他克莫司对体外培养的大鼠树突状细胞成熟过程及其同种免疫刺激活性的影响(英文)

目的研究他克莫司对体外培养的大鼠树突状细胞(DC)成熟过程和同种刺激活性的影响。方法20只大鼠随机分为对照组、他克莫司、脂多糖(LPS)及LPS+他克莫司组,分别取骨髓细胞,加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4(IL-4)培养6d,收集贴壁细胞即DC。对照组不再加其他试剂,他克莫司组在开始培养时即加入他克莫司10μg·L-1,LPS组在细胞培养结束前18h加入LPS100μg·L-1,他克莫司+LPS组分别按上述要求加入他克莫司和LPS。用流式细胞术测定DC表面CD80和CD86的表达,ELISA方法检测其培养上清IL-12的浓度,用混合淋巴细胞培养法观察其对同种T细胞的刺激能力。结果与对照组比较,LPS刺激后,DC表面CD80和CD86表达明显增加,培养上清中IL-12浓度升高,其刺激同种T细胞的能力增强。与对照组和LPS组比较,他克莫司可使DC表面CD80和CD86表达明显降低,IL-12分泌减少,刺激同种T细胞的能力减弱。结论他克莫司可抑制体外培养的DC成熟及其同种刺激活性。     

多抗甲素对脐血树突状细胞体外扩增、成熟的影响

目的观察多抗甲素(polyactin A,PA)对脐血树突状细胞(dendritic cell,DC)体外扩增、成熟的影响。方法分别用加有PA、GM-CSF+TNF-α+IL-4(GTI)及GTI+PA(GTIP)的RPMI-1640培养液体外诱导培养脐血单核细胞,培养d7,Elivision免疫组化方法检测各组细胞CD1a、CD83、HLA-DR、CD34抗原表达情况,透射电镜观察细胞形态。结果PA组、GTI组及GTIP组均有一定数量的典型DC,电镜观察该细胞表面有大量粗细不等的树枝状突起;PA组CD1a+、CD83+细胞比例分别达19·63%±3·61%、14·52%±5·79%,高于对照组(即单纯培养液组);GTIP组CD1a+细胞比例升高最明显,高于GTI组。结论PA不仅能促进脐血DC体外扩增、成熟,还能协同GM-CSF、TNF-α、IL-4促进DC生成,PA是一种实用的DC活化剂。     

信号传导与转录激活子4 信号通路在脂肪酶/Toll 样受体4调控M1/M2 型巨噬细胞分化的作用及机制

目的探讨信号传导与转录激活子4(STAT4)信号通路在脂肪酶(LPS)/Toll样受体4(TLR4)调控M1/M2型巨噬细胞分化的作用及机制。方法用野生型和STAT4-KO小鼠建立动脉内膜拉伤-增生模型,在术后1、3、7和14 d用流式细胞术分析免疫细胞M1/M2型巨噬细胞在外周血内的百分比变化。用免疫荧光双染检测M1,M2型巨噬细胞的表达。用实时荧光定量PCR(q-RT PCR)检测血管组织中STAT4和TLR4表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管生长因子VEGF、PDGF-BB变化。从STAT4KO和蛋白质印迹法小鼠骨髓分离CD11b+细胞,用集落刺激因子GM-CSF和LPS处理,细胞实验分为WT con组、WT+LPS刺激组、STAT4KO con组、STAT4KO+LPS刺激组。观察巨噬细胞的分化情况。结果与野生组相比,STAT4-KO组在术后1、3、7和14天时M1 型巨噬细胞F4/80+iNOS+,F4/80+IL-12的细胞百分比降低(P<0.05),而M2型巨噬细胞F4/80+Arg-1+和F4/80+CD206+ 的细胞百分比明显升高(P<0.05)。STAT4-KO组的M1,M2型巨噬细胞阳性表达率(9.42±0.41)%、(89.48±10.43)%与野生组(11.14±1.49)%、(48.73±5.89)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。STAT4 和TLR4 在STAT4-KO 组［(0.23±0.04)、(0.47±0.06)］中的表达量明显较野生组［(1.31±0.07)、(0.89±0.08)］低(P<0.05)。VEGF、PDGF-BB 在STAT4-KO 组［(9.28±1.02)、(10.56±1.62)］中的表达量明显较野生组［(3.14±0.91)、(4.23±0.84)］高(P<0.05)。M2型巨噬细胞的诱导因子(IL-4)及分泌因子(IL-10)在STAT4KO+LPS 刺激组、WT+LPS 刺激组、STAT4KO con 组中的表达量明显较WT con 组高(F=13.412,F=15.012,P<0.05),其中STAT4KO+LPS刺激组表达量最为显著。结论STAT4信号通路可以促进抑制M1型巨噬细胞和增强M2型巨噬细胞分化。其作用机制可能是通过LPS/TLR4的结合。     

IL-2对晚期胃癌树突状细胞共刺激分子表达的调节及机制

目的　观察中晚期胃癌患者外周血单核细胞来源的树突状细胞 (MoDC)表面共刺激分子的表达 ,探讨白细胞介素 2 (IL 2 )对共刺激分子的调节作用 ,及其相关的免疫机制。方法　分离、培养中晚期胃癌患者MoDC ,FACS分析IL 2活化前后MoDC表面共刺激分子表达的荧光强度 ,Western印迹分析IL 2对MoDC胞内核转录因子NF kB活化的影响。结果　培养 6d的中晚期胃癌患者MoDC表面共刺激分子B7 1(CD80 )和B7 2 (CD86)表达荧光强度明显低于正常人 ,分别占细胞群体的 ( 12 .5± 1.7) %和 ( 2 2 .5± 1.2 ) % ;而培养 5d经IL 2培养 2 4h的MoDC ,B7 1和B7 2的表达增强 ,分别为 ( 3 0 .0±2 .5 ) %和 ( 5 8.0± 3 .4 ) %。Western印迹分析可见 ,IL 2处理后 ,中晚期胃癌患者的MoDC胞内NF kBp5 0呈明显的活化状态。 结论　中晚期胃癌患者DC表面共刺激分子表达低下 ,IL 2能活化DC ,调节其共刺激分子的表达 ,且可能与信号转导途径的核转录因子NF kB活化有关     

国产重组人白介素-11治疗恶性肿瘤化疗后血小板减少疗效观察

目的观察国产重组人白介素-11(rhIL-11)治疗恶性肿瘤化疗后所致血小板减少的临床疗效和不良反应.方法135例恶性肿瘤化疗所致血小板减少患者入选治疗组,接受rhIL-11治疗,每日皮下注射30～50μg·kg-1,同期进行化疗后血小板减少但未接受rhIL-11治疗的患者65例入选对照组.结果血小板最低值治疗组(32.8±5.2)×109L-1,对照组(30.9±4.5)×109L-1(P＜0.05).血小板减少持续时间治疗组(7.0±2.4)d,对照组(9.4±2.1)d,P＜0.01.血小板减少最低值至恢复正常时间治疗组(5.1±2.2)d,对照组(7.6±2.9)d,P＜0.05.治疗组和对照组均无严重出血情况,无需输注血小板情况.治疗组亚组分为用rhIL-11小于3 d组(A组)与大于3 d组(B组),血小板最低值A组(31.6±7.8)×109L-1,B组(34.6±5.6)×109L-1(P＜0.05).血小板减少持续时间A组(9.0±2.9)d,B组(6.7±3.4)d,P＜0.05.血小板减少最低值至恢复正常时间A组(6.3±3.0)d,B组(5.7±2.2)d,P＜0.05.使用重组人白介素-¨主要不良反应为水肿、发热、肌肉关节痛、心悸、感冒样症状、结膜充血、心律失常、头痛,均为Ⅰ～Ⅱ级轻度反应.结论重组人白介素-11(rhIL-11)治疗恶性肿瘤化疗所致血小板减少疗效明显,不良反应较轻,可以耐受,rhIL-11使用3 d以上疗效好于使用3 d以下者.     

吡格列酮对脂多糖引起大鼠大脑皮质神经元损伤的抑制作用

目的探讨吡格列酮对脂多糖(LPS)引起的神经元损伤的抑制作用,并探讨其信号传导机制。方法取培养7d的大鼠大脑皮质神经元细胞,除正常对照组外,其余各组先给予相应的处理30min～1h后,再加LPS10mg.L-1处理4～24h。MTT法测定细胞存活率;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;免疫荧光染色法测定磷酸化c-Jun氨基端激酶1(JNK1)细胞内定位;Western蛋白印迹法检测活性胱天蛋白酶3(caspase3)蛋白表达和磷酸化JNK1水平;Griess法测定细胞培养上清液中一氧化氮(NO)含量。结果与对照组相比,LPS可使体外培养神经元细胞存活率明显下降,(100.0±10.9)%vs(72.3±2.1)%;凋亡细胞百分率明显增加,(11.5±4.2)%vs(39.5±8.2)%;活性caspase3蛋白表达和磷酸化JNK1水平增加;细胞培养上清液中NO含量明显增加。吡格列酮0.01,0.1和1μmo.lL-1可明显对抗LPS引起的培养神经元细胞存活率下降,并呈一定浓度依赖性。吡格列酮0.1和1μmol.L-1也可明显对抗LPS引起的培养神经元凋亡细胞百分率、活性caspase3蛋白表达、磷酸化JNK1水平和NO含量增加。LPS+吡格列酮(1μmo.lL-1)组,细胞存活率为(97.8±9.7)%,凋亡细胞百分率为(20.6±5.0)%,NO含量为(6.8±1.3)μmol.L-1。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的特异性阻断剂GW9662不能去除吡格列酮对LPS引起的神经元细胞损伤的抑制作用,在LPS+吡格列酮(1μmol.L-1)+GW9662(10μmo.lL-1)组,细胞存活率为(90.7±6.9)%,凋亡细胞百分率为(23.4±4.1)%,NO含量为(5.8±0.7)μmol.L-1。GW966210μmol.L-1对LPS引起的细胞存活率降低没有影响。与LPS组相比,JNK特异性阻断剂SP6001255μmol.L-1可明显对抗LPS引起的神经元损伤,细胞存活率明显增加,(72.3±2.1)%vs(109.8±11.8)%;凋亡细胞百分率降低,(39.5±8.2)%vs(19.1±4.8)%;NO含量降低,(21.1±5.0)μmol.L-1vs(4.0±1.3)μmol.L-1。结论吡格列酮能明显抑制LPS引起的皮质神经元损伤,这种作用可能与抑制JNK信号传导通路有关,与PPARγ激活无关。     

树突状细胞诱导的淋巴因子激活的杀伤细胞对肺癌细胞系A549的体外杀伤作用

目的:探讨负载肺癌抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞对肺癌细胞A549的杀伤作用.方法:采用肺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)经rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-a诱导和肿瘤冻融抗原刺激诱导获得的DC与LAK细胞按1:20比例共培养2 d,获得Ag-DC-LAK细胞作效应细胞,分别用Ag-Dc-LAK、DC-LAK、Ag-LAK和LAK对肺癌细胞系A549细胞进行杀伤实验.结果:以30μg/mL蛋白的肿瘤抗原负载的DC其表型CD1a、CD80、CD86、HLA-DR均显著升高(P<0.05),高于单纯细胞因子诱导成熟的DCs表型,由其刺激增殖的LAK细胞对肺癌细胞A549杀伤率为(71±5)%,明显高于对照组(P<0.05).结论:经肿瘤抗原刺激诱导成熟的DC可有效传递抗原,增加T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用.     

树突状细胞诱导的淋巴因子激活的杀伤细胞对肺癌细胞系A549的体外杀伤作用

目的:探讨负载肺癌抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞对肺癌细胞A549的杀伤作用.方法:采用肺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)经rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-a诱导和肿瘤冻融抗原刺激诱导获得的DC与LAK细胞按1:20比例共培养2 d,获得Ag-DC-LAK细胞作效应细胞,分别用Ag-Dc-LAK、DC-LAK、Ag-LAK和LAK对肺癌细胞系A549细胞进行杀伤实验.结果:以30μg/mL蛋白的肿瘤抗原负载的DC其表型CD1a、CD80、CD86、HLA-DR均显著升高(P<0.05),高于单纯细胞因子诱导成熟的DCs表型,由其刺激增殖的LAK细胞对肺癌细胞A549杀伤率为(71±5)%,明显高于对照组(P<0.05).结论:经肿瘤抗原刺激诱导成熟的DC可有效传递抗原,增加T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用.     

内吗啡肽-1对人树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响

目的观察内吗啡肽-1(EM-1)对人外周血来源树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响。方法从人外周血中提取和分离单核细胞,在含重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的完全培养基中培养,6 d后未成熟树突状细胞(im DC)分4组,空白对照组(BLA组)、EM-1组、LPS组、LPS+EM-1组。继续培养2 d后,流式细胞术检测各组DC表面TLR2、TLR4蛋白的表达;RT-PCR法检测各组DC中TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达。结果流式结果显示,TLR2、TLR 4在im DC表达较高,随着DC成熟表达下降。与BLA组相比,EM-1组DC表面TLR2、TLR4的表达下调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+EM-1组DC表面TLR2、TLR4受体均明显下调(P<0.01)。RT-PCR的结果显示,与BLA组相比,EM-1干预后引起DC表面TLR2 mRNA表达明显降低(P<0.01),TLR4 mRNA的变化无差异(P>0.05);与LPS组相比,LPS+EM-1组DC表面TLR2 mRNA、TLR4mRNA均有所下调(P<0.05)。结论 EM-1使DC表面TLR2、TLR4的表达下调,EM-1对DC免疫功能的影响可能与DC表面TLR2、TLR4表达有关。     

树突状细胞对肿瘤细胞株的直接杀伤活性

目的 对比分析干扰素－γ（Interferon-γ,IFN-γ)或脂多糖（lipoplysaccharide,LPS)刺激后的树突状细胞（dendritic cell,DC)对肿瘤细胞杀伤活性的差异。方法 分离健康供者外周血单核细胞，用粒单细胞集落刺激因子和白介素－4诱导为DC。于培养液中加入LPS或IFN－γ培养12h，作为LPS激活的DC（LPS－DC）及IFN－γ激活的DC（IFN－DC）。用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的改变，以明确LPS或IFN－γ对DC的不同刺激作用；同时，以恶性血液病细胞株HL－60 Jurkat及Daudi为靶细胞，用不同效靶比与DC共同培养18h，采用^51Cr释放试验检测LPS－DC及IFN－DC抗肿瘤活性的差异。结果 ①LPS及IFN－γ可不同程度的上调DC表面CD86、CD80、CD83及CD1a的表达，以LPS刺激组明显。②IFN－γ和LPS可分别增强DC对HL60及Daudi的杀伤活性，在效靶比为20：1及10：1时杀伤率与未加刺激因子对照组（medium-DC)相比差异有显著意义（P＜0．05）。相反，IFN－γ－DC对Daudi、LPS－DC对HL－60无明显杀伤活性，但两者对Jurkat均具杀伤作用。结论 LPS及IFN－γ激活的DC对肿瘤细胞的杀伤活性具有相对肿瘤特异性。     

人树突状细胞融合肝癌细胞体外诱导特异性抗肿瘤免疫

目的 探讨人树突状细胞(DC)融合肝癌细胞(HCC)体外诱导T淋巴细胞产生特异性抗肝癌免疫的作用.方法 应用人重组粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白细胞介素4(rhIL-4)对人外周血单个核细胞进行体外诱导产生树突状细胞,流式细胞仪检测DC表面标志物表达水平,聚乙二醇融合DC与肝癌细胞HerG2,MTT法测定融合细胞(HerG2/DC)刺激T淋巴细胞增生、分化能力,细胞毒性实验检测HerG2/DC诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对HerG2的特异性杀伤作用.结果 融合细胞HerG2/DC刺激T淋巴细胞增值能力明显提高,HerG2/DC活化的CTL对HerG2具有明显的特异性杀伤作用.结论 人树突状细胞融合肝癌细胞可有效诱导T淋巴细胞产生特异性的抗肝癌肿瘤免疫.     

人树突状细胞融合肝癌细胞体外诱导特异性抗肿瘤免疫

目的探讨人树突状细胞（DC）融合肝癌细胞（HCC）体外诱导T淋巴细胞产生特异性抗肝癌免疫的作用。方法应用人重组粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）和重组人白细胞介素4（rhIL-4）对人外周血单个核细胞进行体外诱导产生树突状细胞,流式细胞仪检测DC表面标志物表达水平,聚乙二醇融合DC与肝癌细胞HerG2,MTT法测定融合细胞（HerG2／DC）刺激T淋巴细胞增生、分化能力,细胞毒性实验检测HerG2／DC诱导的细胞毒T淋巴细胞（CTL）对HerG2的特异性杀伤作用。结果融合细胞HerG2／DC刺激T淋巴细胞增值能力明显提高,HerG2／DC活化的CTL对HerG2具有明显的特异性杀伤作用。结论人树突状细胞融合肝癌细胞可有效诱导T淋巴细胞产生特异性的抗肝癌肿瘤免疫。     

Immune tolerance induced by adoptive transfer of dendritic cells in an insulin-dependent diabetes mellitus murine model

AIM: To investigate the effect and underlying mechanisms of immune-tolerance induced by the adoptive transfer of bone marrow (BM)-derived dendritic cells (DC) in insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) mice. METHODS: The IDDM model was established by a low dose of streptozotocin (STZ) in Balb/c mice. Two DC subpopulations were generated from the BM cells with granulocyte-macrophage colony-stimulating factor with or without interleukin-4. The purity and the T cell stimulatory capability of DC were identified. These cells were used to modulate autoimmune response in pre-diabetic mice. Blood glucose was examined weekly; pancreas tissues were taken for histopathological analysis, and CD4(+) T cells were isolated to detect lymphocyte proliferation by MTT assay and the ratio of CD4(+)CD25(+) T cells by fluorescence-activated cell sorting (FACS). The cytokine secretion was determined by ELISA analysis. RESULTS: Two DC subsets were generated from BM, which have phenotypes of mature DC (mDC) and immature DC (iDC), respectively. The level of blood glucose decreased significantly by transferring iDC (P< 0.01) rather than mDC. Less lymphocyte infiltration was observed in the islets, and pancreatic structure was intact. In vitro, proliferation of lymphocytes decreased and the proportion of CD4(+)CD25(+) T cells increased remarkably, compared with the mDC-treated groups (P< 0.05), which were associated with increased level of the Th2 cytokine and reduced level of the Th1 cytokine after iDC transfer. CONCLUSION: Our data showed that iDC transfer was able to confer protection to mice from STZ-induced IDDM. The immune-tolerance to IDDM may be associated with promoting the production of CD4(+)CD25(+) T cells and inducing regulatory Th2 responses in vivo.     

卡巴胆碱对严重脓毒症患者细胞免疫功能的影响

摘要 目的研究卡巴胆碱对严重脓毒症患者CD＋14单核细胞人类白细胞抗原DR（HLA DR）的影响及临床意义。方法严重脓毒症患者100例,分为治疗组60例,对照组40例。治疗组在常规治疗基础上给予卡巴胆碱肌内注射,每次0.2 mg·kg－1,持续7 d,对照组常规治疗的同时给予安慰药。观察治疗前后CD＋14单核细胞HLA DR和T细胞亚群CD＋4、CD＋8百分率的变化。结果卡巴胆碱治疗后CD＋14单核细胞HLA DR及CD＋4、CD＋8细胞明显上升,分别为（36.30±13.14）%,（40.81±12.09）%,（31.14±3.63）%（均P＜0.05）。结论卡巴胆碱可以调节机体炎症反应状态,有助于改善严重脓毒症患者的免疫功能。     

β-蜕皮甾酮对高糖诱导的大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的探讨β-蜕皮甾酮对高糖诱导的大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响及分子机制。方法将大鼠成骨细胞随机分为空白组(5.5 mmol·L-1葡萄糖)、模型组(25 mmol·L-1葡萄糖)、低、中、高剂量实验组(1,5,25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)、p38 MAPK激活组(10μmol·L-1 anisomycin+25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)、阴性对照组(与anisomycin等量的PBS+25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法检测Run相关基因2(RunX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)蛋白表达。结果空白组、模型组、低、中、高剂量实验组、阴性对照组、p38 MAPK激活组大鼠成骨细胞活性分别为(102.41±5.34)%,(68.57±5.25)%,(75.36±7.06)%,(79.13±8.24)%,(83.20±8.89)%,(83.17±8.93)%,(71.11±6.16)%;细胞凋亡率分别为(4.23±0.56)%,(18.57±1.96)%,(13.08±1.34)%,(10.30±0.95)%,(8.25±1.08)%,(8.36±1.12)%,(16.48±1.56)%;RunX2蛋白表达水平分别为0.81±0.07,0.31±0.04,0.45±0.06,0.55±0.04,0.61±0.08,0.63±0.07,0.41±0.05;ALP蛋白表达水平分别为0.75±0.08,0.38±0.05,0.49±0.07,0.59±0.05,0.65±0.08,0.68±0.07,0.44±0.06;OCN蛋白表达水平分别为0.69±0.05,0.28±0.03,0.34±0.05,0.47±0.04,0.45±0.05,0.46±0.05,0.31±0.04;p-p38 MAPK蛋白表达水平分别为0.22±0.04,0.84±0.09,0.59±0.06,0.41±0.04,0.32±0.04,0.32±0.07,0.74±0.07;模型组与空白组相比,低、中、高剂量实验组与模型组相比,p38 MAPK激活组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论β-蜕皮甾酮可能通过抑制p38 MAPK信号通路促进大鼠成骨细胞增殖、分化,抑制细胞凋亡。     

肝炎肝硬化患者淋巴细胞亚群及HLA-DR抗原的表达及临床意义

目的 探讨肝炎肝硬化患者淋巴细胞亚群及抗原HLA-DR表达的临床意义.方法 肝炎肝硬化患者66例分为脾未切除38例(A1组)和脾切除28例(A2组),以慢性乙型肝炎46例(B组)和健康者22例(C组)为对照.用流式细胞术检测外周血淋巴细胞各亚群及HLA-DR抗原.结果 A2组外周血CD3~+、CD4~+及CD8~+T细胞分别为(41.59±6.79)%、(22.64±6.87)%和(19.16±7.28)%,显著低于B组和C组(P<0.01);CD19~+B细胞为(27.63±9.15)%,显著高于B组(P<0.05)和C组(P<0.01);HLA-DR抗原在CD3~+、CD4~+及CD8~+T细胞上的表达为(25.42±5.51)%、(22.36±4.90)%和(28.53±8.35)%,显著低于B组(P<0.05或P<0.01).结论 肝炎肝硬化患者存在明显的细胞及体液免疫功能紊乱,主要表现为CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞数量减少和细胞活性下降,以肝硬化脾切除患者尤为明显.     

2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英对BRL-3A细胞增殖、凋亡及胰岛素样生长因子2表达的影响

目的探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对大鼠肝BRL-3A细胞增殖、凋亡以及胰岛素样生长因子2(IGF2)表达的影响。方法培养BRL-3A细胞,TCDD 5,10,15和20 nmol.L-1作用24 h,MTT法检测细胞存活。BRL-3A细胞紫外线照射2 min或经无血清培养后,加入TCDD 10 nmol.L-1,流式细胞计数方法检测细胞凋亡。荧光定量PCR方法检测TCDD 10 nmol.L-1对BRL-3A细胞Igf2 mRNA表达的影响,Western印迹法检测IGF2蛋白表达。结果 TCDD 5,10,15和20 nmol.L-1作用24 h,BRL-3A细胞的存活率分别为(107.3±0.9)%,(122.6±1.2)%,(115.2±0.4)%和(112.3±1.1)%,明显高于正常对照组(P<0.05),TCDD 10 nmol.L-1对BRL-3A细胞增殖促进作用最强。紫外线照射2 min的溶剂对照组BRL-3A细胞的凋亡率为(26.4±5.0)%,加入TCDD 10 nmol.L-1细胞凋亡率明显降低为(12.2±3.2)%(P<0.05);无血清培养的溶剂对照组72和120 h BRL-3A细胞的凋亡率分别为(49.6±7.6)%和(51.6±9.1)%,加入TCDD 10 nmol.L-1组的细胞凋亡率显著降低,分别为(22.0±5.1)%和(31.0±5.5)%(P<0.05)。与溶剂对照组相比,TCDD 10 nmol.L-1组Igf2基因的表达随作用时间逐渐增高,TCDD作用24 h细胞Igf2 mRNA的表达增加了1.67倍,蛋白的表达增加了2.6倍(P<0.05)。结论 TCDD具有刺激BRL-3A细胞增殖和抑制该细胞凋亡的作用;TCDD可能通过上调BRL-3A细胞中IGF2的表达,调节细胞的增殖和凋亡。     

rhIL-12联合HBsAg刺激健康人外周血单核细胞对IL-12R的影响

目的确认重组人白细胞介素12(rhIL-12)联合乙型肝炎表面抗原(HBsAg)可增强健康人外周血单核细胞(PBMC)产生特异性细胞免疫应答,并分析其细胞来源,及对IL-12R的影响,探讨hIL-12联合HBsAg作为治疗型乙型肝炎疫苗的应用前景。方法 8名健康人PBMC分别与rhIL-12(1 ng/mL)、rHBsAg(500 ng/mL)和rhIL-12(1ng/mL)+rHBsAg(500 ng/mL)体外孵育,采用流式细胞术检测CD4+IFN-γ(γ-干扰素)+T细胞、CD8+IFN-γ+T细胞及CD56+IFN-γ+NK细胞百分比,并测定表达IL-12Rβ1、IL-12Rβ2的细胞百分比。结果 rhIL-12与rHBsAg联合组CD8+IFN-γ+T细胞及CD56+IFN-γ+NK细胞百分比均较对照组明显升高,且有非常显著差异(P<0.01),联合组CD8+IL-12Rβ1和CD56+IL-12Rβ1与单用rhIL-12或rHBsAg组比较均显著升高。结论提示rhIL-12联合rHBsAg诱生的IFN-γ主要来自CD56+NK细胞、CD8+T细胞,其次是CD4+T细胞;rhIL-12和rHBsAg单独均能上调健康人PBMCs表面IL-12R的表达,rhIL-12与rHBsAg联合具有增强作用。     

丹参多酚酸盐治疗心绞痛患者的临床研究

目的观察丹参多酚酸盐对心绞痛患者血脂、E选择素及炎性因子的影响。方法将我院心内科收治的106例心绞痛患者,随机分为试验组53例和对照组53例。对照组给予常规治疗;试验组在对照组基础上给予丹参多酚酸盐,每次250 mL,每天1次,静脉滴注。2组均治疗4周。比较2组患者的血脂、炎性指标、可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)、E-选择素、P-选择素、血小板聚集率及药物不良反应发生情况。结果治疗后,试验组患者5μmol·L-1腺苷二磷酸(ADP)诱导剂血小板聚集率、30μmol·L-1肾上腺素(EP)诱导剂血小板聚集率、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、sCD40L、E-选择素及P-选择素水平为(50.11±14.06)%,(27.14±16.51)%,(271.38±42.15)ng·L^-1,(390.58±104.47)μg·L^-1,(7.41±1.58)mg·L^-1,(3.75±1.03)mmol·L^-1,(1.85±0.61)mmol·L^-1,(3.24±0.82)mmol·L^-1,(1.75±0.64)mmol·L^-1,(8.27±2.41)μg·L^-1,(43.51±13.08)μg·L^-1,(223.74±39.17)μg·L^-1。对照组的上述指标分别为(63.28±10.17)%,(34.06±18.15)%,(310.75±59.37)ng·L^-1,(500.16±117.35)μg·L^-1,(9.12±2.76)mg·L^-1,(4.78±1.11)mmol·L^-1,(2.54±0.79)mmol·L^-1,(4.15±0.91)mmol·L^-1,(1.33±0.75)mmol·L^-1,(10.06±3.22)μg·L^-1,(53.34±14.58)μg·L^-1,(246.25±42.51)μg·L^-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组药物不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹参多酚酸盐治疗心绞痛,可以有效降低患者炎性反应,并起到抗凝降脂的作用。