化瘀解毒汤对肾小球硬化症PAI-1mRNA的影响

目的:旨在探讨化瘀解毒汤延缓慢性肾衰、肾小球硬化的机理.方法:采用单肾切除加重复尾静脉注射阿霉素的大鼠肾小球硬化模型,用原位杂交的方法检测肾组织PAI-1mRNA的表达.结果:PAI-1mRNA在正常组肾小球内弱阳性表达,模型组表达明显高于各中药治疗组、西药治疗组及正常组(P＜0.05,P＜0.01).西药治疗组表达略高于各中药治疗组,但无显著性差异(P＞0.05).中药各治疗组之间比较,无显著性差异(P＞0.05).结论:化瘀解毒汤可能通过下调肾小球PAI-1mRNA基因的表达,促进肾小球细胞外基质降解,从而达到延缓肾小球硬化作用.     

尿毒灵对肾小球硬化大鼠基质金属蛋白酶系统的影响

目的探讨尿毒灵对阿霉素致肾小球硬化大鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法将72只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,用原位杂交法检测各组肾皮质MMP-9、TIMP-1表达。结果 MMP-9mRNA在正常组肾小球内弱阳性表达,各中药治疗组及西药组的表达均明显高于模型组(P0.05),各中药治疗组表达显著高于西药组(P0.05);TIMP-1mRNA在正常组肾小球内弱阳性表达,模型组表达明显高于各中药治疗组、西药组及正常组(P0.05或P0.01),西药组表达显著高于各中药治疗组(P0.05)。结论尿毒灵可能通过调节MMP-9和TIMP-1的表达,改善肾小球硬化,从而起到肾脏保护作用。     

化瘀解毒汤对阿霉素致肾小球硬化症MMP-9的影响

肾小球硬化是肾小球细胞外基质积聚的结果 ,是慢性肾衰的主要病理变化。基质金属蛋白酶 9(ＭＭＰ 9)是促进细胞外基质降解酶之一 ,它与肾小球硬化密切相关。化瘀解毒汤是皮持衡教授用于治疗慢性肾衰的经验方 ,本研究旨在探讨化瘀解毒汤延缓慢性肾衰、肾小球硬化的机理。材料与     

胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜MMP1与TIMP1 mRNA表达的影响

目的 研究胃炎I号对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜MMP1和TIMP1 mRNA表达的影响,探讨胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜损伤的疗效作用机制。方法 将SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,参照文献制造CAG模型;造模成功后采用胃炎Ⅰ号煎剂高中低剂量（2.16,1.08,0.54 9·kg-1）及维酶素(0.86g·kg-1)治疗CAG模型大鼠,实时荧光定量PCR技术检测MMP1及TIMP1 mRNA表达。结果 与正常对照组比较,CAG组大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达降低(P＜0.05),TIMP1 mRNA表达无明显变化(P＞0.05);各治疗组与模型组比较,中剂量胃炎Ⅰ号组对CAG大鼠胃黏膜病变疗效最佳,可提高MMP1 mRNA表达(P＜0.05)。结论 CAG大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达水平下降,TIMP1 mRNA的表达未见明显异常,可能是慢性萎缩性胃炎的病理机制之一：胃炎I号可提高胃黏膜组织的MMP1 mRNA表达,有助于胃黏膜组织的修复,则是其治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制之一。     

益气解毒化瘀小复方及其单味药对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1表达及细胞外基质产生的影响

目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞MMP3(GMCs),TIMP1表达及细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞,RT-PCR法检测各组对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1的表达,双抗体ELISA夹心法检测各组对细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。结果:小复方组降低系膜细胞MMP3、TIMP1表达最为明显,小复方组降低细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响最为明显,与各单味药,西药对照组比较,有显著性差异(P0.01或P0.05)。结论:益气解毒化瘀小复方可有效地抑制肾小球系膜细胞增殖,有效地促进系膜细胞凋亡,并优于单味药,从而达到抗肾小球硬化,保护肾脏的目的。     

肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:观察肾衰灵对慢性肾衰(CRF)大鼠肾组织层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(C-Ⅲ)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法:采用5/6肾切除法建立慢性肾衰肾小球硬化大鼠模型,随机分为正常组、模型组、赖诺普利组、肾衰灵组,8周后测定各组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达及肾脏病理变化。结果:模型组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达与正常组相比均明显增加(P<0.05),肾衰灵、赖诺普利组明显低于模型组(P<0.05),肾衰灵组明显低于赖诺普利组(P<0.05)。肾衰灵组肾脏病理变化明显减轻。结论:肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏有明显保护作用,肾衰灵可显著降低大鼠肾组织TGF-β1相对mRNA表达,使LN,C-Ⅲ型胶原的合成减少,减轻肾组织中细胞外基质的沉积和肾小球的硬化,进而达到延缓肾功能衰竭的目的。     

肾衰冲剂抑制残余肾转化生长因子-β1与组织金属蛋白酶抑制剂-1mRNA的表达

目的 :研究肾衰冲剂对大鼠残余肾转化生长因子 β1(TGF β1)、组织金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)mRNA过度表达的抑制作用。方法 :制作大鼠 5 / 6肾切除肾衰模型 ,分别予肾衰冲剂及党参、丹参、制大黄灌胃治疗 1个月后取各组大鼠残余肾。用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)法检测残余肾TGF β1、TIMP 1mRNA的表达。结果 :大鼠慢性肾衰模型组表现为TGF β1、TIMP 1mRNA的过度表达 ;经肾衰冲剂治疗后TGF β1、TIMP 1mRNA的表达降低 (P <0 0 1)。其组成单味药丹参、制大黄则有不同程度的作用 ,党参作用不明显。结论 :肾衰冲剂减轻残余肾纤维化的病变与其抑制残余肾组织TGF β1、TIMP 1mRNA的过度表达有关。     

益气解毒化瘀小复方及其单味药对大鼠肾小球系膜细胞Smad3,Smad7mRNA的影响研究

目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞信号通路Smad3,Smad7mRNA的基因表达影响,初步明确其抗肾小球硬化的作用机理。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞(GMCs),RT-PCR法检测Smad3,Smad7mRNA表达。结果:小复方组抑制系膜细胞Smad3mRNA的表达最为明显,促进Smad7mRNA表达最为明显,与各单味药组、西药对照组比较,有显著性差异(P 0. 01或P 0. 05)。结论:益气解毒化瘀小复方可有效地抑制肾小球系膜细胞Smad3mRNA的表达,有效地促进系膜细胞Smad7mRNA表达,并优于单味药,从而达到抗肾小球硬化,保护肾脏的目的。     

参草通脉颗粒对AngⅡ诱导的心衰心肌细胞ACE 2、MMP 2及TIMP 2影响的实验研究

目的研究参草通脉颗粒对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞ACE 2、MMP 2、TIMP 2的影响。方法取1~3 d的Wistar大鼠心脏并剪成1 mm3大小的组织块,经消化、振荡制成细胞悬液,离心分离心肌细胞,计数后接种于培养皿。将培养皿中心肌细胞加入6孔板,应用AngⅡ诱导心肌细胞。将36只Wister大鼠随机分为正常组、模型组、西药组和中药高、中、低剂量组,每组6只。正常组大鼠常规等容积蒸馏水灌胃,西药及中药组大鼠按人鼠剂量换算给予药物灌胃,用药5 d后心脏采血,自然分离血清。按组别加入AngⅡ诱导的心衰心肌细胞中。培养36 h后,Elisa法检测各组心肌细胞氨基末端脑钠尿肽(NT-proBNP)水平,Western Blot法检测各组心肌细胞基质金属蛋白酶2(MMP 2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP 2)、血管紧张素转化酶2(ACE 2)蛋白含量,实时荧光定量法(PCR)检测MMP 2 mRNA、TIMP 2 mRNA、ACE 2 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组NT-proBNP、MMP 2蛋白含量、MMP 2 mRNA表达显著升高,TIMP 2、ACE 2蛋白含量及TIMP 2、ACE 2 mRNA表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,西药组、中药组NT-proBNP、MMP 2蛋白含量、MMP 2 mRNA表达显著降低,TIMP 2、ACE 2蛋白含量及TIMP 2、ACE 2 mRNA表达显著升高(P<0.05),具有统计学意义;与西药组比较,中药组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论参草通脉颗粒能调节AngⅡ诱导的大鼠心衰心肌细胞中MMP 2、TIMP 2、ACE 2表达。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠基质金属蛋白酶-9的影响

目的 :观察补肾中药治疗前后雄激素致不孕大鼠模型 (ASR)基质金属蛋白酶 9(MMP 9)的变化。方法 :建立雄激素致不孕大鼠模型 ,通过阴道涂片筛选各组大鼠。进行MMP 9原位杂交 ,显微镜检并电脑摄像 ,图像分析卵巢MMP 9RNA信号表达强度。结果 :MMP 9mRNA的表达面积和表达强度 :模型组 <正常组 <阳性组 <中药组 (P <0 0 1)。结论 :卵巢基质金属蛋白酶 9mRNA在雄激素致不孕大鼠表达水平较其它组为低 ,而中药促排卵方对其有一定的调节功能     

加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs表达的影响

目的:观察预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)基因表达的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)腹腔注射建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,各组行HE染色,观察肝脏病理组织学改变。RT-q PCR法检测MMP1、TIMP1和TIMP2 mRNA表达。结果:(1)病理结果显示模型组肝纤维化明显,中药高、中、低剂量组较模型组纤维化减轻;(2)MMP1 mRNA模型组表达量与正常组比较明显减少(P0.05),与阳性药物组、中药中剂量和低剂量组相较表达量同样明显减少(P0.05);(3)TIMP1 mRNA、TIMP2 mRNA模型组表达量比正常组明显增多(P0.05),与阳性药物组和中药中、低剂量组相较均表达量减少(P0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠MMP1表达,抑制TIMP1、TIMP2表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。     

护津方对急性肺损伤大鼠肺组织金属基质蛋白酶2mRNA及其抑制因子2mRNA表达的影响

目的：探讨护津方对细菌脂多糖诱导的急性肺损伤（Au）大鼠肺组织金属基质蛋白酶2mRNA（MMP一2mRNA）及其抑制因子2mRNA（tiMP一2mRNA）表达的影响。方法：40只雄性Wislar大鼠随机分为4组：正常对照组、LPS模型组、地塞米松组和护津方组,每组再分为4小时和8小时两个亚组。分别用地塞米松和护津方在LPS诱导Au模型前预处理大鼠。检测大鼠肺体指数,实时荧光定量PcR检测肺组织MMP一2mRNA、TIMP一2mRNA表达,并光镜观察肺组织病理形态变化。结果：与模型组相比,在两个时相点护津方组大鼠肺体指数显著降低（P〈0．01或P〈0．05）、MMP一2mRNA表达表达明显降低（P〈0．01）及TIMP一2mRNA表达明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。病理学观察,模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死,护津方组大鼠肺组织病理损伤程度较模型组减轻。结论：护津方对内毒素致急性肺损伤大鼠有保护作用,其机理可能与其能降低MMP一2mRNA的表达和升高TIMP一2mRNA的表达有关。     

化瘀解毒汤抗肾间质纤维化的实验研究

目的探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制.方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分(I、Ⅲ型胶原)、TGFβ1mRNA及MMP1mRNA表达,并做相关肾组织学检查.结果模型组和各治疗组大鼠肾组织I、Ⅲ型胶原面积比及TGFβ1mRNA的平均吸光度值显著增加(P＜0.05),MMP1mRNA平均吸光度值显著降低(P＜0.05);各治疗组大鼠I、Ⅲ型胶原面积比及TGFβ1mRNA平均吸光度值较模型组减少(P＜0.05),MM-P1mRNA平均吸光度值较模型组增加(P＜0.05);治疗组中以中药预防组鼠I、Ⅲ型胶原面积比及TG-Fβ1mRNA平均吸光度值最低、MMP1mRNA平均吸光度值最高(P＜0.05).经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善.结论化瘀解毒汤通过下调TG即1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达,以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维化.     

冬虫夏草干预肾小球硬化进展的实验研究

目的:用冬虫夏草对进行性肾小球硬化大鼠模型干预治疗,观察其对细胞外基质的影响并探讨其作用机制。方法:实验大鼠随机分为三组。模型组、冬虫夏草组分别行5/6肾切除制备进行性肾小球硬化模型,每天灌胃给予冬虫夏草(2.5 g/kg)水提取液,进行干预治疗;模型组和正常对照组给予等量的自来水。末次术后4周、9周分别测定大鼠24 h尿蛋白定量;观察肾脏病理变化,用免疫组织化学检测肾组织胶原Ⅳ、纤维连接蛋白(FN)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)。结果:冬虫夏草能降低肾小球硬化指数,减少胶原Ⅳ、FN表达;减少尿蛋白排泄;增加肾组织MMP-2表达,减少TIMP-1和TIMP-2的表达。结论:冬虫夏草能够减少5/6肾切除大鼠尿蛋白排泄量;调节MMP/TIMP之间的平衡;减轻肾小球硬化大鼠细胞外基质的积聚,延缓肾小球硬化的进展。     

加减抵挡汤对肾小球硬化大鼠TIMP-1及PAI-1mRNA表达的影响

目的:探讨加减抵挡汤治疗肾小球硬化的机制。方法:采用单侧肾切除重复阿霉素注射造成肾小球硬化大鼠模型,以加减抵挡汤治疗并用西药科素亚为阳性对照,观察模型组和各治疗组的肾功能及24h尿蛋白定量,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)测定各组大鼠肾组织TIMP-1及其PAI-1的mRNA的表达。结果:加减抵挡汤各组均能降低肾小球硬化大鼠增高的24h尿蛋白,改善肾功能,且加减抵挡汤能下调大鼠肾组织TIMP-1和PAI-1mRNA的表达。结论:加减抵挡汤通过下调肾小球硬化大鼠肾组织TIMP-1和PAI-1 mRNA的表达,延缓肾功能衰竭。     

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭大鼠蛋白质营养不良及ALB、IGF-Ⅰ基因表达的影响

目的 :观察中药肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭大鼠蛋白质营养不良的治疗作用及探讨其可能的机制。方法 :5 /6肾切除造模后将大鼠随机分为正常组 (N)、模型组 (C)、肾衰养真胶囊高剂量组 (H)、中剂量组 (M )、低剂量组 (L)、西药对照开同组 (K)。给药四周后检测大鼠血清白蛋白 (ALB)、转铁蛋白 (TF)、胰岛素样生长因子 -Ⅰ (IGF -Ⅰ )、 2 4h尿蛋白定量(2 4hrUprV) ,RT -PCR法检测大鼠肝脏ALBmRNA、IGF -ⅠmRNA表达水平。结果 :(1)肾衰养真胶囊中剂量组的体重增长高于开同组 (P <0 0 5 ) ;(2 )治疗后肾衰养真胶囊各剂量组和开同组血清ALB、TF、IGF -Ⅰ水平显著高于模型组 ,IGF -Ⅰ水平较治疗前显著升高 ;(3)治疗后 ,2 4h蛋白尿治疗前后差值高剂量组 (10 8± 2 9 8)和中剂量组 (18 7± 4 9 4 )明显低于模型组 (5 0 3± 74 0 )、开同组 (6 3 8± 30 7) (P <0 0 5 ) ;(4 )治疗后肾衰养真胶囊高中低剂量组肝ALBmRNA和IGF -ⅠmRNA表达量较模型组、开同组显著增加 (P <0 0 1)。结论 :肾衰养真胶囊能纠正CRF蛋白质代谢紊乱 ,改善CRF蛋白质营养状态 ,其机制可能是通过上调CRF大鼠肝脏ALBmRNA表达促进ALB合成及上调IGF -ⅠmRNA表达提高血清IGF -Ⅰ水平 ,促进蛋白质合成 ,减少蛋白质分解。     

糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP-1表达的影响

研究应用免疫组化及RT -PCR测定肾皮质TIMP - 1蛋白水平及TIMP - 1mRNA表达的变化情况 ,探讨糖微康防治DN的作用机理。目的 :观察糖微康对糖尿病大鼠肾脏金属蛋白酶抑制剂 - 1(TIMP - 1)过度表达的抑制的作用。方法 :以STZ诱导糖尿病动物模型 ,采用免疫组化和RT -PCR检测方法观察糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP - 1蛋白、基因表达的影响。结果 :与模型组大鼠比较 ,治疗组大鼠肾皮质TIMP - 1免疫染色强度明显减轻 (P <0 .0 1) ,TIMP - 1mRNA的表达降低 (P <0 .0 1)。结论 :糖微康可抑制糖尿病大鼠肾皮质TIMP - 1的过度表达 ,预防DN的发生和延缓DN的发展。     

化瘀解毒汤对间质胶原酶mRNA基因表达作用的机理研究

目的探讨化瘀解毒汤抗肾间质纤维化作用的机理.方法用UUO诱导肾间质纤维化动物模型,予以化瘀解毒汤进行防治.结果各治疗组大鼠肾组织MMP-1 mRNA表达较模型组显著升高(P＜0.05),尤以预防组更佳,且与肾间质I、Ⅲ型胶原变化相反.肾脏组织病理检查也有明显改善.结论化瘀解毒汤抗肾间质纤维化的作用机理可能与其能上调MMP-1 mRNA表达有关.     

木苏丸防治二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的实验研究

目的　观察木苏丸防治大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法　采用 1%二甲基亚硝胺 (DMN) 10mg/ (kg·d)腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型 ,木苏丸治疗组予木苏丸3.12 5 g/ (kg·d)灌胃 ,观察肝功能、血透明质酸 (HA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)含量变化及基质金属蛋白酶 - 2 (MMP - 2 )、金属蛋白酶组织抑制因子 - 1(TIMP - 1)、α -平滑肌肌动蛋白 (α -SMA)在肝组织中的表达 ;并观察肝脏显微结构改变。结果　木苏丸治疗组与模型对照组比较 ,碱性磷酸酶 (ALP)、MDA、HA明显下降 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 ) ,血清白蛋白(ALB)、SOD明显增高 (P <0 .0 1) ,TIMP - 1表达下降 (P <0 .0 5 ) ,MMP - 2的表达无明显改变(P >0 .0 5 ) ;光镜下肝纤维化程度减轻。结论　木苏丸具有保肝、延缓肝纤维化形成的作用 ,其作用机制可能与其抗氧化及其下调TIMP - 1的表达有关     

龙蝎消水膏对艾氏腹水瘤小鼠VEGFmRNA、MMP-2mRNA、FLt-1mRNA表达的影响

目的探讨龙蝎消水膏对艾氏腹水瘤（EAC）小鼠的作用及其可能机制。方法Balb／c—nu／nu裸鼠除正常组10只外,另外40只小鼠腹腔内注射0．2mlEAC细胞株悬液（瘤细胞浓度1×10^7／m1）制备腹水瘤小鼠模型。造模成功后随机分为4组,即对照组（予0．9％NaCI溶液）、中药外敷组（予龙蝎消水膏组）、西药组 予恩度＋顺铂（DDP） 、联合治疗组（予龙蝎消水膏联合恩度、顺铂）。各组采取相应干预措施,观察小鼠体内腹水量和腹水瘤细胞的存活率。采用RT—PCR方法,测量各用药小鼠血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体（Fh-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA的含量变化。结果中药外敷组、西药组、联合治疗组对小鼠腹水的抑制作用明显优于对照组（P〈0．01）;与对照组比较,中药外敷组、西药组、联合治疗组治疗后小鼠瘤细胞计数下降（P〈0．05,P〈0．01）。与对照组比较,中药外敷组、西药组、联合治疗组肿癌组织中VEGFmRNA、MMP-2mRNA、FLt-1mRNA的表达水平差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。与西药组比较,联合治疗组的VEGFmRNA、MMP-2mRNA、FLt-1mRNA的表达水平下降（P〈0．05）。结论龙蝎消水膏对小鼠移植性腹水瘤具有明显抑制作用,能明显降低肿瘤组织VEGFmRNA,MMP-2mRNA、FLt-1mRNA表达,并与恩度、顺铂具有协同增效作用。