多药耐药相关蛋白对急性白血病的预后意义

P 糖蛋白 (P GP)、多药耐药相关蛋白 1(MRP1)、肺耐药相关蛋白 (LRP)、乳癌耐药蛋白 (BCRP)是近年来研究较多的四种多药耐药相关蛋白。它们的过多表达是白血病化疗中产生多药耐药的重要原因之一。本文重点综述了这四种蛋白的相关表达对急性白血病化疗预后的意义。     

重组人p53腺病毒注射液逆转鼻咽癌化疗耐药的研究

目的:探讨重组人p53腺病毒(rAd-p53)瘤内注射前后的鼻咽癌原发灶中P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance-associated protien,MRP)和肺耐药蛋白(lungresistance-related protein,LRP)的表达情况及其意义。方法:71例确诊中晚期鼻咽癌的患者随机分为3组:基因治疗组(27例,行-rAd-p53瘤内注射+同步放化疗)、常规放化疗组(24例)和单纯放疗组(20例)。12例同期门诊活检病理为鼻咽黏膜慢性炎患者作为对照。分别收集治疗前、治疗中鼻咽部瘤体组织标本。采用免疫组化法检测鼻咽癌组织中P-gp、MRP和LRP的表达情况。结果:鼻咽癌组中P-gp、MRP及LRP阳性表达率分别为57.7%(41/71)、57.7%(41/71)、53.5%(38/71),黏膜慢性炎组未见P-gp、MRP及LRP表达。基因治疗组治疗前、后原发灶P-gp、MRP和LRP蛋白阳性表达率分别为55.6%和25.9%、63.0%和33.3%、59.3%和25.9%,差异有统计学意义。常规放化疗组治疗前、后鼻咽癌原发灶P-gp、MRP和LRP蛋白阳性表达率分别为62.5%和79.2%、58.3%和70.8%、50%和58.3%,差异无统计学意义。单纯放疗组治疗前、后鼻咽癌原发灶P-gp、MRP和LRP蛋白阳性表达率分别为55.0%和55.0%、50%和40%、50%和55%,差异无统计学意义。结论:P-gp、MRP和LRP与鼻咽癌的内源性耐药相关;p53基因治疗可一定程度逆转鼻咽癌耐药,可能是其治疗鼻咽癌的作用机制之一。     

多药耐药相关蛋白对急性白血病的预后意义

P-糖蛋白（P-GP），多药耐药相关蛋白1（MRP1），肺耐药相关蛋白（LRP），乳癌耐药蛋白（BCRP）是近年来研究较多的四种多药耐药相关蛋白，它们的过多表达是白血病化疗中产生多药耐药的重要原因之一。本文重点综述了这四种蛋白的相关表达对急性白血病化疗预后的意义。     

LRP和P—gp在卵巢上皮性癌组织中的表达及与化疗耐药关系的探讨

目的 探讨肺耐药蛋白 (Lungresistanceprotein,LRP)及P-糖蛋白 (P-glycoprotein,P -gp)在原发性卵巢上皮性癌 (primaryo varianepithelialcancer,POEC)组织中的表达及其与化疗耐药的关系。方法 采用SP组化法检测LRP和P-gp的表达。结果 (1)交界性卵巢肿瘤及POEC组织中LRP阳性表达率明显高于良性卵巢肿瘤 (P<0.01)。 (2)LRP、P-gp表达与POEC患者年龄、组织学类型、病理分级、临床分期和术后残存灶大小均无关 (P>0.05) ;(3)LRP阳性表达组患者近期化疗疗效明显低于阴性表达组 (P<0.05) ;P-gp表达与POEC患者近期化疗疗效无关 (P>0.05) ;(4)LRP、P -gp表达与患者术后生存时间均无关 (P>0.05) ;(5)LRP、P-gp表达无相关 (P>0.05) ;(6)经化疗后POEC组织中LRP、P -gp表达率均明显高于化疗前 (P<0.05)。结论 (1)检测LRP可预测化疗近期疗效 ,指导临床化疗方案的选择 ;(2)联合检测LRP与P-gp对POEC患者的预后可能无明显价值 ;(3)铂类化疗可诱导POEC组织中LRP及P -gp的表达。     

肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及临床意义

为了研究肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及其临床意义，采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测初治急性白血病、复发难治白血病及正常对照骨髓细胞肺耐药蛋白基因(lung resistance protein，LRP)及多药耐药相关蛋白基因(multidrug resistance protein，MRP)的表达。结果显示，正常对照骨髓细胞LRP表达阴性，初治急性髓细胞白血病(AML)组及复发难治组LRP表达水平与正常对照组相比明显升高，增高的LRP mRNA水平与对初次化疗不敏感及预后差有关，LRP表达阳性患的完全缓解率明显低于表达阴性。经直线相关分析发现，LRP表达与MRP表达水平成正相关。结论：LRP可能是一项新的耐药指标，其高表达与急性髓细胞白血病的疗效及预后密切相关，同时检测LRP和MRP的表达可以指导治疗，估计预后。     

急性白血病患者LRP、GST-π、MRP1蛋白表达及临床意义

本研究探讨谷胱甘肽硫转移酶-π(GST-π)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)与急性白血病(AL)多药耐药(multi-drug resistance,MDR)的关系、并探讨这3种耐药蛋白表达的相关性以及三者表达与AL患者临床特征的关系。采用免疫组织化学S-P法检测80例AL患者及30例正常人GST-π、MRP1及LRP的表达。结果表明:GST-π,MRP1,LRP蛋白表达均与临床耐药相关,3种耐药蛋白表达阳性组的完全缓解率均低于阴性组,提示耐药蛋白表达时白血病患者预后不良。GST-π、MRP1在AL难治组中的表达具有高度相关性。结论:GST-π/MRP1二者联合检测对评定白血病预后不良较单独测定某一蛋白更具有显著的临床意义。当外周血白细胞数≥10×109/L时,LRP阳性表达率显著增高,提示LPR对高白细胞数白血病患者的耐药性和预后评定具有很高的判断价值。     

子宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中mdrl、肺耐药蛋白mRNA及其蛋白的表达变化和意义

目的 寻找预测子宫颈癌新辅助化疗效果的分子生物学指标.方法 采用real time RTPCR和免疫组织化学法检测40例子宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中mdrl、肺耐药蛋白(LRP)mRNA及其编码蛋白P-gP、LRP表达水平.结果 新辅助化疗前后子宫颈癌组织中mdrl的表达量分别为(45.800 ±0.636、62.381±0.743,t=-66.582,P＜0.01);新辅助化疗前后子宫颈癌组织中LRP mRNA的表达量分别为(50.048±0.770、66.912±0.752,t=-78.604,P＜0.01);新辅助化疗前后子宫颈癌组织中P-gP的阳性表达分别为40.0%(16/40)、70.0%(28/40),χ2=7.273,P=0.007;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中LRP的阳性表达分别为62.5%(25/40)、92.5%(37/40),χ2=10.323,P=0.001,新辅助化疗后mdrl、LRPmRNA及其编码蛋白P-gP、LRP表达水平较化疗前明显升高,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01).P-gP、LRP表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、病理分级无关(P＞0.05);P-gP蛋白的阳性与阴性患者其化疗有效率分别为6(37.5%)、17(70.8%),2组比较差异有统计学意义(χ2=4.365,P＜0.05).LRP蛋白的阳性与阴性患者其化疗有效率分别为12(48.O%)、13(86.7%),2组比较差异有统计学意义(χ2=5.980,P＜0.05);P-gP与LRP成正相关(χ2=4.177,r=0.323,P＜0.05).结论 P-gP、LRP表达状态有可能作为预测化疗效果的参考指标.     

急性髓系白血病中乳腺癌多药耐药蛋白基因的研究进展

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是新近发现的一种肿瘤耐药相关蛋白,与P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)同属ABC转运蛋白超家族。本文对BCRP的发现、组织表达、结构特点、急性髓系白血病中多药耐药BCRP基因的表达及应用等方面的研究进展进行综述。     

急性髓性白血病膜糖蛋白介导的多药耐药

急性白血病治疗中存在的主要问题是白血病细胞对化疗药物产生耐药性。这种现象由多种耐药机制所致,包括细胞对化疗药物反应所经历的凋亡失败或药物到达及(或)影响细胞内目标的失败。本综述重点讨论后一种机制，特别是细胞内药物转运耐药机制。有报道ATP结合盒(ABC)转运体P-糖蛋白(P—gp)与急性髓性白血病顸后相关。另外更引人瞩目的是ABC转运体多药耐药蛋白(MRP)和穹隆转运体肺耐药蛋白(LRP)的表达在AML也与预后有关。     

三种耐药相关基因及其蛋白在乳腺癌组织中的表达和意义

目的 探讨乳腺癌组织和癌旁正常组织中MDR1、BCRP、LRP的mRNA及其相应蛋白P-gp、BCRP、LRP的阳性表达情况及临床意义.方法 采用RT-PCR检测42份乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的相对表达量,同时采用IHC检测126份乳腺癌组织及42份相应癌旁正常组织中P-gp、BCRP、LRP蛋白的阳性率,并观察3种耐药相关基因及其蛋白与乳腺癌患者临床病理因素、腋窝淋巴结转移及5年复发转移与未复发转移之间的关系.结果 RT-PCR检测MDR1、BCRP、LRP mRNA在乳腺癌组织中的相对表达量分别为0.81±0.17、0.78 ±0.14、0.79±0.13,癌旁正常组织中的相对表达量分别为0.33±0.11、0.45±0.09、0.36±0.10;3种耐药基因在2组中的相对表达量的差异均有统计学意义(t值分别为4.613、4.850、8.089,P均<0.01).IHC检测P-gp、BCRP、LRP蛋白在乳腺癌组织中的阳性率分别为41%(52/126)、39%(49/126)和66%(83/126),癌旁正常组织中的阳性率分别为14%(6/42)、17%(7/42)和19%(8/42),3种耐药蛋白在2组中的表达差异有统计学意义(x2值分别为10.147、7.020、27.820,P均<0.01).MDR1 mRNA和P-gp与乳腺癌患者不同临床分期及腋窝淋巴结有无转移有关(r=0.369、0.39 8,P均<0.05),BCRPmRNA及其蛋白与乳腺癌患者腋窝淋巴结有无转移有关(r=0.355,P<0.05);5年内发生复发转移的39例患者与5年内未发生复发转移的32例患者P-gp、BCRP及LRP阳性率比较,P-gp阳性率在2组中的差异有统计学意义(x2=11.771,P<0.01),BCRP及LRP阳性率在2组中的差异无统计学意义(x2=2.261、0.078,P均>0.05).3种耐药基因及其蛋白在乳腺癌组织中阳性表达的一致率分别为90.48%、92.85%和85.71%(Kappa值分别为0.806、0.751和0.697,P均<0.01).结论 乳腺癌中存在着广泛的原发性多药耐药现象,3种耐药基因MDR1、BCRP、LRP的mRNA及其P-gp、BCRP、LRP蛋白均参与了乳腺癌多药耐药的形成;检测3种耐药基因和蛋白的表达可为乳腺癌患者有目的 地选择化疗方案提供一定的理论依据及策略;特别是对于P-gp阳性表达者不宜使用CAF(环磷酰胺+阿霉素+5-氟尿嘧啶)方案化疗.     

多药耐药相关蛋白及其与急性白血病的关系

多药耐药相关蛋白（MRP）是一类ATP依赖的外排泵,其表达异常与某些恶性肿瘤的多药耐药有密切的联系,是导致化疗失败的重要原因之一,但其表达与急性白血病的关系尚不能肯定,现有的实验及临床证据仍不足,需要进一步研究。本文简要综述了MRP的结构、分布、功能及其与急性白血病耐药性和预后的关系。     

肿瘤坏死因子α对人肺腺癌细胞耐顺铂的影响

目的研究肿瘤坏死因子OL（TNF-α）对人肺腺癌细胞系A549／顺铂（DDP）耐DDP的逆转作用,探讨其与肺耐药相关蛋白（LRP）表达之间的关系。方法以MTT法检0n,0TNF-α与顺铂联用对A549／DDP细胞的细胞毒性作用,以免疫细胞化学方法检测A549／DDP细胞LRP的表达情况。结果250、1000U／mlTNF-α可使顺铂对A549／DDP细胞的IC50从7．12ng／L分别降至5．02、4．41ng／L,能够逆转A549／DDP对顺铂的耐药,逆转倍数分别为1．42、1．62。A549／DDP细胞LRP呈强阳性表达,250、1000U／mlTN-α与顺铂联用可以下调LRP表达,LRP阳性表达率分别为（60．14-4-6．54）％、（57．234-5．98）％,同无药组和顺铂组LRP表达率（79．63±4．78）％、（75．97±5．32）％比较,差异具有统计学意义（P均〈0．01）。结论TNF-α能够逆转A549／DDP对顺铂的耐药,其机制可能与下调LRP表达有关。     

肺耐药相关蛋白表达与NP方案治疗非小细胞肺癌疗效的关系

目的：研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者肿瘤组织中肺耐药相关蛋白（lung resistance-related protein,LRP）表达与患者化疗疗效的关系。方法：利用实时荧光定量RT-PCT及Western blot法,对42例初治Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者化疗前肿瘤组织活检标本中的LRPmRNA基因扩增及检测LRP表达,并评价NP方案（长春瑞滨十顺铂）化疗对NSCLC患者的疗效,探讨LRP基因表达与NP方案治疗非小细胞肺癌疗效关系。结果：LRP基因表达在肿瘤组织中显著增强（P〈0.05）;18例部分缓解（PR）和稳定（SD）患者肿瘤组织中LRP表达明显低于进展（PD）患者的表达（P〈0.05）;在PR与SD患者肿瘤组织中,LRP表达也存在着差异,但两者之间差异无显著性（P〉0.05）。结论：NSCLC患者肿瘤组织中LRP表达与患者对化疗疗效有关,提示LRP的表达可作为预测NSCLC化疗敏感性的指标。     

肺腺癌细胞STAT5信号传导途径的初步研究

目的探讨STATS在肺腺癌细胞中增殖分化,抗凋亡作用与耐药之间的关系。方法采用浓度递增法诱导A549细胞株形成耐药细胞系,免疫组检测A549及耐药株（A549／CARP）中STATS．LRP、MRP蛋白表达情况。结果成功诱导了A549／CARP耐药细胞株。免疫组化显示A549组、A549／CARP组STATS阳性细胞数差异无统计学意义（P〉0．05）;LRP、MRP阳性细胞数差异有统计学意义（P〈0．01）STATS、LRP、MRP之间均无相关性（P〉0．05）。结论STATS参与了肺腺癌细胞的增殖分化和抗凋亡作用,并没参与介导肺腺癌的耐药;LRP、MRP均参与了诱导肺腺癌细胞的耐药,但二者之间无相关性;LRP、MRP介导的耐药机制与STATS信号传导途径无关;可通过破坏STAT5信号传导来控制肿瘤细胞的生长和繁殖。STATS可能成为肺癌基因治疗的新靶点。     

家族性蛋白C与蛋白S基因联合杂合突变家系的基因变异特点与临床特征分析

目的:对1个蛋白C和蛋白S基因联合杂合突变的家系进行各项抗凝功能检测、基因诊断及临床特征分析。序法(Sanger测序法)检测基因突变。结果:在该家系中发现多人为遗传性蛋白C与蛋白S联合杂合突变,其中6位家族成员伴有深静脉血栓症状。结合家族中各成员的相关基因变异特点和临床表现,分析了遗传因素和继发性因素对该家系成员静脉血栓发病的影响。结果显示该家系中,蛋白C与蛋白S基因联合缺陷携带者有更高的静脉血栓发生率,但后天继发性因素仍对其最终是否出现血栓症状起重要作用。结论:静脉血栓形成是多因素导致的疾病,蛋白C合并蛋白S基因联合杂合突变是重要的遗传因素,临床上具有较大的异质性,继发性因素使静脉血栓栓塞症的发生率提高。     

Molecular Basis of Receptor/G-Protein-Coupling Selectivity

Molecular cloning studies have shown that G-protein-coupled receptors form one of the largest protein families found in nature, and it is estimated that approximately 1000 different such receptors exist in mammals. Characteristically, when activated by the appropriate ligand, an individual receptor can recognize and activate only a limited set of the many structurally closely related heterotrimeric G-proteins expressed within a cell. To understand how this selectivity is achieved at a molecular level has become the focus of an ever increasing number of laboratories. This review provides an overview of recent structural, molecular genetic, biochemical, and biophysical studies that have led to novel insights into the molecular mechanisms governing receptor-mediated G-protein activation and receptor/G-protein coupling selectivity.     

干化学法与免疫透射比浊法检测尿蛋白结果对比分析

以往尿液中的蛋白质常采用化学方法来检测，现阶段大都采用尿液分析仪干化学法来检测，由于其敏感性差且干扰因素较多，尿液分析仪只能作为一种过筛试验，尿微量白蛋白的检测正好弥补了这方面的不足。微量白蛋白尿是指尿中蛋白含量超过正常范围的上限而蛋白定性的化学方法又不能检测出来的阶段，在此阶段，运用化学方法检测往往不能满足临床的要求。两种方法实际上都是检测尿液中的白蛋白成分，但由于方法学、灵敏度和影响因素的不同，测定结果之间也存在着一定的差异。为了了解二种方法检测结果之间的一致性，笔者在用尿液分析仪检测尿蛋白的同时，采用免疫透射比浊法对尿微量白蛋白进行了检测，现将两种测定结果的对比分析如下.     

脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达

目的在大肠杆菌中表达脑钠肽前体(proBNP)及氨基末端前体蛋白(NT-proBNP)。方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-proBNP和PGEX-20T-NT-proBNP,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,并用Western-blot鉴定纯化的重组蛋白。结果在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,两种蛋白均以可溶性形式表达,更有利于保存其生物学活性。结论两种蛋白的成功表达将有利于后续的单抗制备及检测试剂盒的开发奠定基础。