胰蛋白酶水解乳清蛋白条件的研究

本文利用二次旋转回归实验设计深入探讨了不同水解条件对胰蛋白酶水解乳清蛋白的影响,建立了各主要因素参数与水解度之间的回归模型,依据该模型优化了胰蛋白酶对乳清蛋白的水解条件:温度52.3℃、初始pH值8.37、酶量2.5%、乳清蛋白浓度6%、水解时间12小时。     

响应面优化具有抗菌活性的乳清蛋白肽的酶解工艺

以乳清蛋白肽对金黄色葡萄球菌的抑制作用为指标,通过胰蛋白酶水解乳清蛋白的单因素试验,确定乳清蛋白肽具有抗菌活性的最佳水解条件,试验结果表明,乳清蛋白肽的抗菌能力与底物浓度、加酶量、pH值、水解温度等因素有关,利用响应面优化得到的胰蛋白酶最佳水解工艺条件是底物质量分数为8.3%,pH值为8.5,加酶量5 000 U/g,温度46.0℃,酶解时间3 h。结论:乳清蛋白经胰蛋白酶水解,该条件下得到的乳清蛋白水解肽可以有效地抑制金黄色葡萄球菌生长,具有较好的抗菌能力。     

酶法水解乳清蛋白工艺研究

以乳清蛋白为原料,选择碱性蛋白酶水解乳清蛋白.通过四因素三水平正交试验设计方法对碱性蛋白酶水解乳清蛋白的工艺条件[酶-底浓度比(E/S),pH,水解温度,水解时间]进行优化,确定了碱性蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳水解条件为酶-底浓度比0.05,pH8.0,反应温度60℃,水解200min,此条件下水解度为21.92％.各因素对水解度的影响主次顺序为酶-底浓度比(E/S)＞水解温度＞水解时间＞pH.     

碱性蛋白酶对核桃蛋白水解条件的优化研究

根据核桃蛋白的氨基酸组成以及碱性蛋白酶的水解特性,选用碱性蛋白酶2.4 L水解核桃蛋白,制备核桃多肤.以水解度(DH)表征其反应程度.在单因素实验基础上,通过二次回归正交旋转组合实验设计确定核桃蛋白的水解条件模型及最佳工艺是:pH 7.7,温度62.4℃,加酶量7.9%,酶解时间5.9h.在此水解条件下水解度可达8.82%.     

乳清多肽的制备及其发酵饮料的开发

研究了乳清多肽的制备、性质及其发酵饮料的开发,结果表明,碱性蛋白酶比中性蛋白酶水解乳清蛋白的能力强,且更经济,水解最佳条件为加酶量为7000(U/g蛋白)、底物添加量为5%、水解温度为60℃、水解初始pH值为8.5,最大乳清蛋白水解度可达到22.45%。最优酒精发酵条件为接种量5%、初始pH7.5、温度22℃、时间45h。乳清多肽发酵饮料的配方为酸量0.1%,蔗糖量为8%,-β环状糊精量为0.5%。     

酶法水解梅鱼蛋白的实验研究

主要研究了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶对小梅鱼的水解作用。采用正交试验,详细比较了温度、酶浓度、水解时间、酶比例对鱼蛋白水解度的影响。结果表明:单酶最佳水解酶为碱性蛋白酶,其水解条件:温度60℃,加酶量0.3%(以蛋白含量计),时间5h,水解度达51.02%;碱性蛋白酶与复合蛋白酶双酶的最佳水解条件:碱性蛋白酶与复合蛋白酶比例为3∶1,温度为60℃,加酶量0.3%,时间5h,水解度达57.03%;碱性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶三酶的最佳水解条件:碱性蛋白酶与复合蛋白酶比例为3∶1,温度60℃,加酶量0.3%,反应5h后添加风味蛋白酶,其反应条件:加酶量0.3%,温度60℃,时间为6h,水解度达62.57%。     

乳清蛋白复合酶解条件优化及其水解产物对HMG-CoA还原酶活性的影响

采用胰蛋白酶、中性蛋白酶A.S1398组成复合酶联合水解乳清蛋白,建立了三因素(水解温度T℃,初始pH,胰蛋白酶活性占总活性的百分比)与乳清蛋白水解度(DH)之间的回归模型,通过模型优化了胰蛋白酶、中性蛋白酶A.S1398联合水解乳清蛋白的条件参数,并研究了在优化的水解条件下,乳清蛋白不同阶段水解产物在体外对HMG-CoA还原酶活性的影响。     

碱性蛋白酶水解乳清蛋白过敏原条件的优化

以碱性蛋白酶水解乳清蛋白过敏原,采用三因素二次旋转正交回归设计对水解反应的工艺参数pH值、水解温度(T)、酶和底物比(E︰S)进行了优化。建立了以乳清蛋白水解物的-αLA抑制率和-βLG抑制率为响应值的二次旋转正交回归模型。方程通过F检验t、检验和应用验证,模型较好地反映碱性蛋白酶水解乳清蛋白反应体系运行的规律。确定以水解物的-αLA抑制率和-βLG抑制率为响应值的最佳水解条件分别为:pH值为9.60,水解温度为50.4℃,E︰S为5153 U(每克蛋白质中)和pH值为8.46,水解温度为47.6℃,E︰S为5310 U(每克蛋白质中)。     

利用复合酶技术制备乳清蛋白胨的工艺研究

为了优化利用复合酶制备乳清蛋白胨的酶解条件,在确定碱性蛋白酶和风味蛋白酶单酶水解适宜条件的基础上,以水解度为优化指标,采用正交试验对碱性蛋白酶与风味蛋白酶复合水解乳清蛋白的工艺进行优化。试验结果表明:复合酶水解乳清蛋白的最佳条件是:底物8%、酶底比(E/S)1∶20、碱性蛋白酶与风味蛋白酶比例(E1/E2)4∶6、起始pH9、水解温度55℃、水解时间4h。在此条件下水解度为64.5%,分别是单独用碱性蛋白酶或风味蛋白酶水解所得水解度的2.6倍和1.8倍。所得乳清蛋白胨各项理化指标均符合标准。冻干样品氨基酸组成丰富,含量较高。     

酶解乳清蛋白制备降胆固醇活性肽的工艺研究

利用生物酶技术酶解乳清蛋白,制备具有降胆固醇活性的多肽,通过响应面试验、二次旋转回归设计建立回归模型,以胆固醇胶束溶解度抑制率为评价指标,对乳清蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,乳清蛋白的最佳酶解条件为：酶解时间8.5 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 8.0、加酶量4.7%、乳清蛋白含量5.8%,在此条件下,酶解乳清蛋白得到的活性肽的胆固醇胶束溶解度抑制率为18.21%。     

哈尔滨地区生鲜牛乳中嗜冷菌数量与蛋白酶酶活力关系的测定

对嗜冷菌产生的蛋白酶的活性进行了研究。原料生奶经过4℃贮藏,在贮藏0,12,20,28,36,44,48,52 h分别对牛奶取样测定嗜冷菌数量和其酶的活力,实验结果表明,在4℃下贮存44~48 h时嗜冷菌数量最多,蛋白酶活力最强。     

纺织用酸性蛋白酶的性质及其在羊毛处理中的应用

以蛋白酶水解羊毛的能力来衡量自制酸性蛋白酶的活力，对自制酸性蛋白酶的性质及其在羊毛细化处理中的应用进行研究。发现所用酸性蛋白酶最适作用温度为40℃，最适作用pH值为3．0；一些金属离子在一定条件下可提高蛋白酶的活力，促进蛋白酶对羊毛纤维的减量细化．除温度、pH值外，酶用量、浴比、表面活性剂JFC的用量对蛋白酶水解羊毛的效果也有一定的影响。用所制得的酸性蛋白酶处理64支内蒙古羊毛的最佳条件为温度40℃，pH值3．0，酶用量4％，浴比1：25．JFC0．9％。     

中性和碱性蛋白酶协同酶解大豆分离蛋白研究

采用中性和碱性蛋白酶协同酶解大豆分离蛋白制备大豆多肽,采用茚三酮分析法测定酶解液中氨基氮含量以判断其酶解效率。影响大豆分离蛋白酶解主要因素有中性与碱性蛋白酶用量比、酶解pH值、酶解温度、酶解时间,通过单因素和优化酶解条件正交试验分析,筛选出酶解最适实验条件:中性蛋白酶与碱性蛋白酶用量比为1∶3、温度55℃、pH 8.5、酶解时间6 h;在此条件下酶解,氨基氮含量为15.86 mg/g。     

杆菌属蛋白酶基因的结构及其应用

本文介绍了杆菌属中蛋白酶基因的结构及其在工业、科学研究中的广泛应用。杆菌属中的蛋白酶基因具有典型的“ｐｒｅ┐ｐｒｏ┐成熟酶前体”编码特征。其中ｐｒｅ┐序列编码信号肽，ｐｒｏ┐序列编码一段为蛋白酶形成具有生物活性的合适构象所需的肽链。ｐｒｅ┐与ｐｒｏ┐序列都在蛋白酶前体从细胞中分泌出来后被切去。具有相同性质的蛋白酶即使来源于不同菌种，在基因结构上仍具有很高的同源性；而性质不同的蛋白酶，即使来自同一菌种，它们在氨基酸组成，在ｐｒｅ┐、ｐｒｏ┐序列上都存在着很大差异。克隆的蛋白酶基因可用以构建具有蛋白酶高表达活性的基因工程菌，也可被用来研究蛋白酶的结构与性能的相互关系，还可被用于构建具有特殊功能的克隆载体。     

高产中/碱性蛋白酶的枯草芽孢杆菌W1菌株的筛选及条件优化

为了筛选高产蛋白酶活性细菌,以大豆及其发酵制品为目标样品,采用酪蛋白平皿筛选到一株既可产中性蛋白酶又可产碱性蛋白酶的细菌菌株W1,经形态学及16S rDNA基因序列分析鉴定为枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilis subsp. Subtilis),其产中性蛋白酶和碱性蛋白酶活力分别为28.99 U/mL和33.19 U/mL。通过单因素试验对其产蛋白酶的培养条件进行初步优化,并在此基础上以总蛋白酶活力为指标对其产蛋白酶条件进一步进行正交试验优化,最佳条件为培养基初始pH 9.0,接种量4%,培养温度35℃,培养时间48 h,此条件下中性蛋白酶活力为40.39 U/mL,碱性蛋白酶活力为52.02 U/mL,总蛋白酶活力为92.41 U/mL,优化后相应酶活力分别提高了39.3%、56.7%和48.6%,这将为枯草芽孢杆菌W1菌株蛋白酶的酶学性质研究提供帮助,同时也是对蛋白酶活性枯草芽孢杆菌资源库的丰富。     

pH值渐变条件下双酶协同水解猪皮制备胶原蛋白寡肽的研究

本文研究了在没有外加碱的pH渐变条件下,用枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)双酶协同水解从猪皮胶原蛋白制备寡肽水解物的可行性。考察了单酶单因素水解条件、双酶加入方式对猪皮降解率和蛋白质水解度的影响,并在此基础上通过正交试验进一步优化出双酶一次性投料方案下水解猪皮的最佳条件:水解温度为60℃,碱性蛋白酶加入量为25μl/g蛋白,酸性蛋白酶加入量为4%(g/g),底物浓度为60g/L,水解时间为12h。在上述最佳条件下,新鲜猪皮的降解率可达94.7%,蛋白质的水解度可达17.7%,水解物中分子量小于1000(10个氨基酸以下的肽)的寡肽选择性达到了42.5%。结果表明,在不外加碱的条件下,采用双酶协同水解方法能够显著提高猪皮降解率,特别是蛋白质水解度。     

复合酶分步酶解法提取牛骨胶原蛋白工艺的研究

以牛骨胶原蛋白初步酶解产物为研究对象,以水解度为指标,采用甲醛滴定法监测深度酶解的进程,对比分析不同的酶解条件对水解度的影响,确定了中性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的酶解条件。通过正交试验结果表明:采用中性蛋白酶和风味蛋白酶加酶量分步水解牛骨蛋白的最佳条件为物料比1∶750,起始pH值是6.5,先用中性蛋白酶55℃酶解3h后,再用风味蛋白酶于55℃继续酶解2h。此时水解度达到63.6%。     

中性蛋白酶芽孢杆菌BX-4产酶条件及部分酶学性质

采用稀释平板分离法从土壤中分离到一株产中性蛋白酶芽孢杆菌BX-4．通过单因素碳、氮源以及正交试验确定了最佳产酶培养基配方，同时还研究了起始pH值、金属离子、接种量对产酶的影响以及温度、pH值、金属离子以及表面活性剂对酶稳定性的影响；以最佳培养基为发酵培养基，于37℃、160r／min振荡培养48h，酶活达2519．35U／mL；该酶最适作用温度为55℃，最适作用PH值为7．5，在pH7．5缓冲体系中，55℃反应60min后仍有50％的酶活力，Ca^2＋和表面活性剂对酶有一定的激活作用，但激活作用不明显。     

酶进入皮中状况的检验方法

在酶法制革过程中 ,通过组织切片的方法将进入皮内不同层域的蛋白酶移出 ,置入含酪蛋白的载体中 ,利用与酪蛋白进行降解反应产生乳白色斑的特征 ,了解不同蛋白酶品种、不同酶用量、不同酶作用时间及不同制革工艺中 ,酶从皮 2面进入皮内的状况以及酶在不同层域的分布状态     

巴西松子中蛋白酶的分离纯化及酶学性质

在单因素试验基础上,通过正交试验研究pH值、提取时间和料液比3个因素对巴西松子中蛋白酶活力的影响,得出巴西松子中蛋白酶的最佳提取缓冲液为pH9.0的硼酸-硼砂缓冲液、提取时间为60min、料液比为1:8(m/V);采用(NH4)2SO4沉淀、DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析分离纯化巴西松子中的一种蛋白酶,结果表明:纯化后蛋白酶比活力提高到了8.61倍,回收率为21.65%。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明:该蛋白酶分子质量为33kD。酶学性质结果表明:该蛋白酶最适pH值为9.0,属碱性蛋白酶;反应的最适温度为50℃;金属离子Mn2+对该蛋白酶活性有强烈的激活作用,而Ca2+、Mg2+和Cu2+对酶活性有抑制作用。