舒芬太尼调控LINC00668对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响

【摘要】 目的 研究舒芬太尼调控LINC00668对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。 方法 分别给予终浓度为25 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL的舒芬太尼处理A2780细胞,记为实验1、2、3组,正常培养的细胞作为对照组;将si NC、si LINC00668分别转染至A2780细胞中,记为si NC组、si LINC00668组;将pcDNA3.1、pcDNA31 LINC00668转染至A2780细胞中,同时用100 ng/mL的舒芬太尼处理,记为实验3组+pcDNA3.1组、实验3组+pcDNA31 LINC00668组。流式细胞仪检测细胞周期;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率;蛋白质印迹（Western blot）法检测Ki67、pro caspase 3、clv caspase 3蛋白表达;实时荧光定量PCR（RT qPCR）检测LINC00668表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡。 结果 50 ng/mL、100 ng/mL舒芬太尼处理的A2780细胞中G0期细胞所占比例显著升高,S期细胞所占比例显著降低（P＜005）,G1期细胞所占比例无显著变化（P＞005）;细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,Ki67、pro caspase 3表达水平显著降低,clv caspase 3表达水平显著升高,LINC00668表达水平显著降低（P＜005）。抑制LINC00668表达,G0期细胞所占比例显著升高,S期细胞所占比例显著降低（P＜005）,G2期细胞所占比例无显著变化（P＞005）;细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,Ki67、pro caspase 3表达水平显著降低,clv caspase 3表达水平显著升高（P＜005）。过表达LINC00668逆转了舒芬太尼对A2780增殖、凋亡的影响。 结论 舒芬太尼可能通过下调LINC00668的表达抑制卵巢癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

丙泊酚激活线粒体凋亡通路诱导乳头状甲状腺癌TPC 1细胞凋亡和生长阻滞

【摘要】目的 探讨丙泊酚（PPF）通过线粒体凋亡通路对乳头状甲状腺癌TPC 1细胞凋亡和生长的影响。方法 分别采用0、12.5、25、50 μM丙泊酚处理TPC 1细胞,将细胞随机分为PPF 0 μM组、PPF 12.5 μM组、PPF 25 μM组和PPF 50 μM组进行后续实验。BrdU染色检测细胞增殖;克隆形成法检测细胞生长;流式细胞仪检测细胞凋亡;流式分选检测线粒体膜电位;蛋白免疫印迹检测Ki67、PCNA、Bcl 2、Bax、Caspase 3、Caspase 9、c Myc蛋白表达水平;试剂盒检测SOD、MDA、GSH含量。结果 与PPF 0μM组相比较,PPF 25 μM组和PDF 50 μM组BrdU阳性细胞数显著降低（P＜005）,克隆形成率显著降低（P＜005）,Ki67、PCNA蛋白水平显著降低（P＜005）,细胞凋亡率显著升高（P＜005）,细胞线粒体膜电位明显降低,Bax/Bcl 2、cleaved caspase 3/Caspase 3、cleaved caspase 9/Caspase 9比值显著升高（P＜005）,c Myc蛋白水平显著降低（P＜005）,SOD含量显著降低（P＜005）,MDA、GSH含量显著升高（P＜005）。结论 丙泊酚激活线粒体凋亡通路诱导乳头状甲状腺癌TPC 1细胞凋亡和生长阻滞。     

miR-150靶向调控FOXO4促进宫颈癌C 33A细胞生长与生存

【摘要】 目的 检测miR 150在宫颈癌细胞C 33A中的表达,并探讨其是否通过调控靶向基因FOXO4促进宫颈癌细胞的增殖与凋亡。方法 将携带miR 150 mimic（模拟物）和miR 150 inhibitor（抑制物）、阴性对照siRNA经 LipofectamineTM 2000 转染至C 33A细胞中,将细胞分为 NC组( 阴性对照组) 、miR 150 模拟物组( 转染miR 150 mimic细胞组) 及 miR 150 in 抑制物组( 转染miR 150 inhibitor细胞组)。采用流式细胞仪、TUNEL检测法、荧光定量PCR、Western bolt 分别检测miR 150对宫颈癌C 33A细胞周期、凋亡以及周期和凋亡相关基因的影响。3’ 端非翻译区（UTR）荧光素酶活性分析证实miR 150的直接靶向作用。结果 miR 150模拟物促进宫颈癌细胞C 33A的增殖与凋亡,抑制物作用相反,miR 150模拟物促进细胞由G1/G0期进展到S期,从而促进宫颈癌细胞增殖,抑制物相反,miR 150调控几个细胞周期、凋亡相关基因CyclinD1、 p27、 BIM和FASL的表达; miR 150通过靶向结合FOXO4的3’UTR区从而抑制FOXO4的表达。结论 miR 150靶向作用于FOXO4从而调节多种基因的表达以致宫颈癌细胞C 33A的增殖与凋亡。     

长链非编码RNA TTN-AS1靶向miR-134-5p调控乳腺癌细胞的生长和转移

【摘要】目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA) TTN AS1对乳腺癌生长和转移的作用及机制。方法 qRT PCR检测TTN AS1在MDA MB 231、BT 20、SKBR 3、MCF 7、MDA MB 468 5种乳腺癌细胞中的表达水平。乳腺癌细胞转染shRNA抑制TTN AS1的表达,转染后,CCK8检测各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,Transwell小室法检测各组细胞迁移能力,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax、Cleaved Caspase 3、Caspase 3相对表达水平。miRcode数据库预测LncRNA TTN AS1与miR 134 5p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA TTN AS1与miR 134 5p的靶向关系。乳腺癌细胞中转染shRNA抑制TTN AS1的表达的同时转染miR 134 5p inhibitor抑制miR 134 5p的表达,然后检测细胞增殖、凋亡、迁移能力及凋亡相关蛋白的表达。结果 TTN AS1在5种乳腺癌细胞中均高表达;抑制TTN AS1的表达后乳腺癌细胞的增殖和迁移能力显著下调,细胞凋亡水平显著增加,Bcl 2表达显著下调,Bax、Cleaved Caspase 3显著上调（均P＜005）。miR 134 5p为LncRNA TTN AS1靶基因,抑制TTN AS1表达的同时抑制miR 134 5p表达细胞增殖和迁移能力均显著高于单独抑制TTN AS1组,细胞凋亡水平显著低于单独抑制TTN AS1组,凋亡相关蛋白表达亦呈显著变化(均P＜005)。结论 TTN AS1通过靶向抑制miR-134-5p调控乳腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移能力以及凋亡相关蛋白的表达。     

过表达miR-140-5p促进前列腺癌细胞凋亡抑制其增殖

［摘要］ 目的研究miR-140-5p在前列腺癌细胞中的表达情况,探讨 miR-140-5p在前列腺癌细胞中的生物学功能。 方法RT-qPCR方法检测前列腺癌细胞株PC3细胞及DU145细胞中miR-140-5p表达;PC3细胞中转染miR-140-5p模拟物或抑制物,CCK-8及AnnexinV/PI双染流式细胞学检测细胞活力及细胞凋亡。TCGA数据库分析高表达miR-140-5p与前列腺癌患者总生存率的关系。 结果miR-140-5p在DU145及PC3细胞中的表达明显低于RWPE-1细胞,miR-140-5p在PC3细胞中的表达明显低于DU145细胞（P＜0.05）。转染miR-140-5p模拟物的 PC3细胞中miR-140-5p相对表达量明显高于阴性对照组（P＜0.05）。miR-140-5p的模拟物转染PC3细胞48 h,过表达组细胞增殖率低于阴性对照组,凋亡率高于阴性对照组（P＜0.05）。转染miR-140-5p抑制物的PC3细胞中miR-140-5p相对表达量明显低于阴性对照组（P＜0.05）。敲低miR-140-5p表达组细胞增殖率明显高于阴性对照组,凋亡率明显低于阴性对照组（P＜0.05）。低表达miR-140-5p组患者总生存率低于高表达miR-140-5p组患者（P＜0.05）。 结论miR-140-5p在前列腺癌细胞株低表达,低表达miR-140-5p前列腺癌患者预后不良;过表达miR-140-5p可促进前列腺癌细胞凋亡,抑制其增殖。     

右美托咪定调控miR 126对高糖诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响

【摘要】目的 探讨右美托咪定（DEX）对高糖诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响及作用机制。方法 体外培养心肌细胞H9C2,分别用葡萄糖浓度为55、35 mmol/L的DMEM培养基培养,分别作为对照组和高糖损伤模型组。分别使用不同浓度（5、10、20 μg/L）DEX处理心肌细胞记为实验1组、实验2组、实验3组。检测各组乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT PCR）检测微小RNA 126（miR 126）的表达量。分别将miR NC、miR 126 mimicis转染至心肌细胞,使用含有葡萄糖浓度为35 mmol/L的DMEM培养基培养24 h,分别记为miR NC组、miR 126组。分别将miR NC、miR 126 mimcis、anti miR NC、anti miR 126转染至心肌细胞,采用含有葡萄糖浓度为35 mmol/L与DEX浓度为20 μg/L的 DMEM培养基培养,分别记为实验3+miR NC组、实验3+miR 126组、实验3+anti miR NC组、实验3+anti miR 126组。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3的前体蛋白（pro caspase 3）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cl caspase 3）水平。结果 与对照组比较,高糖损伤模型组LDH、MDA含量显著升高（P＜005）,SOD含量显著降低（P＜005）,miR 126的表达水平显著降低（P＜005）,细胞凋亡率显著升高（P＜005）,cl caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）,pro caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）。与高糖损伤模型组比较,实验1组、实验2组、实验3组LDH、MDA含量显著降低（P＜005）,SOD含量显著升高（P＜005）,miR 126的表达水平升高（P＜005）,细胞凋亡率显著降低（P＜005）,cl caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）,pro caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）,实验1组、实验2组、实验3组间各指标比较差异有统计学意义（P＜005）。与miR NC组比较,miR 126组LDH、MDA含量显著降低（P＜005）,SOD含量显著升高（P＜005）,细胞凋亡率显著降低（P＜005）,cl caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）,pro caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）。miR 126过表达能增强DEX对高糖诱导心肌细胞氧化应激及凋亡,抑制miR 126表达能逆减弱DEX对高糖诱导心肌细胞氧化应激及凋亡。结论 DEX可通过上调miR 126的表达从而抑制高糖诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡。      

miR-1275通过靶向〖STBX〗IGF 1R〖STBZ〗基因对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

【摘要】目的 探讨miR 1275靶向胰岛素样生长因子1受体（IGF 1R）对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法 通过在线生物信息学软件预测miR 1275和IGF 1R的靶向关系,采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。Western blot检测转染miR 1275 模拟物（mimics）或抑制物（inhitior）后的鼻咽癌HONE 1细胞IGF 1R表达。MTT法、流式细胞术及Western blot检测miR 1275/IGF 1R分子轴对HONE 1细胞增殖、凋亡及蛋白激酶B（AKT）、磷酸化的蛋白激酶B（p AKT）、细胞增殖核抗原( PCNA)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase 3）表达的影响。结果 HONE 1细胞转染miR 1275 mimics后,miR 1275表达明显升高,细胞增殖活力明显降低,凋亡率明显升高,p AKT和PCNA表达明显降低,cleaved caspase3表达明显升高（P＜005）。miR 1275可靶向作用于IGF 1R并下调其表达。抑制IGF 1R表达可明显降低HONE 1细胞增殖活力,促进细胞凋亡,下调p AKT和PCNA,上调cleaved caspase3表达（P＜005）。抑制miR 1275和IGF 1R表达可逆转IGF 1R对细胞增殖、凋亡及p AKT、PCNA和cleaved caspase3表达的影响。结论 过表达miR 1275可抑制鼻咽癌HONE 1细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制AKT信号途径。IGF 1R是miR 1275的靶基因,miR 1275可靶向IGF 1R并调控AKT信号途径影响鼻咽癌细胞增殖和凋亡,miR 1275/IGF 1R分子轴可能成为鼻咽癌治疗的重要靶点。     

miR-224-5p 通过靶向SMAD5对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的调控作用

【摘要】目的 探讨miR 224 5p对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法 RT qPCR检测弥漫大B细胞淋巴瘤组织和细胞中miR 224 5p与SMAD5 mRNA的表达。利用Lipofectamine 2000将miR NC、miR 1224 5p mimic、miR 224 5p inhibitor 、pc SMAD5质粒分别或联合转染进入U2932细胞分别记为miR NC组、miR 1224 5p mimic组、miR 224 5p inhibitor组,未转染正常培养的U2932细胞记为Control组。MTT法检测细胞生长,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测cleaved caspase 3、Bax、Bcl 2、SMAD5蛋白相对表达量,双荧光素酶报告检测靶向关系。结果 miR 224 5p在弥漫大B细胞淋巴瘤组织和细胞中均明显下调。与Control组相比,miR 224 5p mimic组U2932细胞吸光值和克隆细胞数目明显减少、细胞凋亡率及cleaved Caspase 3、Bax表达明显升高、Bcl 2表达明显降低（P＜001）,miR 224 5p inhibitor组U2932细胞吸光值和克隆细胞数目明显增加、细胞凋亡率及cleaved Caspase 3、Bax表达明显降低、Bcl 2表达明显升高（P＜001）。miR 224 5p靶向下调SMAD5。共转染pc SMAD5后逆转miR 224 5p对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的作用。结论 miR 224 5p过表达靶向SMAD5抑制弥漫大B细胞淋巴瘤U2932细胞增殖并诱导其凋亡。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过抑制角蛋白17诱导角质形成细胞凋亡

【摘要】 目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对角蛋白17（K17）介导的人角质形成细胞的凋亡的影响。方法 不同浓度EGCG处理人乳头瘤病毒（HPV）11型基因组的HaCaT细胞（HPV11．HaCaT）12 h,qRT PCR与Western blot检测角蛋白17表达;流式细胞术Annexin V FITC和碘化丙锭（PI）双染检测50 mg/L EGCG处理下KC、HaCaT及HPV11．HaCaT细胞凋亡率。免疫组化法与Western blot检测银屑病和尖锐湿疣患者病理切片中K17以及Caspase3的表达,构建K17过表达（pcDNA31（+）/K17）载体并转染KC与HaCaT细胞48 h继续用EGCG（50 mg/L）处理12 h;检测K17的水平及细胞凋亡。结果 EGCG可在12 h抑制KC、HaCaT 和HPV11．HaCaT细胞中K17表达(P＜005),呈浓度依赖趋势;银屑病和尖锐湿疣病理切片中K17表达范围增多但Caspase3的染色范围减少,K17表达上调,但Cleaved Caspase3显著下调（P＜005）。使用高浓度50 mg/L的EGCG 作用下,KC、HaCaT 和HPV11．HaCaT细胞凋亡率均上调（P＜001）。pcDNA31（+）/K17对KC、HaCaT细胞凋亡率的抑制作用被EGCG显著逆转（P＜001）。结论 EGCG通过抑制K17促进角质形成细胞凋亡,为银屑病和尖锐湿疣基础研究与临床治疗提供前期研究基础。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。      

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

人体寄生虫学多媒体教学效果的初步评估

通过分析多媒体辅助教学方法与传统教学方法在人体寄生虫学教学中的应用,指出多媒体辅助教学对于提高教学质量效果显著,受到了绝大部分同学的赞同和欢迎.     

头孢他啶用于胸外科感染的疗效分析

目的 观察和评价头孢他啶（泰得欣）应用于普通胸外手术的临床疗效和安全性。方法 采用对比试验，观察2005年8-10月96例普胸手术预防和治疗的疗效和不良反应。结果 泰得欣在预防和治疗术后感染中总有效率95．9％，不良反应发生率为5．2％。结论 泰得欣临床效果满意，使用安全，值得在普胸手术中选用。     

骨淋巴管瘤病1例报告

患者女,19岁,体检发现全身多处固执破坏4个月。影像学检查：平片及CT平扫检查：双侧髂骨、耻骨、股骨颈及股骨上段均可见多发大小不等的低密度影,略呈膨胀性,边界清楚,部分可见硬化边。双侧肱骨上段、肩胛骨近关节盂处骨质及股骨下段、右胫骨近端、左腓骨中上段可见多个囊性骨及右侧锁骨亦可见多发局限性低密度减低区、略呈膨胀性（图1、5）。MRI平扫：脊柱可见多个囊状长T1长T2信号,部分略呈膨胀性。（图2～4）     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

胃镜诊断胃癌107例分析

1986年1月至1991年6月经内窥镜检查发现胃癌107例,其中100例经内窥镜活检病理证实,阳性率93.5％,7例阴性者均经手术证实。本文分析了胃癌的内镜特征(中、晚期胃癌、一点癌)和病理特点,并就临床意义进行分析、讨论。认为在胃角、胃窦部的溃疡、糜烂、结节状及粘膜粗糙不平应仔细观察并进行活检。