七芪地黄丸对糖尿病肾病大鼠的保护作用及机制研究

目的:研究七芪地黄丸对糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)大鼠的保护作用及可能的作用机制。方法:DN大鼠模型制作成功后,随机分为正常组、模型组、七芪地黄丸(4.68和9.36 g生药/kg)组和厄贝沙坦0.039 g/kg组;治疗组各组大鼠分别给予相应的药物。给药8周后,进行体重、进食量、饮水量、24h尿量、尿蛋白和尿糖检测,取血进行Glu、TC、TG、LDL、HDL、BUN、Scr、ROS、T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1和IL-4、IL-10含量分析,取肾脏进行肾脏组织形态学分析,Western blot法检测肾脏组织中PI3K/Akt/GSK3β和线粒体凋亡通路相关蛋白表达。结果:七芪地黄丸(4.68和9.36 g生药/kg)对DN大鼠肾功能具有显著的改善作用,可明显改善DN大鼠一般症状,显著降低尿糖、尿蛋白水平和肾脏质量指数;明显降低血清中Glu、TC、TG、LDL、BUN、Scr、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β1含量,升高HDL、IL-4、IL-10含量和T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px活性;上调肾脏组织中p-PI3K、p-Akt、p-GSK3β和Bcl-2蛋白表达及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-GSK3β/GSK3β和Bcl-2/Bax比值,下调Bax、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3蛋白表达,抑制肾小管上皮细胞空泡样病变、间质纤维化和炎性浸润。结论:七芪地黄丸对DN具有显著保护作用,其作用机制可能与激活PI3K/Akt/GSK3β信号通路来减轻肾脏的炎症和氧化应激损伤、抑制肾小管上皮细胞凋亡有关。     

活血化瘀中药汤剂对糖尿病肾病大鼠模型肾间质纤维化的影响

目的观察活血化瘀中药汤剂对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾间质纤维化的影响,探讨其可能的作用机制。方法选用健康雄性SD大鼠30只,采用高糖高脂饲料喂养、一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病SD大鼠模型,然后平分为DN模型组、活血化瘀组和厄贝沙坦组各10只,活血化瘀组选择活血化瘀中药汤剂灌胃服药,厄贝沙坦组选择厄贝沙坦溶液灌胃服药,模型组灌服等体积0.9%氯化钠注射液,记录三组肾间质纤维化相关指标的变化情况。结果所有大鼠都造模成功,活血化瘀组与厄贝沙坦组大鼠的肾质量都明显低于DN模型组(P0.05)。实验后活血化瘀组与厄贝沙坦组组大鼠BUN、Scr较DN模型组明显降低(P0.05)。实验后DN模型组、活血化瘀组和厄贝沙坦组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER)值分别为(16.32±4.29)mg/24 h、(11.50±2.59)mg/24 h和(12.20±3.01)mg/24 h,活血化瘀组和厄贝沙坦组较DN模型组明显降低(P0.05)。TGF-β1主要在肾间质区、肾小管部位及小动脉中表达;FN主要表达在肾小球、细胞外基质和肾小管部位。Western蛋白印迹检测显示活血化瘀组和厄贝沙坦组的FN和TGF-β1蛋白表达水平明显低于DN模型组大鼠(P0.05)。结论活血化瘀中药汤剂能够降低DN大鼠的肾脏肥大,提高肾功能,改善肾组织病变,通过抑制肾组织TGF-βl与FN的表达,延缓肾间质纤维化。     

当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:研究当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad信号通路的调控作用,探讨其对DN大鼠的作用及产生该作用可能的机制。方法:采用一次性大剂量(60 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DN大鼠模型。将DN大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及当归-红芪超滤膜提取物低、中、高剂量组,之后开始灌胃给药,每天1次,8周后测空腹血糖(FBG),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),24 h尿蛋白;光镜观察肾组织结构变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量;免疫组化法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平明显升高,ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量明显升高,肾组织病理结构异常较为明显,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,当归-红芪超滤膜提取物各组均不同程度降低了DN大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平(P0.05);ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量降低(P0.05),肾组织病理结构异常得到改善,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达减少(P0.05,P0.01),TGF-β_1,Smad2/3 mRNA表达减少(P0.05,P0.01)。结论:当归-红芪超滤膜提取物可改善DN大鼠肾功能病变,延缓DN慢性病理进展,其机制可能与其抑制TGF-β_1/Smad信号通路有关。     

黑地黄丸通过调控IGF-1表达对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的抑制作用

目的 探讨黑地黄丸对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的影响及其作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为空白组(正常饲养)和造模组,造模组大鼠采用5/6肾切除手术构建CRF大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、黑地黄丸组(10.43 g/kg)及黑地黄丸+IGF-1R阻断剂(JB1)组(连续7 d皮下注射18μg/kg JB1后灌胃10.43 g/kg黑地黄丸)。给药8周后,检测大鼠血清Scr、BUN水平,HE和Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织TGF-β、HIF-1α、α-SMA蛋白表达,Western blot法检测肾组织IGF-1R、TGF-β蛋白表达,RT-qPCR法检测肾组织IGF-1R、TGF-β mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组血清Scr、BUN水平升高(P<0.05),肾组织纤维化程度加重,纤维化面积增加(P<0.05),肾组织TGF-β、HIF-1α、α-SMA蛋白表达和TGF-β mRNA表达升高(P<0.05),IGF-1R mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,黑地黄丸组大鼠血清Scr、BUN水平降低...     

消渴平合剂对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠TGF-β_1/Smad7信号转导通路的影响研究

目的:观察消渴平合剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠TGF-β1/Smad7信号转导通路的影响,探讨其对DN的防治作用及机制。方法:复制DN大鼠模型,随机分为正常组10只,模型组10只、厄贝沙坦组10只和消渴平合剂组10只。12周时处死大鼠,观察各组大鼠24 h尿蛋白变化情况,检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO),大鼠肾组织行HE染色,免疫组化检测肾组织TGF-β1及Smad7蛋白。结果:消渴平合剂可以改善DN大鼠的一般状况,明显降低24 h尿蛋白定量(P0.01),减轻肾组织病理性损害。与模型组比较,消渴平合剂组BUN、Scr、TG含量显著降低(P0.01),NO含量明显升高(P0.01);肾组织TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.01),Smad7蛋白表达显著升高(P0.01)。结论:消渴平合剂可用于治疗糖尿病肾病,其机制可能与抑制DN大鼠肾脏TGF-β1/Smad7信号转导通路的激活有关。     

芪蛭真武汤改善单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及其机制

目的:探讨芪蛭真武汤对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响,及对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/Smads和氧化应激反应的作用。方法:将30只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、芪蛭真武汤高剂量组、芪蛭真武汤低剂量组、厄贝沙坦组(n=6)。模型组及各治疗组行左侧输尿管结扎,假手术组不结扎输尿管,仅分离输尿管后关闭腹腔。术后1 d开始灌胃给药,假手术组、模型组予无菌蒸馏水10 mL·kg~(-1),芪蛭真武汤高剂量组予芪蛭真武汤22.2 g·kg~(-1),低剂量组予芪蛭真武汤11.1 g·kg~(-1),厄贝沙坦组予厄贝沙坦片0.02 g·kg~(-1)。各组大鼠分别于术后14 d取材,取材前收集24 h尿液,检测24 h尿蛋白定量(24 h-Upr);收集血清用以检测肌酐(SCr),尿素氮(BUN);取结扎侧肾组织行苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色,光镜下观察其病理改变;免疫组化法(IHC)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和纤维连接蛋白(FN)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TGF-β_1,Smad3,p-Smad3,非吞噬细胞氧化酶Ⅳ(NOX4)的表达。结果:与假手术组比较,模型组SCr,BUN,胶原容积分数(CVF),24 h-Upr均增高(P0.05,P0.01),模型组α-SMA,Col-Ⅰ,FN,TGF-β_1,p-Smad3,NOX4蛋白的表达均较高(P0.05);与模型组比较,芪蛭真武汤高剂量组和厄贝沙坦组的SCr,BUN,CVF,芪蛭真武汤高剂量组的24 h-Upr均较低(P0.05);各中药治疗组α-SMA,Col-Ⅰ,FN,TGF-β_1,Smad3,p-Smad3,NOX4的表达均较少(P0.05)。结论:芪蛭真武汤能够减少UUO大鼠的尿蛋白,保护肾脏功能,抑制肾间质纤维化的发生、发展;其机制可能与抑制TGF-β_1/Smads信号通路和氧化应激反应有关。     

振腹手法对抑郁症大鼠模型的干预机制研究

目的：探讨振腹手法对抑郁症大鼠模型骨骼肌组织炎症损伤的干预作用。方法：将32只大鼠随机抽取8只作为正常组,其余大鼠进行3周的慢性不可预见性温和应激方法(CUMS)造模并随机分为模型组、振腹组和氟西汀组,干预4周,在第7周末完成行为学检测,取大鼠骨骼肌组织样本分别检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活物-1α(PCG-1α)、核因子κB(NF-κB)的蛋白及信使核糖核酸(mRNA)含量。结果：第7周末,与模型组大鼠比较,振腹组大鼠的糖水偏好率、绝望时间、总移动距离、穿格次数均显著改善(P<0.01)。第7周末,与模型组大鼠比较,振腹组大鼠的IL-4、IL-10显著升高(P<0.01),IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量显著降低(P<0.01);核因子κB蛋白含量下降(P<0.05),mRNA含量显著下降(P<0.01);SIRT1蛋白含量、mRNA含量显著升高(P<0.01);PGC-1α蛋白含量...     

解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾脏PKC和TGF-β1的影响

目的：观察中药复方解聚复肾宁（JJFSN）对糖尿病（DM）大鼠肾脏PKC和TGF-β1的影响及肾保护作用。方法：建立STZ诱导的糖尿病SD大鼠模型,将成模糖尿病大鼠随机分成模型组、解聚复肾宁组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦加解聚复肾宁组,同时设正常对照组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12周。常规方法检测各组大鼠肾指数、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率（UAER）,免疫组化法检测肾PKC表达,Westernblot检测肾组织TGF-β1的表达。结果：模型组大鼠肾皮质PKC和TGF-β1表达显著升高,血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾指数显著增高。解聚复肾宁组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦加解聚复肾宁组上述指标显著低于模型组（P〈0．05）,厄贝沙坦加解聚复肾宁组各项指标改善明显优于模型组、解聚复肾宁组和厄贝沙坦组（P〈0．05）但未达到正常对照组水平。结论：解聚复肾宁对DN大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制可能与减少肾组织中PKC和TGF-β1的表达有关。     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨加味升降散对膜性肾病大鼠肾组织纤维化的影响

目的:观察加味升降散对膜性肾病(MN)大鼠肾组织纤维化的影响,探讨其防治MN及肾纤维化的作用机制。方法:大鼠尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制MN大鼠模型,将造模成功的MN大鼠随机分为模型组、加味升降散组(27.3 g·kg^-1)和贝那普利组(10 mg·kg^-1),分别给予相应剂量药物灌胃,1次/d,连续干预4周。给药结束后,采用马松(Masson)染色,碘酸六胺银(PASM)染色,免疫荧光和透射电镜(TEM)等方法观察大鼠肾脏病理学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和免疫组化分别检测大鼠肾组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),核转录因子-κB(NF-κB),Toll样受体4(TLR4),纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1),转化生长因子-β(1TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMΑ)和Ⅳ型胶原(CollagenⅣ)mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾组织纤维化明显,血清中IL-1β,IL-6,TNF-α含量明显升高(P<0.05),肾组织中MCP-1,ICAM-1,NF-κB,TLR4,PAI-1,TGF-β1,α-SMA和CollagenⅣmRNA及蛋白表达量均明显升高(P<0.05);与模型组比较,加味升降散和贝那普利可明显改善大鼠肾脏纤维化,明显降低MN大鼠血清中IL-1β,IL-6,TNF-α含量(P<0.05),明显下调肾组织中MCP-1,ICAM-1,NF-κB,TLR4,PAI-1,TGF-β1,α-SMA和CollagenⅣmRNA及蛋白表达量(P<0.05)。结论:加味升降散可通过下调TLR4/NF-κB信号通路,减少炎症因子的释放和表达,抑制肾纤维化,减轻MN大鼠肾损伤。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏和AMPK/Nox4信号通路的作用研究

目的探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏的保护作用以及对腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,Nox4)信号通路的干预作用。方法随机选取7只SD大鼠作为对照组,其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养联合ip链脲佐菌素(35 mg/kg)建立DN模型,DN大鼠随机分为模型组、化瘀通络中药(4.41 g/kg)组和厄贝沙坦(13.5 mg/kg)组。给予化瘀通络中药16周后,取尿液检测大鼠24h尿蛋白(urinetotalprotein,UTP)和8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)水平;考察各组大鼠肾组织病理变化;考察各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛水平;采用免疫组化法检测各组大鼠肾组织8-OHdG和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)蛋白表达;采用qRT-PCR法检测肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)m RNA表达;采用Western blotting法检测各组大鼠肾组织TGF-β1、AMPKα、磷酸化AMPKα(p-AMPKα)、Nox4蛋白表达。结果与模型组比较,化瘀通络中药组大鼠尿液24 h UTP和8-OHdG水平明显降低(P0.01);肾脏病理损伤缓解,肾组织细胞外基质(extracellular matrix,ECM)堆积减少,肾组织胶原面积明显降低(P0.01);肾组织SOD活性明显升高(P0.05),肾组织丙二醛水平显著下降(P0.01);肾组织8-OHd G和FN表达减少;肾组织TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P0.05、0.01);肾组织p-AMPK/AMPK蛋白表达水平明显升高(P0.05),Nox4蛋白表达水平明显降低(P0.05)。结论化瘀通络中药能够通过作用于AMPK/Nox4信号通路,从而抑制DN大鼠氧化应激、减少ECM大量堆积、降低UTP排泄、保护肾脏。     

加味溺毒清合剂对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨加味溺毒清合剂治疗单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的机制。方法 SD雄性大鼠50只,除假手术组10只外,其余大鼠建立单侧输尿管结扎模型。造模后大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只。分别采取相应的干预措施。检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)、尿β_2微球蛋白(β_2-MG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)及肾组织中的转化生长因子β_1(TGF-β_1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,并检查肾脏病理。结果 (1)尿β_2-MG含量:各组比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)尿NAG酶含量:14 d、28 d时模型组、中药低剂量组、中药高剂量组与假手术组比较均增高,差异有统计学意义(P0.05);28 d时中药高剂量组与模型组比较明显减低,差异有统计学意义(P0.05)。(3)血Scr水平:15 d时中药高剂量组与模型组、厄贝沙坦组比较降低并差异有统计学意义(P0.05);29 d时,中药高剂量组与模型组比较,血Scr含量降低,差异有统计学意义(P0.05);(4)血BUN水平:中药高剂量组与厄贝沙坦组比较,血BUN含量降低,差异有统计学意义(P0.05)。29 d时,各组血BUN含量差异均无统计学意义(P0.05)。(5)肾组织α-SMA、TGF-β_1表达:与假手术组比较,厄贝沙坦组、中药低剂量组、中药高剂量组、模型组差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,厄贝沙坦组、中药低剂量组、中药高剂量组差异均有统计学意义(P0.05)。结论加味溺毒清合剂能够降低尿NAG酶,同时通过抑制肾组织中α-SMA及TGF-β_1表达,从而减轻肾间质纤维化的程度。     

复肾降纤宁对糖尿病肾病大鼠的影响及机制研究

目的观察复肾降纤宁对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏蛋白激酶C(PKC)、血管内皮生长因子(VEGF)和血小板衍生生长因子-β(PDGF-β)的影响及对肾脏的保护作用。方法建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠模型,将成模糖尿病大鼠随机分成4组:模型组、复肾降纤宁组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦 复肾降纤宁组,同时取正常大鼠设对照组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12周。常规方法检测各组大鼠肾脏指数、血糖、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测肾PKC和VEGF表达,Western blotting检测肾组织PDGF-β的表达,透射电镜观察肾脏超微结构。结果模型组大鼠肾皮质PKC、VEGF和PDGF-β表达显著升高,肾脏超微结构改变明显,血糖、UAER、BUN、Scr、肾脏指数显著增高;复肾降纤宁组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦 复肾降纤宁组上述指标显著低于模型组(P<0.05),肾脏超微结构改变明显改善;厄贝沙坦 复肾降纤宁组各项指标改善明显优于模型组、复肾降纤宁组和厄贝沙坦组(P<0.05),但未达到对照组水平。结论复肾降纤宁对DN大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制可能与减少肾组织中PKC、VEGF和PDGF-β的表达,减轻肾组织纤维化有关。     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠氧自由基代谢的影响

目的:观察肾康丸对糖尿病肾病(DN)大鼠氧自由基(OFR)代谢的影响,探讨其治疗DN的机制。方法:应用链脲佐菌素建立大鼠DN模型,将DN模型大鼠随机分为4组:DN模型对照组、肾康丸组、厄贝沙坦组、肾康丸和厄贝沙坦合用组;另设正常对照组。各组分别干预8 w后,观察肾组织中丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)活性的变化,RT-PCR法检测肾组织GSH-Px、CAT、Cu,Zn-SOD mRNA的表达。结果:应用肾康丸、厄贝沙坦干预后,DN大鼠肾组织中MDA含量显著减少,GSH-Px、CAT、Cu,Zn-SOD活性显著增加,GSH-Px与Cu,Zn-SOD mRNA表达水平均显著降低,CAT mRNA表达水平变化无显著性差异,肾康丸和厄贝沙坦合用组效果更为显著。结论:肾康丸对DN的肾保护作用与减少OFR的生成、抑制氧化应激有关,且与血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦合用具有协同作用。     

红芪多糖联合厄贝沙坦对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

目的:探讨红芪多糖单用或联合厄贝沙坦对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的影响。方法:采用高脂高糖饲料加单次腹腔注射链脲佐菌素[30 mg/kg(体质量)]制备2型糖尿病大鼠模型。将Wistar大鼠50只随机分为正常对照组(NC组)10只和造模组40只,将造模成功的36只大鼠随机分为糖尿病组(DM组)、红芪多糖组(HPS组)、厄贝沙坦组(IRB组)及红芪多糖联合厄贝沙坦组(HPS+IRB组)各9只。HPS组每日予红芪多糖150 mg/kg灌胃,IRB组每日予厄贝沙坦30 mg/kg灌胃,HPS+IRB组每日予红芪多糖150 mg/kg加厄贝沙坦30 mg/kg灌胃,NC组和DM组予等量生理盐水灌胃,干预8周。检测各组大鼠空腹血糖,计算心重指数(H/B),实时荧光定量PCR法测定心肌局部转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及Smad7 m RNA水平,免疫组化法测定TGF-β1、Smad3及Smad7蛋白水平,透射电镜下观察大鼠心肌超微结构,Masson染色法测定心肌胶原含量。结果:1)与NC组比较,其余4组大鼠心肌胶原含量增多,间质纤维化明显,H/B、TGF-β1、Smad3表达均升高,Smad7表达降低(P0.01);与DM组相比,HPS组、IRB组及HPS+IRB组大鼠心肌纤维化减轻,H/B、TGF-β1、Smad3表达下降,Smad7表达升高(P0.05),HPS+IRB组上述变化更显著。2)心肌病理改变:与NC组相比,DM组大鼠心肌胶原纤维增多,排列紊乱,线粒体肿胀;而HPS组、IRB组及HPS+IRB组上述改变减轻,HPS+IRB组上述改变减轻较HPS组和IRB组更明显。结论:红芪多糖及厄贝沙坦能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路延缓2型糖尿病大鼠心肌纤维化的发生和发展,两药联合效果优于两药单用。     

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的:探讨肾安提取液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组(厄贝沙坦10mg.kg-1.d-1)、肾安低、中、高剂量组(肾安提取液2.272、4.544、9.088mg.kg-1.d-1),另设正常对照组,疗程4周。检测TGF-β1 mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白(Western blot分析法)、纤连蛋白(FN)及Smad7蛋白(免疫化学法)表达;透射电镜观察超微结构;并检测血糖、24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数。结果:肾安各组及厄贝沙坦组TGF-β1 mRNA及蛋白表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏FN及Smad7的表达较模型组明显减少(P<0.05,P<0.01);肾脏超微结构改善,肾小球基底膜增厚被明显抑制(P<0.05,P<0.01);24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数均较模型组明显改善(P<0.01);肾安高剂量组及厄贝沙坦组间上述指标无统计学意义;模型组及各药物干预组间血糖差异无统计学意义。结论:肾安提取液可能通过抑制TGF-β1的表达,减轻ECM积聚;并抑制TGF-β1/Smad7信号转导,减少足细胞凋亡,从而对DM肾损害起保护作用。     

保元排毒丸对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1、Smad3、Smad7表达的影响

目的观察保元排毒丸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠TGF-β1、Smad3、Smad7表达的影响。方法 48只大鼠随机分为假手术组,UUO组,厄贝沙坦组,保元排毒丸低、中、高剂量组,每组8只。假手术组和UUO组大鼠灌胃生理盐水,其他组大鼠灌胃相应药物14 d。末次灌胃24 h后,Masson染色观察肾组织病理变化,Western blot、RTPCR分别检测TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白、mRNA表达。结果与UUO组比较,保元排毒丸各剂量组和厄贝沙坦组肾纤维化程度明显减轻(P0.01),TGF-β1、Smad3表达明显降低(P0.05),Smad7表达明显升高(P0.05)。结论保元排毒丸可通过下调TGF-β1、Smad3表达,上调Smad7表达来延缓UUO大鼠肾纤维化。     

糖肾宝对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机制研究

目的探讨糖肾宝对DN模型大鼠肾损伤的保护作用及其作用机制。方法将SPF级雄性SD大鼠36只按随机数字表法分为正常组6只、造模大鼠30只, 采用单次大剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法制备DN大鼠模型。将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组、厄贝沙坦组及糖肾宝低、中、高剂量组, 每组6只。药物干预8周。记录各组大鼠一般情况及体重, 检测大鼠血糖、肾脏指数、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、SCr、BUN水平, 采用PAS染色、透射电镜观察肾组织病理形态;采用实时荧光定量PCR、Western blot检测肾组织E26转录因子-1(Ets-1)、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果与模型组比较, 糖肾宝低、中、高剂量组及厄贝沙坦组体重均升高(P<0.01), 肾脏指数降低(P<0.05或P<0.01), 24 hUTP、BUN、SCr均明显降低(P<0.05或P<0.01), 肾小球体积明显缩小(P<0.05或P<0.01), 肾组织Ets-1[(1.59±0.06)、(1.47±0.04)、(1.31±0.03)...     

消渴平合剂对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾功能及血清TNF-α和IL-6的影响研究

目的:观察消渴平合剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠肾功能及血清TNF-α和IL-6的影响,探讨其对DN的防治作用及机制。方法:复制DN大鼠模型,随机分为正常组,模型组、厄贝沙坦组和消渴平合剂高、中、低剂量组。12周时处死大鼠,观察各组大鼠24 h尿蛋白变化情况,检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG),血清中TNF-α和IL-6的水平。结果:消渴平合剂可以改善DN大鼠的一般状况,与模型组比较,消渴平合剂高、中剂量组24h尿蛋白定量、BUN、Scr、TG含量显著降低(P0.01),高剂量组与厄贝沙坦组无显著差异(P0.05);消渴平合剂高、中剂量组及厄贝沙坦组血清TNF-α和IL-6含量均较模型组下调(P0.01),消渴平合剂高剂量组与厄贝沙坦组比较无显著性差异(P0.05)。结论:消渴平合剂可用于治疗糖尿病肾病,其机制可能与抑制DN大鼠肾脏TNF-α和IL-6的激活有关。     

降糖三黄片对早期糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1/Smad1信号通路的影响

目的:观察降糖三黄片对早期糖尿病肾病大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad1、Co1-Ⅳ的影响,探讨其对肾脏的保护作用。方法:将80只SD大鼠随机分为正常组11只、造模组69只。腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病肾病大鼠模型。造模成功的大鼠随机进一步分为模型组、厄贝沙坦组(给药量0.027 g·kg-1·d-1)、降糖三黄片组(给药量0.675 g·kg-1·d-1),给药8周后处死。于治疗前、模后4周、8周各组大鼠测血糖、称体重;造模成功后、实验结束前收集24 h尿液测定尿微量白蛋白。实验结束后摘取肾脏,去包膜称重;分别用免疫组化染色法及荧光定量RT-PCR法检测smad1、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ);用双抗体夹心法(ELASA)检测肾组织TGF-β1。结果:造模后各组大鼠体重明显减轻,降糖三黄片、厄贝沙坦与模型组比较,肾重/体重指数下降(P0.01)。降糖三黄片、厄贝沙坦与模型组比较尿微量白蛋白水平下降(P0.05)。降糖三黄片与模型组、厄贝沙坦组相比,能较好地降低血糖(P0.01);降糖三黄片、厄贝沙坦均能明显抑制糖尿病肾病大鼠肾组织中TGF-β1的表达(P0.01)。免疫组化染色表明厄贝沙坦组和降糖三黄片组比模型组smad1、Col-Ⅳ阳性表达程度显著减弱。免疫组化图像染色指数及荧光定量RT-PCR法结果提示降糖三黄片能降低smad1、Col-Ⅳ水平(P0.05),且与厄贝沙坦作用相近。结论:降糖三黄片可通过抑制肾组织TGF-β1/smad1通路的表达,降低Col-Ⅳ的沉积,使肾脏的异常结构得到改善,延缓肾小球硬化。     

芪丹方对5/6肾切除所致慢性肾衰竭大鼠的保护作用及机制北大核心CSCD

目的研究芪丹方对5/6肾切除所致慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏的保护作用及机制。方法 50只SD大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,卡托普利组(5 mg·kg-1),芪丹方高、低剂量组(12.34,6.17 g·kg-1),每组10只。采用5/6肾切除法制备CRF大鼠模型。考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量;HE染色观察大鼠肾脏组织病理学改变;流式细胞小球微阵列术(CBA)检测血清炎症因子白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-2(IL-2)的含量;免疫组化法检测肾脏组织CD68的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白及血清BUN、Scr、IL-1α、IL-2含量显著升高(P<0.05,P<0.01),肾组织CD68阳性表达显著增加(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠的24 h尿蛋白,血清Scr、IL-1α、IL-2含量,及肾组织CD68阳性表达均显著降低(P<0.05,P<0.01),芪丹方高剂量组的血清BUN显著降低(P<0.05)。结论芪丹方能有效改善CRF大鼠肾功能,减轻肾脏病理改变,其作用机制可能与通过减少肾脏巨噬细胞的浸润,下调IL-1α、IL-2等细胞因子表达相关。