超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中9种大环内酯类抗生素

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定9种大环内酯类抗生素药物的分析方法。方法采用响应面法优化净化方法。样品经1%甲酸-乙腈提取,提取液经50 mg C₁₈、80 mg N-丙基乙二胺(primary secondary amine,PSA)、100 mg MgSO₄净化,Waters ACQUITY UPLC HSS T₃色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)进行分离,采用电喷雾正离子多反应监测扫描(multiple reaction monitoring,MRM)模式下进行测定,外标法定量。结果其中8种抗生素线性范围1~50 ng/mL,替米考星为5~50 ng/mL,相关系数(r²)在0.9910-0.9993之间。替米考星检出限为2.5μg/kg,定量限为10μg/kg,其余8种化合物检出限均为0.5μg/kg,定量限均为2μg/kg。在低(替米考星10μg/kg,其他2μg/kg)、中(替米考星20μg/kg,其他10μg/kg)、高(替米考星40μg/kg,其他20μg/kg)3个添加水平下进行加标回收实验,9种抗生素平均回收率在81.30%~105.30%之间,相对标准偏差在0.77%~2.41%之间(n=6)。结论该方法操作简单、净化效果好、灵敏度、准确度和精密度均符合多残留检测技术要求,解决了大环内酯抗生素检测提取过程过于繁琐的问题,可为食品抗生素残留检测提供更方便、更快捷的检测方法支持。     

苏丹红残留酶联免疫检测技术研究

通过对苏丹红分子结构进行改造,制备了半抗原及人工抗原,免疫动物,制备了苏丹红特异性抗体.该抗体是灵敏度为0.5μg/L,对苏丹红Ⅰ号交叉反应率为100%,对对位红交叉反应率为120%,对于苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号均小于1%.基于该抗体建立了简介竞争性酶联免疫法检测辣椒酱最低检测限(LOD)为27.64μg/kg,定量限(LOQ)为30μg/kg,30μg/kg～90μg/kg添加水平回收率为96.7%～134.1%,变异系数小于15%,可初步用于苏丹红的实验室分析.     

UPLC-MS/MS检测猪肉中3种大环内酯类药物残留量

建立了瘦猪肉中大环内酯类抗生素红霉素、替米考星、林可霉素的超高效液相色谱-串联质谱/质谱检测方法。猪肉样品经0.1%甲酸乙腈水(80∶20)溶液提取、Oasis PRi ME HLB固相萃取小柱通过式净化、反相液相色谱分离后进行质谱分析,在电喷雾正离子(ESI+)模式,多反应监测(MRM)下进行特征母、子离子对信号采集。根据保留时间和母离子及两个特征子离子信息进行定性分析,以基峰离子进行定量。结果表明:红霉素、替米考星、林可霉素在1.0~20μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数(r2)均大于0.99,空白样品加标回收率范围为73.6%~103.6%,相对标准偏差小于10.0%。红霉素、替米考星、林可霉素(目标化合物)方法检出限(LOD)为1.0μg/kg。该方法操作简便、准确、灵敏、重现性好、基质干扰少,适用于瘦猪肉中红霉素、替米考星、林可霉素的测定。     

沙丁胺醇ELISA方法的建立及应用

为建立1种快速检测沙丁胺醇的ELISA方法,以制备的抗沙丁胺醇(salbutamol,SAL)高亲和力单克隆抗体为基础,从影响ELISA检测结果的因素出发,优化间接竞争ELISA条件。通过添加标准沙丁胺醇溶液进行验证。试验结果表明:ELISA反应的最佳反应条件:包被温度37℃,包被时间1 h,竞争时间0.5 h,包被质量浓度1μg/mL,抗体稀释度1∶32 000。在此条件下建立标准曲线。该方法对沙丁胺醇的检测线性范围为0.1~128μg/L,IC50为1.35μg/L,最低检测限(LOD)为0.2μg/L,添加回收率83.8%~89.7%,变异系数均小于11%。采用该方法检测喂药动物尿液中的沙丁胺醇残留,特异性高,适用于猪尿中沙丁胺醇残留的初步筛选。     

牛奶中泰乐菌素和替米考星的胶体金免疫层析法测定

建立一种快速、简便、同时针对牛奶中泰乐菌素和替米考星残留的检测方法.应用竞争抑制免疫层析原理,研制出泰乐菌素和替米考星胶体金试纸条,并对其性能进行了鉴定.结果表明,该试纸条对牛奶中泰乐菌素和替米考星的检测限分别为25 μg/L和50 μg/L.假阳性率低于5％,假阴性率为0,检测时间10 min,与其他大环内酯类抗生素无交叉反应.该方法操作简便、灵敏度高、特异性强,适用于乳品流通环节中泰乐菌素和替米考星残留的快速检测.     

固相萃取-高效液相色谱法测定猪肉与鸡肉中替米考星、泰乐菌素残留量

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定猪肉与鸡肉中替米考星、泰乐菌素残留量的检测方法.样品用乙腈提取,C18固相萃取小柱净化,采用高效液相色谱分离,二极管阵列检测器(PDA)检测,外标法定量.结果表明:标准校准曲线在30～1000μg/L的范围内呈良好线性关系,相关系数r＞0.999.样品中替米考星、泰乐菌素的添加水平分别为0.05、0.10、0.15mg/kg时,样品加标回收率为72.7％～90.8％,变异系数在2.6％～8.3％之间,替米考星和泰乐菌素方法检出限30μg/kg,定量限为50μg/kg.本法简便、快速、定量准确、精密度高,适用于猪肉和鸡肉中替米考星与泰乐菌素残留量的检测.     

中空纤维液相微萃取-高效液相色谱法测定牛奶中3种大环内酯类抗生素残留

目的:应用基于中空纤维的液相微萃取(HF-LPME)新技术建立牛奶样品中替米考星、麦迪霉素和交沙霉素3种大环内酯类抗生素的液相色谱分析方法.方法:采用中空纤维液相微萃取和液相色谱联用技术,对影响HF-LPME的试验条件进行优化.经过优化,选用7 cm的聚丙烯中空纤维,在样品溶液pH 8.5、磁力搅拌速度1 000 r/min及室温条件下萃取20 min,在氮气流下吹干有机溶剂,然后用12μL乙腈溶解,进样10μL进行色谱分析.结果:在优化的试验条件下,替米考星、麦迪霉素和交沙霉素的富集倍数分别为34、52和47倍,线性范围均在0.05～5μg//mL之间,相关系数(r2)分别为0.9978、0.9986和0.9989,检出限分别为5、2和2 ng/mL(S/N=3).该方法用于牛奶中替米考星、麦迪霉素和交沙霉素3种抗生素的测定,加标回收串为79.0%～105.3%,相对标准偏差(RSD)为5.3%～9.4%.结论:该方法揉作简便,具有较高的灵敏度,适于牛奶中抗生素残留的检测.     

基于QuEChERS方法的鸭蛋兽药残留快速检测方法的构建

试验建立了基于QuEChERS法测定鸭蛋中4种大环内酯类(红霉素、替米考星、吉他霉素和泰乐霉素)和4种喹诺酮类(诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星和恩诺沙星)抗生素的方法,用于高效快速检测鸭蛋中兽药残留情况。样品经前处理后,以0.2%甲酸-水溶液和0.2%甲酸-乙腈溶液作为流动相,采用梯度洗脱方式进行UPLC-ESIMS/MS检测。结果表明, 4种大环内酯类和4种喹诺酮类化合物在1～100μg/kg浓度范围内线性关系良好,相关系数(R~2)均大于0.99,检出限为0.010～0.174μg/kg,定量限为0.034～0.576μg/kg。采用5, 50和100μg/kg的标准液添加浓度得到的回收率均在70%以上,相对标准偏差(RSD)小于10%(个别除外)。该方法灵敏度高,重复性好,操作简便,效率极高,各项技术指标均满足国内外相关法规要求,可用于鸭蛋样品中兽药残留的分析检测。     

QuEChERS技术结合高效液相色谱-串联质谱法快速测定动物源性食品中克伦特罗的残留量

目的 建立一种高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)快速检测动物源性食品中克伦特罗残留量。方法 样品经β-葡萄糖醛甘酶酶解,乙腈提取,经过ProElut QuEChERS净化管净化。采用0.1%甲酸(A)和乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,用多反应监测模式(multiple reaction monitoring, MRM)对克伦特罗含量进行检测。结果 该方法可以在15 min内完成目标物的分离分析。克伦特罗在0.5、1、5μg/kg添加水平的回收率为90.0%～94.3%,相对标准偏差小于10%(n=6),方法检出限为0.5μg/kg。结论 该方法快速、准确、灵敏,适合用于动物源性食品中克伦特罗的残留量的测定。     

一种检测动物组织中呋喃西林代谢物快速检测检测卡的研制

利用胶体金免疫层析技术研制一种快速检测动物组织中呋喃西林代谢物的胶体金试纸卡,检测卡包含了胶体金标记物的制备,样品垫和反应膜的制备,检测卡的组装等研究步骤,所研制出的呋喃西林代谢物胶体金快速检测卡,对动物组织的检出限达到0.5μg/kg,检测时间为10 min,假阳性率小于5%,假阴性率为0%,该试纸卡能够准确、可靠。简便地检测动物组织中呋喃西林代谢物,适合大量样品的现场检测。