丁酸钠对Hep-2细胞生长、凋亡及细胞周期的影响

目的:观察丁酸钠(SB)对人喉癌Hep-2细胞的生长抑制作用,探讨其对细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:以MTT法检测0.625～10.000 mmol/L SB对Hep-2细胞生长的抑制作用;以TUNEL法检测1.250～5.000 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后的细胞凋亡情况;以琼脂糖凝胶电泳法检测2.500 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后的细胞DNA片段;应用流式细胞仪分析1.250 mmol/L、2.500 mmol/L、5.000 mmol/L SB作用24 h后细胞凋亡率和细胞周期变化;采用免疫组织化学SP法检测2.500 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后细胞抗凋亡蛋白Survivin表达的变化.结果:SB对Hep-2细胞的生长抑制作用具有时间和剂量关系(不同时间组、不同剂量组间比较,P均＜0.01);细胞凋亡指数随SB剂量升高、作用时间延长而增加(P均＜0.01);琼脂糖凝胶电泳可见特征性的凋亡细胞DNA梯状条带;流式细胞术显示细胞凋亡率随SB剂量升高而增加(P＜0.01),细胞周期阻滞于G0/G1期;2.500 mmol/L SB作用72 h,Survivin表达阳性细胞的光密度值由作用前的0.164±0.009下降至0.045±0.006(P＜0.01).结论:SB能有效抑制 Hep-2细胞的生长,其机制可能与抑制细胞Survivin蛋白表达进而诱导细胞凋亡以及参与细胞周期调控有关.     

下调lncRNA-ATB抑制骨肉瘤发生发展分子机制研究

目的 旨在分析lncRNA-ATB对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、周期S期聚集、迁移及凋亡的调控作用，并探究其对皮下骨肉瘤生长及细胞增殖影响。方法 实时定量-聚合酶链式反应(real time quantity polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测lncRNA-ATB在骨肉瘤组织HOS,Saos-2和U2OS细胞株及正常人成骨细胞株NHOst中的表达；CCK8、流式细胞法、Tunel及Transwell检测lncRNA-ATB对Saos-2细胞生物学功能调控能力；Ki67检测细胞增殖情况；利用Saos-2细胞构建骨肉瘤裸鼠移植瘤模型，检测裸鼠模型中皮下瘤体重量变化。结果 28例患者组织中，骨肉瘤组织中的lncRNA-ATB表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。与NHOst组相比，lncRNA-ATB在HOS,Saos-2和U2OS中均升高，其中Saos-2中表达最高(P<0.05)。ATB组Saos-2细胞的OD值高于NC组，ATB组Saos-2周期S期长于NC组(P<0.05)。siATB组Saos-2细胞OD值低于siNC组...     

微小核糖核酸-218在人骨肉瘤组织及Saos-2细胞中的表达及其意义

目的:检测微小核糖核酸-218(miRNA-218, miR-218)在人类骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞Saos-2中的表达水平并探讨miR-218对骨肉瘤发生发展的影响。方法:收集12例(对)人类骨肉瘤及其癌旁组织(正常对照)样本,培养人骨肉瘤细胞系Saos-2,并建立高表达miR-218的细胞系Saos-2miR-218+,运用实时定量PCR方法检测上述组织及细胞中miR-218的表达水平,通过ATPlite化学发光法检测细胞增殖水平,趋化小室实验观察高表达miR-218的Saos-2细胞的侵袭能力变化。结果:与正常对照组相比较,miR-218在骨肉瘤组织中的表达显著下降(0. 61±0. 02vs 0. 37±0. 03),Saos-2细胞中miR-218的表达亦显著下调(0. 59±0. 15 vs 0. 17±0. 04);Saos-2miR-218+细胞增殖水平较对照细胞及空载体转染细胞显著降低[培养72 h的活细胞数分别为(1 200±85)、(1 960±41)、(1 950±52)个/μL],以上差异均有统计学意义(P<0. 05);趋化小室实验显示,Saos-2miR-218+细胞的侵袭能力下降。结论:miRNA-218在人骨肉瘤组织及Saos-2细胞中的表达水平下降,提高miRNA-218的表达水平可抑制Saos-2细胞增殖和侵袭。     

骨钙素、骨粘连蛋白在骨肉瘤中的表达及病理诊断意义

目的：研究骨肉瘤组织中骨钙素（Osteocalcin,OC)、骨粘连蛋白（Osteonectin,ON）的表达及诊断意义。方法：用免疫组化ABC法，检测47例人骨肉瘤，10例骨母细胞瘤和43例非成骨性肿瘤中OC、ON在肿瘤细胞中表达和基质中沉淀的情况，半定量测定。结果：骨肉瘤细胞中，OC阳性率87％、ON阳性率91％。肿瘤骨中，OC阳性率52％、ON阳性率63％。鉴别成骨细胞与非成骨骨肉瘤细胞，OC灵敏度89％、特异度100％，ON灵敏度93％、特异度44％。鉴别骨样组织与致密胶原，OC灵敏度58％、特异度100％，ON灵敏度68％、特异度100％。结论：鉴别成骨性肿瘤与非成骨性肿瘤细胞，OC是可靠的指标，ON不具有特异性。鉴别骨样基质与致密胶原，ON是良好的指标，OC灵敏度相对较低，可供参考。两联合应用，有助于提高骨肉瘤诊断率。     

17-烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究

目的观察17-烯丙氨基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌MCF-7细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA及其表达的调控作用。方法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,分别给予不同剂量及不同作用时间的17-AAG进行作用,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖能力;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western Blotting)法检测MCF-7细胞的MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)10.000、5.000、2.500、1.250、0.625、0.310、0.165 mg/L 17-AAG及空白对照组培养24 h和48 h时A值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。体外作用24 h后IC50均值为34.61,体外作用48 h的IC50均值为6.22。(2)RT-PCR法检测不同浓度17-AAG对MCF-7细胞MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响,结果显示,对照组及1.00 mg/L组、2.00 mg/L组、3.00 mg/L组、5.00 mg/L组MMP-2/β-actin和MMP-9/β-actin比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中各组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)Western Blotting法检测不同浓度17-AAG对MCF-7细胞MMP-2、MMP-9表达的影响,结果显示,对照组及1.00 mg/L组、2.00 mg/L组、3.00mg/L组、5.00 mg/L组MMP-2/β-actin和MMP-9/β-actin比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中各组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 17-AAG对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有明显的抑制作用,并能抑制MMP-2和MMP-9的表达,具有剂量依赖性。     

重铬酸钾对人肺腺癌A549细胞hMGMT蛋白表达的影响

目的:研究不同浓度重铬酸钾(K2Cr2O7)对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制效应以及对O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(hMGMT)蛋白表达的影响.方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定9种不同浓度K2Cr2O7,(0.000、0.010、0.040、0.160、0.312、0.625、1.250、2.500、5.000.μmol/L)对A549细胞的增殖抑制率;用损伤修复试验观察在不同浓度K2Cr2O7,作用下人肺腺癌A549细胞的划痕修复情况;以β-actin为参照,应用Western blotting技术检测不同浓度K2Cr2O7,对人肺腺癌A549细胞hMGMT表达的影响.结果:MTT比色法检测显示,大于0.625μmol/L浓度组K2Cr2O7,可抑制细胞活性,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).损伤修复试验显示,与空白对照组比较,0.625、1.250.2.500和5.000 μmoL/L的K2Cr2O7,抑制细胞损伤修复,而0.312、0.160、0.040μzmoL/L的K2Cr2O7促进细胞损伤修复.Western blotting显示,0.312、0.160、0.040 μmoL/L的K2Cr2O7对hMGMT蛋白的表达具有促进作用,0.625、1.250、2.500和5.000 μmoL/L的K2Cr2O7,对hMGMT蛋白的表达具有抑制作用.结论:低浓度的K2Cr2O7,对人肺腺癌A549细胞的增殖、损伤修复和hMGMT蛋白的表达呈现低剂量兴奋效应;高浓度K2Cr2O7,对hMGMT蛋白的表达则呈现抑制作用.     

二氢叶酸还原酶基因在耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞株的耐药机制探讨

目的探索二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)基因在耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞株的表达改变。方法选择骨肉瘤原代细胞株细胞株Saos-2与耐药细胞株Saos-2/MTX4.4,用RT-PCR方法半定量测定原代细胞株与耐药细胞株在DHFR基因表达改变。结果 Saos-2、Saos-2/MTX4.4细胞系RFC基因mRNA表达与内参基因对比分别为7.54±2.14、2.13±2.24,有统计学差别。结论耐药细胞株RFC基因表达下降可能是细胞株耐药的原因。     

淫羊藿苷对人牙周膜细胞骨向分化基因表达的影响

目的:观察淫羊藿苷对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)骨向分化基因表达的影响。方法:体外培养hPDLCs,取第5代细胞,加入浓度为0.01 mg/L的淫羊藿苷溶液,空白对照组为单纯成骨培养基,21天茜素红染色观察淫羊藿苷对hPDLCs成骨作用;Q-PCR定量分析第2、4、6天淫羊藿苷对hPDLCs成骨基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原及骨钙素(osteocalcin,OC)基因表达的影响。结果:第21天茜素红染色显示加入淫羊藿苷组较空白对照组矿化结节形成较多;第2、4、6天时,淫羊藿苷组促进ALP、OC mRNA的表达,第6天时达到高峰,与对照组比较差异有统计学意义(20.15±6.67 vs.7.90±0.71,4.13±0.56 vs.3.55±0.08,P<0.01)。第2天时,Ⅰ型胶原表达量最高,后逐渐降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:淫羊藿苷具有促进hPDLCs骨向分化的作用,促进成骨基因的表达。     

脂联素对人成骨细胞护骨素和核因子κB受体活化素配体表达的影响

目的 探讨脂联素影响骨代谢的可能作用机制.方法 体外培养人成骨细胞,(1)分别加入0、3、10和30 mg/L的脂联素作用48 h;(2)加入0或30 mg/L脂联素分别作用12、24、48 h;采用荧光定量PCR和ELISA方法检测护骨素和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达.另将人成骨细胞与CD14+外周血单个核细胞(PBMC)共培养,加入30 mg/L脂联素作用14 d,行破骨细胞标志酶抗酒石酸磷酸酶染色.结果 0、3、10和30 mg/L的脂联素作用48 h,成骨细胞护骨素mRNA和蛋白表达分别为100%±9%、68%±7%、47%±8%、30%±5%与(9.2±0.3)、(6.6±0.4)、(4.1±0.4)、(2.6±0.4)ng/ml,RANKL mRNA和蛋白表达分别为100%±5%、165%±8%、213%±6%、316%±10%与(1.3±0.2)、(2.1±0.1)、(2.3±0.2)、(2.8±0.1)ng/ml.脂联素对护骨素表达的抑制和对RANKL表达的促进作用均呈剂量和时间依赖性(P＜0.05).脂联素干预成骨细胞与CD14+PBMC共培养体系可诱导破骨细胞生成.结论 脂联素可通过抑制护骨素表达、诱导成骨细胞RANKL表达,诱导破骨细胞生成,这可能是脂联素影响骨代谢的作用机制之一.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。