kD,最适pH为5.0～6.0,最适反应温度为50～60℃,在60℃以下时酶稳定;Ca2+、Zn2+、Fe3+和Cu2+能抑制β-葡萄糖苷酶的活性,而Mg2+和Mn2+能够激活β-葡萄糖苷酶的活性;纤维二糖是该β-葡萄糖苷酶的最适催化底物.[结论]该酶和大多数真菌来源黑曲霉相似,对獐牙菜苦苷的亲和性弱,对p-NPG的亲和力强.     

美味牛肝菌合成漆酶的发酵条件研究

[目的]研究美味牛肝菌合成漆酶的最适发酵条件.[方法]采用液体深层培养法研究不同碳源、氮源、pH、温度等因素对美味牛肝菌产酶量的影响.[结果]美味牛肝菌合成漆酶的最适发酵条件为:葡萄糖2.0%,牛肉膏0.5%,KH<,2>PO<,4> 0.4%,MgSO<,4>·7H<,2>O 0.3%,微量元素溶液8.0%,维生素B<,1> 0.003%,pH4.5,温度28℃,培养时间为8 d.[结论]在此条件下,漆酶产量最高,为71.27 U/ml,该研究为美味牛肝菌漆酶的开发应用提供了科学依据.     

洋葱过氧化物酶活性测定及性质分析

[目的]寻找过氧化物酶含量丰富且活性高而稳定的植物原料.[方法]从洋葱中分离、纯化过氧化物酶并测定其活性,同时对其酶学性质进行鉴定并研究NaHSO、、抗坏血酸和EDTA对酶活性的影响.[结果]洋葱过氧化物酶在20～60 s内反应速度恒定,证明酶有活性;所提过氧化物酶的最适反应pH值为6.5,最适反应温度为60℃,温度高于100℃时,过氧化物酶基本失活;抗坏血酸和NaHSO3对过氧化物酶活性有抑制作用,且随NaHSO、浓度增加,其对酶活性的抑制作用增强;EDTA对酶活性的抑制作用不明显.[结论]该研究为过氧化物酶加工工业的进一步发展提供了借鉴.随着NaHSO3浓度的增加,抑制作用逐渐加强;EDTA的抑制效果最不明显.     

采后UV-C处理对葡萄抗病性和品质的影响

[目的]研究低辐能流短波紫外线(UV-C)处理对甬优1号葡萄腐烂的影响及作用机理,为UV-C应用于葡萄保鲜提供科学依据.[方法]葡萄贮藏前进行0、0.5、1.0、1.5、2.0 kJ/m2UV-C照射处理,然后在(0±1)℃、相对湿度90%环境下贮藏84 d.贮藏期间取样测定腐烂率、苯丙氨酸解氧酶(PAL)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、几丁质酶(Chitinase)活性、β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-Glucanase)活性以及总酚和总类黄酮含量.[结果]UV-C处理有效控制了葡萄果实腐烂,显著提高了PAL、PPO、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性,诱导总酚和总类黄酮含量的迅速增加.[结论]UV-C处理抑制葡萄果实的腐烂与抗病相关酶活性和总酚、总类黄酮含量的升高密切相关.     

发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的性质研究

[目的]研究发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的酶学性质.[方法]从发芽咖啡豆中提取α-半乳糖苷酶,研究不同温度和pH下的酶活,并确定该酶的最适温度和pH.研究了不同金属离子和不同离子强度(NaCl)对α-半乳糖苷酶酶活的影响.Lineweaver-Burk双倒数作图法测定该酶的Km和Vmax.[结果]α-半乳糖苷酶的最适温度和pH分别为45 ℃、6.0,热稳定温度范围为20～50 ℃,pH稳定范围为5.0～7.0.Na+、K+、Mg2+和Cu2+对α-半乳糖苷酶酶活的影响不大,Zn2+促进酶活,Ba2+对酶活稍有抑制,Hg2+强烈抑制α-半乳糖苷酶的活性.在0～0.25 mol/L离子强度(NaCI)范围内,α-半乳糖苷酶的酶活不受影响.Lineweaver-Burk双倒数作图法测定该酶的Km和Vmax 分别为0.556 mmol/L、1.19 WnoVmin,[结论]该研究为发芽咖啡豆α-丰乳糖苷酶的进一步应用提供理论指导.