肾衰冲剂抑制残余肾转化生长因子－β1与组织金属蛋白酶抑制剂－1 mRNA的表达

目的：研究肾衰冲剂对大鼠残余肾转化生长因子－β1（TGF－β1），组织金属蛋白酶抑制剂－1（TIMP－1）mRNA过度表达的抑制作用。方法 ：制作大鼠5／6肾切除肾衰模型，分别予肾衰冲剂及党参，丹参，制大黄灌胃治疗1个月后取各组大鼠残余肾。用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）法检测残余肾TGF－β1，和TIMP-1 mRNA的表达。结果：在鼠慢性肾衰模型组表现为TGF－β1，TIMP－1 mRNA的过度表达；经肾衰冲剂治疗后TGF－β1,TIMP-1 mRNA的表达降低（P＜0．01）。基组成单味药丹参，制大黄则有不同程度的作用，党参作用不明显。结论：肾衰冲剂减轻残余肾纤维化的病变与其抑制残余肾组织TGF－β1，TIMP－1 mRNA的过度表达有关。     

肾衰冲剂抑制残余肾转化生长因子-β1与组织金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA的表达

目的:研究肾衰冲剂对大鼠残余肾转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA过度表达的抑制作用.方法:制作大鼠5/6肾切除肾衰模型,分别予肾衰冲剂及党参、丹参、制大黄灌胃治疗1个月后取各组大鼠残余肾.用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测残余肾TGF-β1、TIMP-1 mRNA的表达.结果:大鼠慢性肾衰模型组表现为TGF-β1、TIMP-1 mRNA的过度表达;经肾衰冲剂治疗后TGF-β1、TIMP-1 mRNA的表达降低(P＜0.01).其组成单味药丹参、制大黄则有不同程度的作用,党参作用不明显.结论:肾衰冲剂减轻残余肾纤维化的病变与其抑制残余肾组织TGF-β1、TIMP-1 mRNA的过度表达有关.     

糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP-1表达的影响

研究应用免疫组化及RT -PCR测定肾皮质TIMP - 1蛋白水平及TIMP - 1mRNA表达的变化情况 ,探讨糖微康防治DN的作用机理。目的 :观察糖微康对糖尿病大鼠肾脏金属蛋白酶抑制剂 - 1(TIMP - 1)过度表达的抑制的作用。方法 :以STZ诱导糖尿病动物模型 ,采用免疫组化和RT -PCR检测方法观察糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP - 1蛋白、基因表达的影响。结果 :与模型组大鼠比较 ,治疗组大鼠肾皮质TIMP - 1免疫染色强度明显减轻 (P <0 .0 1) ,TIMP - 1mRNA的表达降低 (P <0 .0 1)。结论 :糖微康可抑制糖尿病大鼠肾皮质TIMP - 1的过度表达 ,预防DN的发生和延缓DN的发展。     

化瘀解毒汤对肾小球硬化症MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA的影响

化瘀解毒汤是皮持衡教授用于治疗慢性肾衰的经验方。目的 :旨在探讨化瘀解毒汤延缓慢性肾衰、肾小球硬化的机理。方法 :采用单肾切除加重复尾静脉注射阿霉素的大鼠肾小球硬化模型。用原位杂交的方法检测肾组织MMP - 9mRNA、TIMP - 1mRNA的表达。结果 :MMP - 9mRNA在正常组肾小球内弱阳性表达 ,各中药治疗组及西药治疗组的表达均明显高于模型组 (P <0 .0 5 ) ,各中药治疗组表达显著高于西药治疗组 (P <0 .0 5 ) ;TIMP - 1mRNA在正常组肾小球内弱阳性表达 ,模型组表达明显高于各中药治疗组、西药治疗组及正常组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,西药治疗组表达显著高于各中药治疗组 (P <0 .0 5 )。结论 :化瘀解毒汤可能通过下调肾小球TIMP - 1mRNA基因的表达及上调肾小球MMP - 9mRNA基因的表达 ,促进肾小球细胞外基质降解 ,从而达到延缓肾小球硬化作用。     

肾衰冲剂对大鼠残余肾系膜细胞重塑的影响

目的 :研究 5 / 6肾切除大鼠残余肾系膜细胞重塑时α SMA的变化 ,进一步探讨肾衰冲剂治疗“慢肾衰”的作用机制。方法 :应用免疫组化技术检测大鼠残余肾系膜细胞内α SMA的表达情况和细胞外基质 (ECM )的变化。结果 :残余肾未硬化区肾小球系膜细胞内α SMA表达明显增强 (2 45± 0 36 ) ,硬化区肾小球α SMA表达降低(0 37± 0 0 8) ,经肾衰冲剂治疗后增高的α SMA表达下调 (1 92± 0 31) ,细胞外基质fibronectin、collagen Ⅳ含量减少 ,肾小球硬化指数下降 (2 5 7± 0 35→ 1 6 3± 0 2 4)。结论 :α SMA可作为系膜细胞重塑的标志 ,肾衰冲剂能抑制其过度表达从而延缓残余肾组织硬化进程     

肾衰冲剂缓解5/6肾切除大鼠肾小球硬化的实验研究

目的：研究扶正降浊的肾衰冲剂缓解慢性肾衰大鼠残余肾小球硬化的作用。方法：制作大鼠5／6肾切除肾衰模型，分别给予肾衰冲剂及主要单味药党参、丹参、制大黄灌胃，治疗1个月后检测大鼠血清Ⅳ型胶原（COL－Ⅳ）、层粘蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）、Ⅲ前胶原（PC－Ⅲ）含量，图象分析残肾组织Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的表达量。结果：肾衰冲剂可以降低血LN、COL－Ⅳ、PC-Ⅲ前胶原，提高血PN含量，减少残肾肾小球细胞外基质FN、Col-Ⅳ过量积聚。而党参、丹参、制大黄亦有各自一定的作用。结论：肾衰冲剂减轻肾小球硬化的机理在于减少残肾肾小球细胞外基质的增生。     

补肾解毒通络方对慢性肾衰大鼠的实验研究

目的:观察补肾解毒通络方对腺嘌呤所致大鼠慢性肾衰的影响。方法:通过腺嘌呤灌胃建立大鼠慢性肾衰模型,观察补肾解毒通络方对大鼠血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其mRNA的影响。结果:经补肾解毒通络方治疗的大鼠,血清BUN、Scr降低,TGFβ-1和TGFβ-1mRNA的表达下调,与模型组比较有统计学差异(P0.01或P0.05)。结论:补肾解毒通络方能有效延缓慢性肾功能衰竭的进展,可能与其抑制TGFβ-1和TGF-β1mRNA的表达来减轻肾间质纤维化有关。     

胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜MMP1与TIMP1 mRNA表达的影响

目的 研究胃炎I号对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜MMP1和TIMP1 mRNA表达的影响,探讨胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜损伤的疗效作用机制。方法 将SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,参照文献制造CAG模型;造模成功后采用胃炎Ⅰ号煎剂高中低剂量（2.16,1.08,0.54 9·kg-1）及维酶素(0.86g·kg-1)治疗CAG模型大鼠,实时荧光定量PCR技术检测MMP1及TIMP1 mRNA表达。结果 与正常对照组比较,CAG组大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达降低(P＜0.05),TIMP1 mRNA表达无明显变化(P＞0.05);各治疗组与模型组比较,中剂量胃炎Ⅰ号组对CAG大鼠胃黏膜病变疗效最佳,可提高MMP1 mRNA表达(P＜0.05)。结论 CAG大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达水平下降,TIMP1 mRNA的表达未见明显异常,可能是慢性萎缩性胃炎的病理机制之一：胃炎I号可提高胃黏膜组织的MMP1 mRNA表达,有助于胃黏膜组织的修复,则是其治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制之一。     

肾衰冲剂改善慢肾衰大鼠毒素潴留等作用研究

目的 :研究扶正降浊的肾衰冲剂改善“慢肾衰”大鼠毒素潴留和贫血的作用。方法 :制作大鼠 5 / 6肾切除肾衰模型 ,分别予肾衰冲剂及主要单味药党参、丹参、制大黄灌胃治疗 1个月后观察残肾病理、超微结构变化 ,检测大鼠血清甲基胍 (Methylguanidine,MG)、胍基琥珀酸 (GuanidinosuccinicAcid ,GSA)及血红蛋白、红细胞计数。结果 :各组药物可以改善残肾结构 ,降低体内尿毒素 ,改善贫血状态 ,与模型对照组比较有明显差异。尤以肾衰冲剂疗效显著。结论 :“慢肾衰”治疗应扶正降浊并重 ,扶正不恋邪 ,降浊不伤正     

中药复方对糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β1、Ⅳ型胶原mRNA表达的影响

目的观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)与Ⅳ型胶原mRNA表达的影响,探讨其作用机理。方法采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT-PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1与Ⅳ型胶原mRNA表达。结果各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、Ⅳ型胶原mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1、Ⅳ型胶原mRNA的表达,从而起到保护肾脏、延缓肾脏病理损害、抑制糖尿病肾病形成的作用。     

尿毒康对慢肾衰阳虚大鼠肾组织TGFβ_1 CTGF表达的影响

目的:观察尿毒康对慢肾衰阳虚型模型大鼠肾组织TGFβ1、CTGF表达的影响。方法:40只SD雄性大鼠随机抽取10只作为正常对照组,对其余30只采用5/6肾切除改良法制作慢肾衰模型,待慢肾衰模型成功后,再随机分为慢肾衰阳虚模型组以及肾衰阳虚加中药组,对慢肾衰阳虚模型组给予口服丙基硫氧嘧啶,肾衰阳虚加中药组在此基础上加服尿毒康。8周后处死取肾脏进行免疫组织化学染色,检测TGFβ1、CTGF在肾组织中的表达。结果:与正常对照组比较,慢肾衰阳虚模型组TGFβ1、CTGF均较强表达(P<0.01);与慢肾衰阳虚模型组比较,肾衰阳虚加尿毒康组TGFβ1、CTGF的表达均明显较弱(P<0.05)。结论:尿毒康能减轻慢肾衰阳虚型大鼠肾纤维化,作用机制可能与降低TGFβ1、CTGF表达有关。     

电针对脑缺血再灌注大鼠缺血脑区IL-1β和TNF-α mRNA表达的调节

目的 :探讨早期针刺治疗抗脑缺血再灌注炎性损伤的机制。方法 :采用大脑中动脉线栓法制备MCAO缺血再灌注模型 ,应用原位杂交的方法观察脑缺血再灌注及电针对大鼠大脑皮质、纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA表达的影响。结果 :脑缺血再灌注后 ,缺血侧皮层及纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞表达增高 (模型组与正常组、假手术组比较P <0 0 1 ) ;电针可显著降低缺血侧皮层及纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞表达 (电针组与模型组比较P <0 0 1 )。结论 :早期针刺治疗可能通过下调缺血脑区IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞而防治脑缺血再灌注炎性损伤     

益气滋肾清利法对CPN大鼠模型肾组织TGF-β_1表达的影响

目的:探讨益气滋肾清利法对慢性肾盂肾炎(CPN)大鼠模型肾组织转化生长因子β1(TGFβ-1)表达的影响。方法:通过短暂结扎大鼠单侧输尿管和膀胱内接种E.coli O111B4的方法复制CPN模型,分为A组(正常组)、B组(模型组)、C组(中药组)和D组(西药组)。灌胃治疗,其中A、B组生理盐水1mL,C组益气滋肾清利方水煎剂1mL,D组左旋氧氟沙星生理盐水1mL,每日1次,共60天;60天后免疫组化检测肾组织TGFβ-1的表达及RT-PCR检测TGFβ-1mRNA的含量。结果:免疫组化及RT-PCR均显示各组TGFβ-1mRNA表达均较正常组增加,B组明显高于C和D组(P<0.01),但C组与D组无明显差异。结论:益气滋肾清利法可抑制慢性肾盂肾炎(CPN)大鼠模型肾组织TGFβ-1的表达。     

糖肾保煎剂和雷米普利对糖尿病大鼠肾脏保护作用的对比实验

目的研究糖肾保煎剂和雷米普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用.方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型,分别给予糖肾保煎剂(中药组)、雷米普利(西药组)治疗8周,检测糖肾保煎剂和雷米普利对糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子-β1mRNA表达(TGF-β1mRNA)、肾脏氧化应激反应和病理改变的影响.结果中药组及西药组均能减少UAlb;抑制肾皮质TGF β1mRNA的过度表达;减小肾小球平均截面面积(MGA).中药组能提高肾皮质SOD活性,降低MDA含量.结论糖肾保煎剂和雷米普利均能减少糖尿病大鼠24 h尿白蛋白排泄,抑制肾皮质转化生长因子β1mRNA过度表达,减轻肾脏病理损害.糖肾保煎剂能改善肾组织氧化损伤.     

抗纤软肝冲剂药物血清对激活肝星状细胞表达Ⅰ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的影响

目的 :探讨抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的作用机理。方法 :分离正常大鼠肝星状细胞 ,并传代培养。用抗纤软肝冲剂给正常大鼠灌胃 ,制备药物血清 ,温育培养细胞 72h ,提取细胞总RNA ,RT PCR法分析Ⅰ型前胶原、TGF β1mRNA的表达。结果 :抗纤软肝冲剂药物血清能显著抑制肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF β1mRNA的表达。结论 :抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的机理之一是调控肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF β1mRNA的表达     

解毒通络保肾胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 :研究中药解毒通络保肾胶囊对糖尿病 (DM )大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法 :将实验动物分为正常对照组、DM组、苯那普利治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组。检测各组第 12周的血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率 (UAER)、肾组织肾素活性 (TRA)、血管紧张素转换酶 (ACE)活性、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量和肾脏肥大指标的变化 ,应用RT PCR检测肾皮质转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA ,免疫组化检测肾内纤维连接蛋白 (FN)和Ⅳ型胶原 (ColⅣ )蛋白表达水平。结果 :解毒通络保肾胶囊治疗组较DM组血糖水平显著降低 (P <0 0 1) ,UAER明显减少 (P<0 0 5 ) ,尿素氮和血肌酐水平下降 ,肾脏肥大指标改善 (P <0 .0 .1) ;较显著抑制TRA、ACE活性 ,明显降低AngⅡ含量 ,FN和ColⅣ蛋白表达显著低于DM组 (P <0 0 1)。RT PCR结果表明 ,DM大鼠肾皮质TGF β1mRNA表达升高 ,解毒通络保肾胶囊治疗组TGF β1mRNA低于DM组 (P <0 0 5 )。结论 :解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用 ,其机制可能是通过抑制TRA和ACE ,减少肾组织中AngⅡ含量 ,下调DM大鼠TGF β1,减少细胞外基质的积聚。     

大黄虫丸对大鼠肝星状细胞表达TGF-β_1的影响

目的 :探讨大黄虫丸对大鼠肝星状细胞表达转化生长因子β1(TGF β1)的影响。方法 :用CCl4复合因素致大鼠肝纤维化模型 ,同时分别给予 3种剂量大黄虫丸治疗 ,免疫组化方法观察TGF β1、α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的合成表达及纤维化程度分级。结果 :经给予大黄虫丸干预治疗常规剂量组大鼠TGF β1、α SMA表达与模型组比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,但双倍剂量组和三倍剂量组TGF β1、α SMA在汇管区及不连续纤维间隔的表达明显减弱 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :大黄虫丸较大剂量能抑制肝星状细胞增殖和分泌TGF β1,减少胶原生成 ,从而减弱肝星状细胞的自分泌放大效应 ,这可能是大黄虫丸抗肝纤维化作用的主要机制之一。     

补肾健脾药物血清对大鼠成骨细胞TGF-β1表达的影响

目的 :研究补肾健脾中药吸收后不同浓度血清对离体大鼠成骨细胞转化生长因子 (TGF) β1表达的调节作用 ,探讨补肾健脾中药治疗绝经后骨质疏松症 (OP)的作用机制。材料与方法 :采用胶原 胰蛋白酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞 (rOB) ,用改良钙钴法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性以鉴定rOB ;以补肾健脾药物吸收后药物血清 ,加入体外培养的rOB中进行培养 ,分别以RT PCR法及Westernblot法检测rOB的TGF β1mRNA和蛋白的表达。结果 :补肾健脾中药吸收后药物血清可上调rOB的TGF β1的mRNA和蛋白的表达 ,并呈一定的浓度依赖性 (P <0 0 1)。结论 :补肾健脾中药通过诱导rOBTGF β1的信号转导分子TGF β1的mRNA和蛋白的表达而促进rOB的增长与分化。     

肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:观察肾衰灵对慢性肾衰(CRF)大鼠肾组织层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(C-Ⅲ)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法:采用5/6肾切除法建立慢性肾衰肾小球硬化大鼠模型,随机分为正常组、模型组、赖诺普利组、肾衰灵组,8周后测定各组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达及肾脏病理变化。结果:模型组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达与正常组相比均明显增加(P<0.05),肾衰灵、赖诺普利组明显低于模型组(P<0.05),肾衰灵组明显低于赖诺普利组(P<0.05)。肾衰灵组肾脏病理变化明显减轻。结论:肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏有明显保护作用,肾衰灵可显著降低大鼠肾组织TGF-β1相对mRNA表达,使LN,C-Ⅲ型胶原的合成减少,减轻肾组织中细胞外基质的沉积和肾小球的硬化,进而达到延缓肾功能衰竭的目的。     

抗纤Ⅰ号对实验性肝纤维化大鼠组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及转移生长因子β1 mRNA表达的影响

目的:从分子水平研究抗纤Ⅰ号方剂治疗肝纤维化作用机理.方法:利用CCl4制造大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组及中药治疗组,中药灌胃治疗42d,检测病理学指标、肝纤维化血清学指标、肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化,以及肝组织TGF β1mRNA表达量的变化.结果:肝组织病理学以及血清学指标同对照组统计学尚有显著差异,同时实验也表明治疗组能够明显减少肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原以及TGF β1mRNA的表达量.结论:抗纤Ⅰ号具有逆转肝纤维化的作用,其作用机理可能是通过下调TGF β1mRNA,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成而减轻肝纤维化.