多重链接探针扩增技术在染色体非整倍体畸变诊断中的应用

目的 探讨多重连接探针扩增(multiplexligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在13、18、21、X、Y染色体非整倍体畸变诊断中的应用价值.方法 收集本院经染色体核型分析确诊包括有上述5种染色体数目异常及正常的样本共44份,其中外周血30份、胎儿脐带血10份、羊水4份,提取标本DNA,采用MLPA技术对样本染色体数目进行分析,并与染色体核型分析结果进行比对.结果 42例样本检测结果与染色体核型分析结果一致,1例染色体核型分析未能作出判断的标记染色体片段被识别为Y染色体片段,1例21-三体嵌合体未能做出明确判断,临床检出率97.7%(43/44).结论 MLPA技术通过单管反应同时检测40多个不同靶基因序列的拷贝数,具有高通量、特异、便捷及成本较低等特点,可应用于常见染色体非整倍体畸变的临床诊断和产前诊断.

Abstract：

Objective To investigate the application value of the multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) technique in diagnosis and prenatal diagnosis of chromosomes 13, 18, 21, X and Yaneuploidy. Methods Forty-four cases including 30 peripheral blood samples, 10 fetal cord blood samples,and 4 amniotic fluid samples were collected in this study. DNA was isolated from the samples and detected by MLPA, followed by analyzing in ABI310 Genetic Analyzer. Analysis of copy number changes for chromosomes 13, 18, 21, X and Y was carried out with RH-MLPA-analysis software. The routine karyotype analyses were also done for all the samples. Results Of 44 samples, the results of 42 by MLPA method was consistent with that by chromosome karyotyping. Only one case with trisomy 21 chimerism was failed to reach conclusion. In addition, one case of mark chromosome segment was identified as Ychromosome segment by MLPA, while karyotyping failed to make judgment. The accurate rate of MLPA was 97. 7% (43/44). Conclusion The MLPA technique can simultaneously detect dozens of different target sequences and their copy number changes in a single reaction. It showed high specificity, good reproducibility, was fast and high-throughput. The MLPA technique can be applied to diagnosis and prenatal diagnosis of the common chromosomal aneuploidy.     

深圳地区2004-2006年儿童腹泻病病原体分布情况

目的 探讨深圳地区2004-2006年儿童腹泻病病原体分布情况.方法 收集深圳地区2004年1月-2005年4月腹泻病患儿粪便标本,采用ELISA法检测轮状病毒(RV),2005年5月-2006年12月采用胶体金法检测RV.真菌性腹泻以40倍高倍镜下同时可见菌丝和孢子为实验诊断标准.阿米巴性腹泻以见溶组织内活动性阿米巴原虫(滋养体或包囊)为实验诊断标准.细菌性腹泻(菌痢)以40倍高倍镜下WBC( )以上,同时可见RBC为实验诊断标准.不确定性腹泻为排除以上4种腹泻外的腹泻.结果 RV腹泻主要发生在10月至次年2月,但夏季6-7月也有一个小高峰,共占40.49%;真菌性腹泻无明显季节性,占3.59%;细菌性腹泻明显在每年的6-9月高发,占39.67%;阿米巴性腹泻仅检测到10例,除1例是春末检测出来外,余皆在夏季检出,占0.03%;不确定性腹泻主要发生在12月至次年的3月,占16.24%.腹泻最高发年龄为＞1～2岁,占24.83%(8 287/33 382例),≤6个月组为最低发年龄组,占6.65%(2 217/33 382例).结论 婴幼儿腹泻种类出现明显的感染交叉性、季节交叉性的特点,具有一定的复杂多样性.加强饮食与环境卫生,切断传播途径,提高儿童主动免疫水平是预防急性腹泻的重要环节.     

活血健脾法在肝硬变腹水治疗中的应用

肝硬变腹水属本虚标实证,肝脾虚弱为本,瘀、痰、湿、水为标,久病及肾,活血健脾化瘀法为治疗的关键。《肝硬化腹水中医诊疗专家共识意见》将肝硬变腹水分为气滞水停证、脾虚水停证、湿热水停证、血瘀水停证、脾肾阳虚水停证、肝肾阴虚水停证。治疗方法主要有:内服汤剂治疗和外治疗法(针灸推拿、穴位贴敷、灌肠、脐疗等)。目前,活血健脾法治疗肝硬变腹水药物机制及疗效指标的研究不规范,药物制剂的制作,特别是外敷药物的使用也不规范,另外,尚缺乏大样本、多中心的研究报道,今后仍需进一步深入研究。     

湛江市儿童乙肝疫苗免疫效果及持久性分析

目的 探讨乙肝疫苗对儿童的免疫效果及持久时间。方法 对湛江市12间幼儿园1996年出生的全程接种乙肝疫苗的儿童，从3岁起监测抗-HBs，一直监测到6岁。结果 全程接种乙肝疫苗的儿童抗-HBs阳性率较高，随着儿童年龄的增长。抗-HBs阳性率也随着下降，从3岁时的96．5％下降到6岁时的61．4％。结论 全程接种乙肝疫苗的儿童抗-HBs阳性率会随着儿童年龄的增长而下降；从3岁时开始，每年检测一次抗-HBs，抗-HBs水平低于保护性以下时，应按3针法加强接种。     

雷火灸配合温针治疗产后子宫复旧不良30例疗效观察

目的:观察雷火灸配合温针治疗产后子宫复旧不良的临床疗效。方法:将60例产后子宫复旧不良患者随机分为2组,治疗组30例采用雷火灸配合温针治疗,对照组30例采用缩宫素治疗。结果:总有效率治疗组为93.33%,对照组为73.33%,2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:雷火灸配合温针治疗产后子宫复旧不良有较好的临床疗效。     

多囊卵巢综合征患者红外热成像特征及中医体质相关性研究

目的:探究阳江地区多囊卵巢综合征(PCOS)患者的红外热成像特征及与中医体质的相关性.方法:通过采集我院中医妇科调理门诊符合纳入标准的PCOS患者的舌脉四诊信息,填写中医体质量表得出体质测评结果,再进行红外热图采集,最后由专业的中医师对病例信息进行分析,通过3种评价方式结合最后判定患者的体质类型及红外热图分布特点.结果...     

中药复方壮肝逐瘀煎对肝纤维化模型大鼠微循环的影响

目的利用中药复方本身具有的多途径、多环节、多靶点的特点,探讨壮肝逐瘀煎及其不同拆方组合对肝纤维化模型大鼠微循环的调控。方法采用四氯化碳(CCl4)复合因素大鼠肝纤维化模型,观察各组大鼠肝纤维化情况;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中血管活性物质[内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;用RT-PCR技术检测各组VEGF、PDGF的含量;应用超声微泡造影评估各组大鼠肝脏微循环、微血管血流状态和速度。结果①C组及不同组合分组和G组均能不同程度改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织、减轻大鼠肝纤维化的程度,与G组相比,有统计学意义;②与正常对照组相比,病理模型组中各给药组对ET-1、NO、iNOS含量均有明显的影响(P<0.01或P<0.05),肝纤维化程度越高,ET-1、NO、iNOS的含量越高;VEGF、PDGF的含量也越高;各用药组HVAT、HA-HVTT均有不同程度的延长(P<0.01)。③与病理模型组比较,各用药组血清ET-1、NO、iNOS含量均有不同程度的降低(P<0.05),其中C组(壮肝逐瘀煎全方组)下降最为明显;各用药组VEGF、PDGF的表达量均下降(P<0.05),而C组与G组(大黄?虫丸组)比较(P>0.05),无明显差异;各用药组HVAT、HA-HVTT均有不同程度的延长(P<0.01),其中以C组明显。     

基于《伤寒瘟疫条辨》三焦传变理论探讨麻杏甘石汤加味治疗新型冠状病毒肺炎

2019年末流行的新型冠状病毒肺炎以其极强的致病性在全国范围内流行,然而目前尚缺乏特效药物和疫苗。为了挖掘优秀的中医抗疫理论,对杨栗山《伤寒瘟疫条辨》中的三焦传变理论进行研究,发现他提出“杂气”自口鼻而入,首先注入中焦,然后分布上、下焦。他提出治疗原则重在逐秽,上焦如雾,升而逐之,兼以解毒;中焦如沤,疏而逐之,兼以解毒;下焦如渎,决而逐之,兼以解毒。在这一理论指导下,对我院确诊病例进行分析,发现以“杂气”弥漫中、上焦为主,使用麻杏石甘汤加味辛凉透表,解毒逐秽治疗效果好。     

介入性产前诊断2877例分析

目的探讨介入性产前诊断在预防出生缺陷中的作用及其安全性、有效性。方法回顾2009年9月至2010年11月在本院进行产前诊断的2877例病例。并对所有病例进行电话随访至分娩后。结果检出胎儿重型α-地中海贫血及重型β-地中海贫血共42例,中间型α-地中海贫血17例,胎儿染色体异常86例。130个胎儿引产终止妊娠。术后2周内胎儿丢失率：羊膜腔穿刺为0.33%,脐带穿刺为0.26%。结论介入性产前诊断是安全、有效的诊断胎儿严重出生缺陷的重要方法。     

α-地中海贫血的产前诊断

α-地中海贫血(a-thalassemia,称α-地贫)是一种遗传性溶血性疾病,是世界上最常见的单基因遗传病之一。该病发生于地中海沿岸国家以及东南亚各国的广大地区,世界上至少有1.5亿人携带了地贫基因[1]。我国南方是本病的高发地区,以广西、广东最为高发,广西α-地贫携带率达