缺血-再灌注对大鼠心肌内源性一氧化氮含量的影响

目的 观察缺血-再灌注过程中心肌-氧化氮(NO)合成和代谢的变化.方法 采用健康SD大鼠(n-6)建立离体心肌缺血-再灌注损伤模型.采用电化学微传感器监测N0含量;采用Griess法监测NO代谢产物含量;采用分光光度计检测一氧化氮合酶(NOS)活性;采用RT-PCR法测定NOS mRNA表达.连续监测心功能.结果 再灌注早期心肌N0含量显著降低(P<0.05),随后升高,但再灌注后各观察时点的心肌NO含量均显著低于基础值平衡末(P<0.05).再灌注早期心肌NO代谢产物增加,随后减少.再灌注早期心肌NOS活性升高,随后降低.再灌注60 min时内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达显著降低(P<0.05),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达变化不大,心肌NO含量与冠脉循环流量(CF)、左室内压(LVDP)、左室压变化速率最大值(dp/dtmax)和左室压变化速率最小值(dp/dtmin)的恢复率成正相关.结论 缺血-再灌注可降低心肌内源性NO含量,主要原因是再灌注早期促进N0消耗而后期抑制N0合成.     

一氧化氮在异丙酚减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨一氧化氮在异丙酚减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 成年雄性SD大鼠,体重220～330 g,采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏灌注模型,选取符合实验标准的心脏模型18个,随机分为3组(n=6):K-H液灌注组(A组)、异丙酚灌注组(B组)和异丙酚+L-NAME灌注组(C组).各组用相应的K-H液灌注15 min,常温全心停灌20 min,然后用相应的K-H液复灌60 min.采用电化学微传感器法测定心肌一氧化氮(NO)含量,免疫组化法测定心肌一氧化氮合酶(NOS)含量,分光光度计测定心肌NOS活性,测定心率、左心室舒张末压、左心室发展压、左心室压变化速率最大值和左心室压变化速率最小值,定时收集右心室流出液以测定冠脉流量.结果 与A组相比,B组和C组复灌后各时点心功能改善(P＜0.05);与C组相比,B组复灌后各时点心功能改善(P＜0.05);B组心肌NO含量和NOS活性较A组升高(P＜0.05),但2组心肌NOS含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺血再灌注导致心肌内源性NO的含量降低.异丙酚减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤可能是通过增加心肌内源性NO生成实现的.     

缺血预处理对糖尿病大鼠在体心肌NO-cGMP表达的影响

目的 通过糖尿病大鼠心肌在缺血预处理(IPC)后环磷酸鸟苷(cGMP)及一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)表达的变化,探讨糖尿病抑制IPC心肌保护作用的机制.方法 取糖尿病及非糖尿病SD大鼠各30只,各分为3组(每组10只).(1)假手术组(Sham组):开胸后穿线做套环,但不收紧结扎线;持续155 min,全程旷置作为基础对照.(2)缺血再灌注组(I/R组):穿线平衡35 min后,持续收紧结扎造成缺血30 min,放松后再灌注90 min.(3)IPC组:穿线平衡35 min后,缺血5min,再灌注5 min,反复3次,而后重复I/R组操作.比较各组血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)的变化,心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性及心肌组织cGMP、NO、NOS含量的变化.电镜标本行线粒体Flameng评分.结果 非糖尿病IPC组与I/R组比较,心肌酶漏出明显减少,MDA含量明显降低,SOD含量明显增加,线粒体损伤明显减轻,cGMP、NO、NOS含量明显增加(P＜0.05);而IPC在糖尿病大鼠未表现出明显心肌保护作用,cGMP、NO、NOS含量无明显增加(P＞0.05).结论 糖尿病抑制IPC的心肌保护作用,其机制可能与糖尿病大鼠心肌NO-cGMP通路表达受抑制有关.     

四氢生物蝶呤的心肌保护作用及对细胞间黏附分子-1表达的影响

目的 探讨四氢生物蝶呤(BH4)对缺血再灌注心肌的保护作用及对细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法 建立Langendorff离体心脏灌注模型，60只Wistar大鼠随机分为实验组(BH4停搏液)和对照组(St．ThomasⅡ液)，每组30只。分别于相应的时间点测定两组心脏功能恢复。心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的含量变化及ICAM-1的表达。结果 BH4能显著提高心脏功能恢复，增强缺血再灌注后NOS的活性，增加NO的产量，抑制ICAM-1的表达并降低MDA的产生(P均＜0．05)。结论 BH4具有显著的抗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用。     

细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1(HO-1)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠,体重220～280g,制备Langendorff离体心脏灌注模型,选取模型制备成功的离体心脏18个,随机分为3组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和PEP-1/HO-1处理+缺血再灌注组(HO-1组).IR组K-H液平衡灌注30 min后,采用停灌40 min再灌注50 min的方法制备缺血再灌注模型.HO-1组在停灌前用含50 μmol/L融合蛋白PEP-1/HO-1的K-H液平衡灌注15 min,S组采用K-H液持续灌注120 min.再灌注50 min时,收集冠脉流出液,测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;取心肌组织,采用Western blot法测定HO-1蛋白表达水平,采用硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性.结果 HO-1组心肌组织HO-1蛋白表达水平较IR组升高(P＜0.01).与S组比较,IR组和HO-1组冠脉流出液CK和LDH活性及心肌组织MDA含量升高,心肌组织SOD活性降低(P＜0.01);与IR组比较,HO-1组冠脉流出液CK和LDH活性及心肌组织MDA含量降低,心肌组织SOD活性升高(P＜0.01).结论细胞穿透肽PEP-1可将HO-1蛋白成功导入心肌组织,并减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

异丙酚对大鼠离体心脏缺血再灌注时NF-κB及iNOS的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠离体心脏缺血再灌注时核因子κB(NF-κB)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响.方法 成年SD大鼠24只,体重200～300 g,雌雄不拘,随机分为3组(n=8):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和异丙酚组(P组).建立Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡20 min后开始实验.C组灌注K-H液110 min;I/R组灌注K-H液20 min后,全心停灌30 min,再灌注60 min;P组用含50 μmol/L异丙酚的K-H液灌注20 min,全心停灌30 min,再用含50 μmol/L异丙酚的K-H液灌注60 min.于平衡末、再灌注10 min和60 min时测定冠状动脉流出液心肌肌钙蛋白(cTnI)浓度;于再灌注60 min时测定心肌SOD活性、MDA含量、iNOS活性及NF-κB、IκB的表达水平.结果 与C组比较,I/R组再灌注期间冠状动脉流出液cTnI浓度升高,P组再灌注期间60 min时升高(P＜0.05或0.01),I/R组心肌SOD活性降低,MDA含量增多,iNOS活性升高(P＜0.01),I/R组和P组心肌NF-κB表达升高,kB表达降低(P＜0.05或0.01).与I/R组比较,P组再灌注期间冠状动脉流出液cTnI浓度、心肌MDA含量、NF-κB表达、iNOS活性均降低,心肌SOD活性和IκB表达升高(P＜0.01).结论 异丙酚可抑制心肌NF-κB的激活,降低iNOS的活性,从而减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.     

一氧化氮(NO)在脊髓缺血再灌注损伤中作用的实验研究

目的　研究一氧化氮 (NO)在脊髓缺血再灌注损伤中的作用。方法　夹闭大鼠腹主动脉制成缺血再灌注模型 ,随机分成L -NAME组和再灌注组 ,L -NAME组每日腹腔注射一氧化氮合酶(NOS)非特异性抑制剂L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME) 10mg/kg体重 ,两周时取大鼠脊髓做NOS免疫组织化学染色、组织学及超微病理观察。结果　脊髓缺血再灌注后前角运动神经元出现固有型一氧化氮合酶 (cNOS)阳性表达 ,同时伴随前角运动神经元损伤 ;应用L -NAME后可减少cNOS的异常表达 ,减轻前角运动神经元损伤。结论　局部组织中NO产生增多可能是脊髓再灌注损伤的机制之一。     

内源性一氧化氮在异氟醚抗心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的:研究内源性一氧化氮(NO)对异氟醚抗心肌缺血再灌注损伤作用的影响。方法:采用大鼠离体心脏Langendorff灌注模型。评价NO合成酶抑制剂L-NOARG和L-NAME对异氟醚保护心肌抵抗缺血再灌注损伤作用的影响。结果:异氟醚能显著增加冠脉流量(CF),促进缺血后再灌注期间心肌收缩功能和ATP含量的恢复。L-NOARG和L-NAME能完全拮抗异氟醚增加CF的作用,并且显著降低了异氟醚对缺血心肌的保护作用。M-受体阻断剂阿托品对异氟醚增加CF的作用无显著影响,但是显著降低了异氟醚的心肌保护作用。再灌注末,对照组和阿托品组心肌ATP含量显著低于其他治疗组(P<0.001);L-NOARG 异氟醚组和L-NAME 异氟醚组显著低于异氟醚组和阿托品 异氟醚Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。结论:内源性NO释放但不是M-受体介导的NO释放参与了异氟醚抗心肌缺血再灌注损伤的保护机制。异氟醚麻醉期间应用M-受体阻断剂有可能降低其心肌保护作用。     

右美托咪啶预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 评价右美托咪啶预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康清洁级雄性Wistar大鼠24只,体重230～ 260 g,制备离体Langendorff心脏灌注模型后,采用随机数字表法,将离体心脏随机分为3组(n=8):缺血再灌注组(I/R组)、右美托咪啶Ⅰ组(DI组)、右美托咪啶Ⅱ组(DⅡ组).各组均先用K-H液平衡灌注10 min后,I/R组用K-H液继续灌注30 min,D I组和DⅡ组分别用含有0.23.、2.30ng/ml右美托咪啶的K-H液继续灌注20 min,再用K-H液冲洗10 min.各组心脏均缺血30 min,K-H液再灌注120 min.于平衡灌注末、再灌注5、30、60和120min时收集冠脉流出液,测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.再灌注末取心肌组织,测定SOD活性及MDA含量.结果 与I/R组比较DⅠ组和DⅡ组冠脉流出液CK、LDH活性、心肌组织MDA含量降低,心肌组织SOD活性升高(P＜0.05);与DI组比较,DⅡ组冠脉流出液CK、LDH活性、心肌组织MDA含量降低,心肌组织SOD活性升高(P＜0.05).结论 右美托咪啶预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,且与浓度有关.     

3-硝基丙酸化学预处理对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的影响

目的研究3-硝基丙酸(3-NPA)化学预处理对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制。方法16只Wistar大鼠随机分为2组,每组8只。实验组(3-NPA组):腹腔注射3-NPAmg·kg-1预处理24h;对照组(C组):腹腔注射等体积生理盐水。采用Langendorff离体心脏灌流模型,两组行常温缺血30min-再灌注60min模拟心肌缺血-再灌注损伤。观察各组缺血前(基础值)和再灌注后30、60min时心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室压力上升和下降最大变化速率(±dp/dtmax),测定再灌注后15min时冠脉流出液肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢(LDH)活性,测定再灌注后60min时心肌丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性。结果与C组比较,3-NPA组LVDP、 dp/dtmax再灌注后30、60min、-dp/dtmax再灌注后60min时升高(P<0.01或0.05),HR组间比较差异无统计学意义(P>0.05),灌注后15min时冠脉流出液CK和LDH活性降低,再灌注后60min时心肌SOD活性明显升高,心肌MDA含量降低。结论4mg·kg-13-NPA预处理对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能是减少氧自由基的产生和提高SOD活性。     

卡托普利心脏停搏液对缺血再灌注心肌NOS活性和NO产生的影响

目的：探讨卡托普利心脏停搏液对缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法：１２只绵羊,随机均分为对照组（Ｉ组）和卡托普利组（Ｉ组）。常规建立体外循环,心脏停搏６０分钟,再灌注３０分钟。Ｉ组采用仁济医院冷晶体停搏液,ＩＩ组在停搏液中加入卡托普利２３μｍｏｌ／Ｌ。观察冠状窦血中一氧化氮（ＮＯ）、肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）、心肌丙二醛（ＭＤＡ）含量及心肌ＮＯ合酶（ＮＯＳ）同功酶活性的变化,监测心肌功能。结果：再灌注后Ｉ组心肌血ＮＯ、ＣＰＫ、ｃＧＭＰ、心肌ＭＤＡ均明显升高,Ｉ组低于Ｉ组（Ｐ＜０．０５或０．０１）。ＩＩ组再灌注后心肌原生型ＮＯ合酶（ｃＮＯＳ）活性明显高于Ｉ组,而诱导型ＮＯ合酶（ｉＮＯＳ）及总ＮＯＳ活性显著低于Ｉ组（Ｐ＜０．０１或０．００１）。两组再灌注后心肌功能均降低,Ｉ组较Ｉ组更为显著。再灌注后ＮＯ的变化与心肌ＭＤＡ和ＣＰＫ之间呈正相关（Ｐ＜０．００１和０．０１）。结论：缺血再灌注心肌损伤与过量ＮＯ产生有关,卡托普利通过调节ＮＯＳ同功酶活性,维持正常ＮＯ水平起到保护作用。     

一氧化氮及其合酶在心肌缺血再灌注损伤中作用的研究

目的：用鼠的离体工作心脏研究心肌缺血再灌注损伤一氧化氮（ＮＯ）、ＮＯ合酶（ＮＯＳ）的作用。方法：ＲＴ－ＰＣＲ定量检测心肌组织结构型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达,测定心肌组织的ｃＮＯＳ、诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）及冠状动脉动脉冠脉）流出液的ＮＯ,同时检测心脏缺血再灌注前后的心功能变化。并分别于次序停跳液中加用缓激肽（ＢＫ）、Ｌ－精氨酸及ＢＫ加Ｌ－精氨酸,观察其对心肌缺血再灌注损伤的影响。结果：心肌     

地塞米松不同时期给药对小鼠肠缺血再灌注损伤及诱导型一氧化氮合酶活性的影响

目的 评价地塞米松不周时期给药对小鼠肠缺血再灌注损伤及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响.方法 健康清洁级雄性昆明小鼠35只,体重20～24 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=7):假手术组(Ⅰ组)、肠缺血再灌注组(Ⅱ组)、地塞米松缺血前给药组(Ⅲ组)、地塞米松缺血期给药组(Ⅳ组)和地塞米松再灌注即刻给药组(Ⅴ组).采用阻断肠系膜上动脉30 min再灌注的方法制备肠缺血再灌注损伤模型.Ⅰ组只分离肠系膜上动脉,不阻断;Ⅱ组和Ⅲ组分别在缺血前30 min经尾静脉注射生理盐水和地塞米松10 mg/kg;Ⅳ组于缺血5 min时、Ⅴ组于再灌注即刻静脉注射地塞米松10 mg/kg.再灌注3h时处死小鼠,取小肠组织,光镜下观察小肠粘膜病理学结果,采用Chiu评分法对小肠病理损伤进行评分;采用硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量,采用比色法检测iNOS的活性.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组～Ⅴ组肠组织Chiu评分、Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组肠组织iNOS活性和NO含量升高(P＜0.05),Ⅲ组肠组织iNOS活性和NO含量差异无统计学意义(P＞0.05);与Ⅱ组比较,Ⅲ组肠组织Chiu评分、iNOS活性和NO含量降低,Ⅴ组肠组织Chiu评分、iNOS活性和NO含量均升高,Ⅳ组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 地塞米松缺血前给药可减轻小鼠肠缺血再灌注损伤,缺血期给药对损伤无明显影响,再灌注即刻给药可加重损伤,可能与地塞米松不同时期用药对iNOS活性影响不同有关.     

诱导型一氧化氮合酶在舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 成年雄性SD大鼠30只,体重250～330 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=6):假手术组(S组)只穿线,不结扎;心肌缺血再灌注组(I/R组)采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型;舒芬太尼预处理组(SF组)缺血前24 h经尾静脉输注舒芬太尼120μg/kg,输注时间30 min;舒芬太尼预处理+iNOS特异性抑制剂S-甲硫脲组(SF+SMT组)缺血前24 h经尾静脉输注舒芬太尼120μg/kg,缺血前10 min静脉注射SMT 10 mg/kg;SMT组缺血前10 min静脉注射SMT 10 mg/kg.于缺血前30 min、缺血30 min、再灌注120 min时记录HR和MAP,计算RPP(SP× HR).于再灌注120 min时取颈动脉血样2 ml,测定血浆NO浓度,随后取心脏制病理切片,测定缺血危险区(AAR)和梗死区(IS)体积,计算心肌梗死体积(IS/AAR),测定心肌iNOS表达.结果 与S组比较,余4组再灌注120 min时MAP和RPP降低,IS/AAR升高,I/R组和SMT组缺血30 min时MAP和RPP降低(P＜0.05);与I/R组比较,SF组、SF+SMT组和SMT组HR、MAP和RPP差异无统计学意义,SF+SMT组和SMT组IS/AAR和血浆NO浓度差异无统计学意义(P＞0.05),SF组IS/AAR降低,血浆NO浓度和心肌iNOS表达升高(P＜0.05).结论 iNOS参与了舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程.

Abstract：

Objective To investigate the role of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in reduction of myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury by sufentanil preconditioning in rats. Methods Thirty adult male SD rats, weighing 250-330 g, were randomly divided into 5 groups ( n =6 each): sham operation group (group S),I/R group, sufentanil preconditioning group (group SF), sufentanil preconditioning + a specific inhibitor of iNOS S-methyl thiourea (SMT) group (group SF+ SMT) and S-methyl thiourea group (group SMT). In I/R,SF,SF+SMT and SMT groups, myocardial I/R was produced by occlusion of left anterior descending coronary artery for 30 min followed by 120 min reperfusion. Group SF received 30 min infusion of sufentanil 120 μg/kg via caudal vein 24 h before ischemia. Group SF + SMT received infusion of sufentanil 120 μg/kg via caudal vein 24 h before ischemia and then SMT 10 mg/kg was injected 10 min before ischemia. In group SMT, SMT 10 mg/kg was injected 10min before ischemia. MAP and HR were recorded at 30 min before ischemia, at 30 min of ischemia and at the end of reperfusion. The rate-pressure product (RPP) was calculated. Arterial blood samples were obtained immediately at the end of reperfusion to determine the plasma concentration of NO. Then the animals were sacrificed and myo cardial tissues were obtained to determine the area at risk (AAR), infarct size (IS) and iNOS expression. IS/AAR was calculated. Results Compared with group S, MAP and RPP were significantly decreased, while IS/AAR was significantly increased at 120 min of reperfusion in the other four groups, and MAP and RPP were significantly decreased at 30 min of ischemia in I/R and SMT groups ( P ＜ 0.05). Compared with group I/R, no significant change was found in HR, MAP and RPP in SF, SF + SMT and SMT groups, and in IS/AAR and plasma NO concentrations in SF + SMT and SMT groups ( P ＞ 0.05), but IS/AAR was significantly decreased, and the plasma NO concentration and iNOS expression were significantly increased in group SF ( P ＜ 0. 05). Conclusion iNOS is involved in reduction of myocardial I/R injury by sufentanil preconditioning in rats.     

丹参对大鼠缺血再灌注肾组织一氧化氮合成酶mRNA表达的影响

目的：探讨丹参对肾缺血再灌注损作保护效应的分子机制。方法：以大鼠缺血再灌汪肾损伤为模型，采用组织细胞原位杂交有图像分析技术技术，检测cNOS（eNOS和nNOS）及iNOSmRNA在缺血再灌注肾组织中的表达，并测定肾组织NOS总活性有血肌酐（Cr）。结果：①3种NOS在正常肾组织中均有表达，其中eNOS表达最丰富，cNOS／iNOS比值为2．29。②缺血时，肾组织NOS总活性显著下降，3种NOSmRNA在皮质、髓质有小球中的表达均下调，以eNOS最显著，cNOS／iNOS比值呈下降（2．01）趋势。③再灌注后，3种NOSmRNA的表达明显上调，以iNOSmRNA最明显，cNOS／iNOS的比值降至1．77。④肾缺血注射丹参后再灌注，iNOSmRAN表达明显下调，而nNOSmRAN则显著上调，cNOS／iNOS比值处于正常范围（2．14），Cr含量下降至正常水平。结论：①皮质肾小管上皮中iNOS活性升同与再灌汪后肾功能进一步受损密切相关。②缺血再灌注肾损伤中，丹参抑制iNOSmRNA和促进cNOSmRNA的表达是其介导肾保护效应的重要分子机制。③cNOS／iNOS比值的恒定对肾血流量和肾小球滤过率（GFR）的调节可能具有重要的意义。     

艾芬地尔预先给药对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血半暗带区iNOS和细胞凋亡的影响

目的 观察艾芬地尔预先给药对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血半暗带区诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和细胞凋亡的影响,探讨艾芬地尔脑保护的可能机制.方法 健康雄性SD大鼠54只,体重280～320 g,周龄9～10周,随机分为3组(n=18):假手术组(S组);缺血再灌注组(IR组)缺血前即刻腹腔注射与艾芬地尔等容量的生理盐水;艾芬地尔预先给药组(IF组)缺血前即刻腹腔注射艾芬地尔10 mg/kg(5 mg/ml).IR组和IF组制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,阻闭2 h后恢复再灌注48 h.于再灌注结束时进行神经功能评估,随后断头取脑,测定梗死核心区和缺血半暗带区iNOS表达、iNOS酶活性及NO含量,观察细胞凋亡情况.结果 与S组比较,IR组和IF组神经功能缺陷评分升高,缺血半暗带区和梗死核心区iNOS表达上调,iNOS活性升高,NO含量升高,凋亡细胞计数增多(P<0.01);与IR组比较,IF组梗死核心区域减小,神经功能缺陷评分降低,缺血半暗带区和梗死核心区iNOS表达下调,iNOS活性降低,NO含量降低,缺血半暗带区凋亡细胞计数减少(P<0.05).与梗死核心区比较,缺血半暗带区IR组和IF组iNOS活性和NO含量降低,凋亡细胞计数增高(P<0.05).结论 艾芬地尔预先给药通过下调缺血半暗带区iNOS蛋白表达,降低iNOS活性和NO含量,减少细胞凋亡,从而发挥脑保护作用.     

一氧化氮在七氟醚预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价一氧化氮在七氟醚预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性新西兰大白兔40只,体重2.1～2.9 kg,随机分为5组(n=8):缺血再灌注组(IR组)、七氟醚预处理组(SEV组)、L-NAME组、七氟醚预处理+L-NAME组(SL组)和L-NAME+七氟醚预处理组(LS组).采用结扎冠状动脉前降支45 min,再灌注3 h的方法制备兔心肌缺血再灌注模型.SEV组吸入1.7%七氟醚30 min,洗脱15 min行预处理后制备模型;L-NAME组静脉注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME 1 mg/kg,5 min后制备模型;SL组七氟醚预处理后,静脉注射L-NAME 1 mg/kg,5 min后制备模型;LS组静脉注射L-NAME 1 mg/kg,5 min后行七氟醚顶处理,制备模型.于模型制备前即刻(T0)、心肌缺血45 min(T1)、再灌注60 min(T2)、120 min(T3)、180 min(T4)时记录HR、MAP、左室收缩压(LVSP)和左室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax),于T4时抽取股动脉血3 ml,测定血浆心肌肌钙蛋白T(cTnT)浓度、心肌磷酸肌酸激酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,取心室肌组织,测定心肌缺血危险区(AAR)和梗塞区(IS)面积,并计算IS/AAR.结果 与IR组比较,SEV组缺血再灌注时+dp/dtmax升高,血浆cTnT浓度、CK-MB和LDH活性和心室肌IS/AAR降低(P<0.05),其余组上述指标差异均无统计学意义(P0.05).结论 一氧化氮参与了七氟醚预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤,一氧化氮可能是其保护作用中某一通路上的信号分子.     

早期肠道喂养对烧伤大鼠肠道一氧化氮合酶的影响

目的阐明烧伤大鼠经早期肠道喂养后肠组织中一氧化氮合酶(NOS)的变化规律及其与肠粘膜血流量(IMBF)的关系。方法采用30％TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,分为正常对照(C)组,单纯烧伤(B)组和早期喂养(EF)组,分别检测伤前及伤后0,3,6,12,24,48小时肠组织中 NOS 活性,包括原生型 NOS(cNOS)和诱导型 NOS(iNOS),并测定肠粘膜血流量。结果烧伤后各组 cNOS 和 IMBF 呈下降趋势,二者呈显著正相关(r=0.97,P<0.01),而 NOS 总活性和 iNOS 活性都呈上升趋势,IMBF 与 iN-OS 和总 NOS 相关不显著。烧伤后 EF 组 cNOS 和 IMBF 明显高于 B 组,iNOS 则低于 B 组,NOS 总活力两组无显著差异。结论①两型 NOS 中 cNOS 与 IMBF 的关系更加密切。②早期肠道喂养改善烧伤后肠道缺血状况,可能与食物对肠壁神经的刺激从而提高 cNOS 活性有关。     

一氧化氮在吗啡后处理抑制大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨一氧化氮在吗啡后处理抑制大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠60只,体重280～330 g,随机分为4组(n=15):假手术组(S组)只穿线不结扎;缺血再灌注组(I/R组)结扎左冠状动脉前降支45 min,再灌注120 min;吗啡后处理组(M组)再灌注前3 min至再灌注2 min经左颈内静脉注射吗啡1.25 mg/kg;L-NAME+吗啡后处理组(L+M组)左冠状动脉前降支结扎前20 min静脉注射L-NAME 10 mg/kg.分别于缺血前、缺血20 min及再灌注120 min时监测心率(HR)和平均动脉压(MAP),并计算HR与收缩压(SP)的乘积(RPP);于再灌注120 min时取心肌,采用TUNEL法检测心肌凋亡细胞,计算心肌细胞凋亡指数(AI),采用Western blot法检测总内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS蛋白的表达水平,计算磷酸化eNOS蛋白表达与总eNOS蛋白表达的比值(p-eNOS/eNOS),硝酸盐还原酶法测定心肌NO含量.结果 I/R组、M组及L+M组间各时点HR、MAP及RPP差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,其余各组AI升高,I/R组和L+M组心肌NO含量降低,M组升高(P<0.05);与I/R组比较,M组AI降低,M组心肌NO含量升高(P<0.05),L+M组差异无统计学意义(P>0.05),M组和L+M组p-eNOS/eNOS升高(P<0.05);与M组比较,L+M组AI升高,心肌NO含量降低(P<0.05),p-eNOS/eNOS差异无统计学意义(P>0.05).结论 吗啡后处理可通过激活eNOS促进NO产生,抑制大鼠缺血再灌注损伤诱发的心肌细胞凋亡.