自身免疫性甲状腺病患者白细胞介素及受体基因表达的研究

目的 观察３７例自身免疫性甲状腺病（ＡＩＴＤ）患者甲状腺组织中相关白细胞介素（ＩＬ）及受体基因表达,并测定血清ＴＴ３,ＴＴ４及ＴＧＡ,ＴＭＡ的水平,结果表明格莱弗氏病（ＧＤ）患者ＩＬ－２,ＩＬ－２Ｒ及ＩＬ－６ｍＲＮＡＡ表达细胞阳性率与血清ＴＴ３,ＴＴ４水平呈正相关。桥本氏甲状腺炎（ＨＴ）患者ＩＬ－２,ＩＬ－２Ｒ,ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达细胞阳性率与血清ＴＧＡ ＴＭＡ呈正相关。     

白芍总甙对B淋巴细胞增殖和白介素1生成的调节作用

白芍总甙（ＴＧＰ）对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应的量效曲线呈钟形，用贴壁法除去脾细胞中巨噬细胞（ＭΦ）或加入１０μｍｏｌ·Ｌ１吲哚美辛（Ｉｎｄ）可使ＴＧＰ量效曲线的下降支消失，再加５％同系小鼠腹腔ＭΦ中或前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）０．０２２０μｍｏｌ·Ｌ１可使量效曲线下降支再现．同步检测ＴＧＰ对ＬＰＳ诱导大鼠腹腔ＭΦ产生ＰＧＥ２与白介素１（ＩＬ１）．结果表明，ＴＧＰ０．５－３ｌ２．５μｇ·ｍＬ１对ＬＰＳ诱导的ＩＬ－１产生曲线呈钟形．而ＴＧＰＬＰＳ的ＰＧＥ２产生曲线呈浓度依赖性地增高；在１２．５－３１２．５μｇ·ｍＬＴＧＰ范围内，１０μｍｏｌ·Ｌ１Ｉｎｄ可使高浓度ＴＣＰＬＰＳ的ＩＬ－１释放曲线明显抬高。提示ＴＧＰ对ＬＰＳ诱导的Ｂ细胞增殖反应和ＩＬ－１诱生的负调节作用都与其促进ＭΦ释放ＰＧＥ２有关．     

一氧化氮和白细胞介素—10对小鼠肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因？…

目的 观察一氧化氮和ＩＬ－１０对肺泡巨噬细胞炎症反应的调节作用,方法：小鼠肺泡汇噬细胞（ＡＭ）受脂多糖（ＬＰＳ）１０ｍｇ．Ｌ＾－１刺激同时,加入一氧化氮合酶抑制剂Ｓ－硫酸甲基异硫脲（ＳＭＴ）或一氧化氮供体Ｓ－亚硝基乙酰青霉胺（ＳＮＡＰ）,ＥＬＩＳＡ法测定上清液中ＴＮＦα,ＩＬ－１β,ＩＬ－６和ＩＬ－１０浓度,结果：ＡＭ受ＬＰＳ刺激后,ＴＮＦα,ＩＬ－１β和ＩＬ－６释放峰值分别在６,１２和２４小时,     

苦参碱对体外小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素—1…

目的：研究苦参碱对小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素－１（ＩＬ－１）及－６（ＩＬ－６）的影响，方法：（＾３Ｈ）ＴｄＲ参入法测定脾细胞增殖，胸腺细胞增殖法和Ｂ９细胞增殖ＭＴＴ法测定ＩＬ－１和ＩＬ－６活性。结果，苦对碱（１２５－５００ｍｇ．Ｌ＾－１）以剂量依赖方式显著抑制ＣｏｎＡ及脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾细胞增殖心及ＬＰＳ诱导的的小鼠腹腔巨噬细胞释放ＩＬ－２和ＩＬ－６。结论：苦参碱抑制体个     

苦参碱对体外小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素－1及－6的影响

目的：研究苦参碱对小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素１（ＩＬ１）及６（ＩＬ６）的影响．方法：［３Ｈ］ＴｄＲ参入法测定脾细胞增殖，胸腺细胞增殖法和Ｂ９细胞增殖ＭＴＴ法测定ＩＬ１和ＩＬ６活性．结果：苦参碱（１２５－５００ｍｇ·Ｌ－１）以剂量依赖方式显著抑制ＣｏｎＡ及脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾细胞增殖以及ＬＰＳ诱导的小鼠腹腔巨噬细胞释放ＩＬ１和ＩＬ６．结论：苦参碱抑制体外小鼠脾细胞增殖及巨噬细胞分泌ＩＬ１和ＩＬ６．     

黄芪多糖对烧伤小鼠细胞免疫功能的作用

应用小鼠烧伤模型，对黄芪多糖（ＡＰＳ）的免疫增强作用进行了体内外研究。结果表明：体内应用ＡＰＳ（２５０ｍｇ·ｋｇ－１，ｑｄ，连续５ｄ），可明显提高烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ的表达；体外分别应用５０、１００、２５０ｍｇ·Ｌ－１的黄芪多糖，发现其可纠正烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ表达的受抑状态，并促进巨噬细胞产生ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，且呈剂量依赖关系；体外去除烧伤小鼠脾细胞中的巨噬细胞后，ＡＰＳ对Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用消失。提示ＡＰＳ对烧伤小鼠的免疫调节作用依赖于巨噬细胞，通过调节其分泌ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，而促进ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达，进而增强Ｔ淋巴细胞增殖。     

三种植物多糖对小鼠脾细胞产生IL－2影响

三种植物多糖对小鼠脾细胞产生ＩＬ－２影响佟丽，黄添友，吴波，梁谋（第一军医大学中西医结合研究所，广州５１０５１５）本文采用活化小鼠脾细胞法检测ＩＬ－２活性，观察了刺五加多糖（ＰＰＳ）、茯苓多糖（ＡＳＰＳ）和银耳多糖（ＴＦ）对小鼠脾细胞产生ＩＬ－２的影...     

半边旗中二萜类化合物6F对肝癌细胞SPC-A-1细胞周期及细胞DNA、RNA和蛋白质合成的影响

目的研究半边旗中二萜类有效成分之一６Ｆ对肺癌细胞细胞周期及细胞中ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成的影响。方法采用体外培养的人癌细胞株——肺腺癌上皮细胞ＳＰＣ－Ａ－１作实验对象,以噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定细胞存活率;用细胞光度术（ＦＣＭ）测定６Ｆ对ＳＰＣ－Ａ－１细胞周期的影响［３Ｈ］－ＴｄＲ、［３Ｈ］－ＵＴＲ和［３Ｈ］－Ｌｅｕ参入的方法观察６Ｆ对ＳＰＣ－Ａ－１细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成的影响。结果化合物６Ｆ可强烈抑制ＳＰＣ－Ａ－１细胞的生长,２４ｈ的半数抑制浓度ＩＣ５０为２．３４μｍｏｌ·Ｌ－１;细胞周期分析显示６Ｆ作用细胞２４ｈ后,均能使细胞的Ｇ２／Ｍ期细胞比例升高,同时Ｇ０／Ｇ１期比例下降,并呈一定的剂量效应关系,６Ｆ对［３Ｈ］－ＴｄＲ、［３Ｈ］－ＵＴＰ和［３Ｈ］－Ｌｅｕ参入作用在培养２４ｈ后均有明显抑制作用,且呈剂量依赖关系。结论化合物６Ｆ明显抑制ＳＰＣ－Ａ－１细胞的生长,阻断细胞于Ｇ２／Ｍ期,抑制细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质的合成。     

多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞IL-6的表达

应用双标记免疫荧光技术检测了１６例多发性骨髓瘤患者和１９例缓解期血液病患者新鲜骨髓单个核细胞中ＩＬ－６表达情况，结果多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中ＩＬ－６表达阳性率为１５．４±６５％，基质细胞ＩＬ－６表达阳性率为４．５±１．２％；分别高于对照组的４．６±２．３％、２．６±１．１％（Ｐ＜０．０１）；另外多发性骨髓瘤组骨髓单个核细胞中基质细胞所占比率为６９±１．４％，也高于对照组的４．７±１．８％（Ｐ＜０．０１）。多发性骨髓瘤患者升高的ＩＬ－６可由基质细胞分泌，参与了本病的发病     

白芍总甙对正常人与类风湿性关节炎患者单核细胞和淋巴细胞功能的影响

０．１～２．５ｍｇ·Ｌ－１白芍总甙（ＴＧＰ）对正常人的ＬＰＳ诱导外周血单个核细胞产生ＩＬ－１．ＰＨＡ－Ｐ诱导淋巴细胞增殖反应和ＩＬ－２产生均呈现浓度依赖性的双向作用；ＴＧＰ还可浓度（０．１～１２．５ｍｇ·Ｌ－１）依赖性地降低正常人淋巴细胞上ＩＬ－２Ｒ的密度．ＴＧＰ能使类风湿性关节炎（ＲＡ）患者低下的ＰＨＡ－Ｐ致分裂素反应与ＩＬ－２产生能力恢复正常，使外周血中减少的Ｔｓ细胞数目回到正常水平．但可使ＲＡ患者ＰＢＭＣ过度产生ＩＬ－１降低至正常范围．并能显著降低ＲＡ患者增高的淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ的密度。上述结果表明．ＴＧＰ对ＲＡ患者有明显的机能依赖性免疫调节作用．ＴＧＰ对ＲＡ的治疗作用可能与其调整ＲＡ患者异常的免疫功能有关。     

烧伤小鼠血清对离体培养的骨髓基质细胞的影响

目的　研究小鼠烧伤血清对离体培养的骨髓基质细胞的影响。方法　利用流式细胞仪、HE染色等技术观察小鼠烧伤后不同时间的血清对小鼠骨髓基质细胞 (BMSC)贴壁率和基质祖细胞 (CFU F)集落形成的作用及对不同剂量的6 0 Coγ射线体外照射后的BMSC的影响。结果　小鼠烧伤后 1～ 11d的血清对基质细胞贴壁率和CFU F的形成主要表现为抑制作用 ,13～ 15d的血清主要表现为刺激作用。小鼠烧伤后 15d的血清可明显减少 5 0、70Gy照射后BMSC的凋亡和坏死。 结论　小鼠烧伤后不同时间的血清对BMSC的作用不同 ,可能与血清内细胞因子的变化有关。     

人参三醇皂甙促进人白细胞介素6转译的生物学效应

将PHA激活淋巴结细胞作为研究对象,观察了人参三醇皂甙(PTGS)对人白细胞介素6(IL-6)分泌的促进效应。应用同位素示踪技术观察细胞RNA合成和蛋白质合成与IL-6分泌的关系,结合IL-6mRNA体外转译体系,探讨了PTGS促IL-6诱生的机理。结果表明PTGS对IL-6基因的转录环节无明显作用,但对IL-6基因的转译环节具明显促进效应。     

不同浓度胎牛血清对骨髓基质细胞产生细胞因子水平影响的研究

目的通过比较使用不同浓度胎牛血清(FBS)培养的骨髓基质细胞(BMSCs)产生某些细胞因子的量,揭示FBS对BMSCs产生细胞因子是否有影响。方法采用密度梯度离心法分离骨髓单一核细胞,分别使用10%和20%FBS通过贴壁法培养BMSCs,收集传3代后又培养72h的BMSCs及培养上清,用流式细胞仪鉴定细胞表面标志并用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清液中白细胞介素(IL)-7、IL-8和干细胞因子(SCF)的水平。结果90%以上细胞表面抗原高表达CD29,而CD34、CD45及HLA-DR表达阴性,即BMSCs纯度在90%以上;两组BMSCs培养上清液中IL-7、IL-8和SCF的水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论胎牛血清对BM-SCs产生细胞因子没有影响。     

bFGF对骨髓基质细胞的增殖作用及其临床意义

目的探讨成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓前体细胞的增殖作用及其临床意义。方法分离骨髓前体细胞体外培养,用碱性磷酸酶化学染色及图像分析测定细胞克隆数;采用免疫组化(ABC法)检测ALP、骨钙素及钙,研究bFGF对NASP的促增殖作用。结果骨髓细胞中许多基质前体细胞以非贴壁细胞形式存在,bFGF不仅能促进NASP细胞增殖,而且能诱导NASP细胞向成骨细胞分化。结论bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞,bFGF能增加骨细胞的数量,促进骨样组织形成,为临床用bFGF治疗骨折、骨不连提供理论依据。     

碱性成纤维细胞生长因子对非贴壁骨髓基质前体细胞增殖及分化作用的研究

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对非贴壁骨髓前体细胞的增殖及分化作用。方法　分离骨髓前体细胞体外培养 ,用碱性磷酸酶化学染色及图像分析仪测定细胞克隆数 ;采用免疫组化 (ABC法 )检测PCNA、Ⅰ型胶原、钙及骨钙素。研究bFGF对非贴壁前体细胞的促增殖及分化作用。结果　骨髓细胞中许多基质前体细胞以非贴壁前体细胞 (NASP)形式存在 ,bFGF不仅能促进其增殖 ,而且能诱导其向成骨细胞分化。结论　bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞 :能增加骨细胞的数量 ,促进骨样组织形成 ,为临床用bFGF治疗骨折、骨不连提供理论依据。     

Role of mitogen-activated protein kinase family in serum-induced leukaemia inhibitory factor and interleukin-6 secretion by bone marrow stromal cells

1: In the haematopoietic microenvironment, bone marrow stromal cells play an important role in regulating haematopoiesis by expressing various cytokines, including leukaemia inhibitory factor (LIF) and interleukin-6 (IL-6). However, the intracellular signal that regulates cytokine secretion in bone marrow stromal cells has not been determined. The aim of this study was to evaluate the role of mitogen-activated protein kinase (MAPK) family in serum-induced secretion of LIF and IL-6 by bone marrow stromal cells. 2: Transformed human bone marrow stromal cells (HS-5) were stimulated with foetal calf serum (FCS) to produce LIF and IL-6. FCS also induced activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK), p38 MAPK and c-Jun NH(2)-terminal kinase (JNK). 3: Both PD98059 (MAPK/ERK kinase inhibitor) and SB203580 (p38 MAPK inhibitor) attenuated FCS-induced LIF protein production and gene expression. SB203580 decreased IL-6 production and gene expression, but PD98059 had no effect on IL-6 production and gene expression. 4: Expression of a dominant-negative mutant form of JNK1 that blocked FCS-induced JNK activity had no effect on protein production and gene expression of these cytokines. 5: These findings demonstrate that both ERK and p38 MAPK are involved in FCS-induced LIF secretion, whereas only p38 MAPK is important for IL-6 secretion, and that FCS-induced activation of JNK has no effect on the production of LIF and IL-6. We conclude that, in spite of their similar biological effects, they are differentially regulated at the level of MAPK activity in bone marrow stromal cells.     

肝脂素对急性白血病骨髓基质细胞造血调控作用的研究

目的研究肝脂素对急性白血病骨髓基质细胞造血的调控作用。方法ELISA法检测细胞因子,光镜观察骨髓基质细胞形态。结果肝脂素可选择性作用于急性白血病骨髓基质细胞,使网状细胞转变为小梭形正常基质细胞。抑制急性白血病基质细胞集落的生长,使ALL与AML基质细胞集落生长情况与正常趋向一致,ALL与AML的TNFα分泌明显下降(P<0.05),AML的IL-6明显下降(P<0.01),IL-1升高。结论肝脂素能诱导急性白血病造血微环境中的基质细胞向正常转化,发挥正常造血调控作用,为急性白血病的脂类治疗提供了一种新的方法。     

Cell-specific metabolism in mouse bone marrow stroma: studies of activation and detoxification of benzene metabolites.

Two of the major cell types in bone marrow stroma, macrophages and fibroblasts, have been shown to be important regulators of both myelopoiesis and lymphopoiesis. The enzymology relating to cell-specific metabolism of phenolic metabolites of benzene in isolated mouse bone marrow stromal cells was examined. Fibroblastoid stromal cells had elevated glutathione-S-transferase (4.5-fold) and DT-diaphorase (4-fold) activity relative to macrophages, whereas macrophages demonstrated increased UDP-glucuronosyltransferase (UDP-GT, 7.5-fold) and peroxidase activity relative to stromal fibroblasts. UDP-GT and glutathione-S-transferase activities in macrophages and fibroblasts, respectively, were significantly greater than those in unpurified white marrow. Aryl sulfotransferase activity could not be detected in either bone marrow-derived macrophages or fibroblasts, and there were no significant differences in GSH content between the two cell types. Because UDP-GT activity is high in macrophages, these data suggest that DT-diaphorase levels would be rate limiting in the detoxification of benzene-derived quinones in bone marrow macrophages. The peroxidase responsible for bioactivation of benzene-derived phenolic metabolites in bone marrow macrophages is unknown but has been suggested to be prostaglandin H synthase (PGS). Hydrogen peroxide, but not arachidonic acid, supported metabolism of hydroquinone to reactive species in bone marrow-derived macrophage lysates. These data do not support a major role for PGS in peroxidase-mediated bioactivation of hydroquinone in bone marrow-derived macrophages, although PGS mRNA could be detected in these cells. Similarly, hydrogen peroxide, but not arachidonic acid, supported metabolism of hydroquinone in a human bone marrow homogenate. Peroxidase-mediated interactions between phenolic metabolites of benzene occurred in bone marrow-derived macrophages. Bioactivation of hydroquinone to species that would bind to acid-insoluble cellular macromolecules was increased by phenol and was markedly stimulated by catechol. Bioactivation of catechol was also stimulated by phenol but was inhibited by hydroquinone. These data define the enzymology and the cell-specific metabolism of benzene metabolites in bone marrow stroma and demonstrate that interactions between phenolic metabolites may contribute to the toxicity of benzene in this critical bone marrow compartment.     

人参皂苷Rg1对培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖影响的机制研究

目的研究人参皂苷Rg1对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖影响的可能机制。方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,分为药物干预组、对照组,药物干预组以1×10-6mol.L-1人参皂苷Rg1孵育48h,对照组未加药物常规培养;分别用骨髓CFU-F体外培养法、胸腺嘧啶核苷参入法及MTT法测定大鼠BMSC的增殖情况,同时测定BMSC的GATA转录因子1～3的表达及其与DNA结合活性。结果人参皂苷Rg1刺激后BMSC的GATA1和GATA2 mRNA表达与对照组相比分别上调1.42±0.31(P<0.01)和2.70±0.73(P<0.01)倍,并且人参皂苷Rg1刺激后BMSC的GATA与DNA结合活性明显增高。结论人参皂苷Rg1可促进大鼠BMSC增殖,其机制可能是通过上调GATA1和GATA2的表达以及其与DNA的结合活性来实现。