A nutraceutical extract from Inula viscosa leaves: UHPLC-HR-MS/MS based polyphenol profile,and antioxidant and cytotoxic activities

Nowadays, advanced extraction techniques and highly sensitive metabolic profiling methods are effectively employed to get new information on plant chemical constituents. Among them wild medicinal plants or their parts, with large and ancient use in folk medicine, are investigated for their potential functional use and cultivation. In this context, Inula viscosa leaves engaged our attention. A simple experimental design, based on Soxhlet extraction and chromatographic fractionation, allowed us to obtain the investigated polyphenol fraction (IvE). UHPLC-HRMS analyses revealed shikimoyl depsides of caffeic acid and unusual dihydrobenzofuran lignans as main secondary metabolites. These compounds, together with cinchonain-type phenols, and hydroxycinnamoyl flavonol glycosides, are reported for the first time in inula. Overall, forty-three secondary metabolites were identified. The extract exerted a remarkable antiradical activity towards DPPH^? and ABTS^+?. Furthermore, it was able to inhibit cell viability and mitochondrial redox activity of neuroblastoma, hepatoblastoma and colon carcinoma cells, whereas it did not affect cell density of HaCaT cells immortalized human keratinocytes. As detected by the oxidant-sensing probe 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate, the inhibitory responses seemed to be related to IvE-induced increase of intracellular reactive oxygen species (ROS). The obtained results highlighted that inula leaves, nowadays even undervalued and unexplored, could be considered a renewable source of nutraceutical compounds.     

大鼠脑组织单胺类递质及其代谢产物的检测方法研究

目的 :研究大鼠脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相反相离子对色谱测定法。方法 :采用LiChrosorbC18,10 μm色谱柱 ,流动相为甲醇 :水 (4 0 :60 ) ,含 0 .0 2 8g LEDTANa2 ,0 .15g LSDS ,0 .2ml LH2 SO4(pH 2 .5～ 3 ) ,荧光检测波长 :λEX=2 85 ,λEM=3 3 3。结果 :对 87只大鼠脑组织中 4种单胺类递质及其代谢产物的含量进行了同时测定 ,高香草酸 (HVA) 2 .5 0～ 40 .0 μg ml、去甲肾上腺素 (NE) 0 .0 1～ 0 .5 0 μg ml、多巴胺 (DA)0 .0 5～ 1.0 0 μg ml、5 羟色胺 (5 HT) 0 .0 2 5～ 0 .5 0 μg ml,峰面积与其含量呈良好的线性关系。 结论 :该法操作简便、快速、准确 ,为组织中单胺类递质及其代谢产物检测的一种理想方法 ,并适用于临床相关研究。     

川芎挥发油化学成分研究

采取闪蒸气相毛细管色谱法和气相毛细管色谱—质谱法研究了宁夏六盘山区产川芎的挥发油化学成分,色谱分离出50多个峰,质谱鉴定了24个成分,主要是川芎酜内酯(46.37％)、丁基酞内酯(13.87％)、新蛇床内酯(6.98％)和丁烯基酜酯(4.8％)。红外光谱图中有较强的内酯特征吸收峰,为质谱所鉴定的以上主要成分提供了佐证。将闪蒸气相色谱法与蒸气蒸馏提取气相色谱法进行对照,二者的色谱图基本相符,前者是分析天然产物挥发性成分更加简便、迅速的微量方法。     

气相色谱用于肠通透性监测的研究

作者采用国产气相色谱及９２０２微机数据处理系统，对临床患者和实验动物肠通透性改变进行监测。该方法以甘露醇（Ｍ）和乳果糖（Ｌ）为探针，用气相色谱检测尿中糖分泌率及Ｌ／Ｍ比值。结果显示，测定标准品Ｍ和Ｌ随进样量增加而呈线性改变，与国外学者报道一致。比较不同浓度进口与国产乳果糖，证明二者在研究肠通透性方面高度相关（ｒ＝０．９９）。检测急性胰腺炎并发感染动物的尿标本，发现乳果糖大量排出，Ｌ／Ｍ值明显增加。作者认为，气相色谱为一行之有效的方法用于肠通透性监测，有助于临床上对内源性感染及脓毒症的早期诊断。     

正常血钾型周期性麻痹SCN4A基因新突变的检测

目的　报道正常血钾型周期性麻痹 (normoPP)一家系的临床特点 ,并筛查SCN4A基因以期发现有义突变。方法　提取知情同意的患者及部分家属外周血基因组DNA ,应用变性高效液相色谱分析 (DHPLC)技术筛查患者SCN4A基因全部 2 4个外显子 ,对发现异常者进行测序分析。结果先证者常规实验室检查未见异常 ,发作期肌酸激酶 (CK) 112 6U/L(正常值 <2 0 0U/L) ,肌电图正常。发作间期行肌肉活检未见显著异常。基因研究发现先证者及其父亲 (患者 )SCN4A基因发生同一新突变G2 10 1A ,并引起氨基酸序列改变Arg6 75Gln。该突变不同于目前发现的明确导致高钾型周期性麻痹(hyperPP)的突变 ,也不同于已知的SCN4A基因所有突变。结论　normoPP患者存在一新突变Arg6 75Gln ,该突变可能与疾病相关。     

血液灌流对硫线磷和硫酸阿托品的吸附作用

目的 定量研究血液灌流对有机磷农药硫线磷和其解毒药阿托品的吸附作用.方法 模拟临床血液灌流装置,对含硫线磷和硫酸阿托品的血样进行灌流吸附,分别用毛细管气相色谱法和高效液相色谱法测定硫线磷和硫酸阿托品的残留量.结果 吸附剂用量为0.5、1.0和1.5 g,包膜活性炭在灌流2.0 h后硫线磷的清除率均能达到90%以上,硫酸阿托品的清除率依次为61.9%、84.9%和88.9%;HA230树脂在灌流1.5 h后硫线磷清除率都达到90%以上,硫酸阿托品的清除率也依次高达88.0%、97.2%和98.4%;包膜活性炭灌流3.0h后,硫酸阿托品与硫线磷的比值最高为灌流前的10.1倍,而HA230树脂灌流后,此比值最高为灌流前的6.7倍.结论 包膜活性炭和HA230吸附树脂血液灌流1.5～2.0 h均能清除血中大部分硫线磷,而且均能增加血中硫酸阿托品和硫线磷浓度的比值.     

Analytical studies on illicit heroin

The recovery of heroin in fumes was investigated. In the Netherlands the common mode of heroin smoking is the chasing the dragon procedure: heroin is heated on an aluminium foil by a lighter and the fumes are inhaled. The efficiency of the volatilization of heroin using this procedure was studied under laboratory conditions using thin layer chromatography, gas chromatography and high pressure liquid chromatography. A considerable influence of the form (salt or base) of the heroin was found as well as strong influences of other substances that may be present in illicit heroin samples as diluents. The danger of the inhalation of fumes containing unknown pyrolysis products is mentioned and a hypothesis is given for the phenomenon of heroin-leucoencephalopathy that was observed in heroin smokers in Amsterdam in 1981. The types of heroin encountered in the Netherlands are discussed with regard to their suitability for smoking.     

苯巴比妥诱导对普罗帕酮体外I相代谢的立体选择性影响

目的：观察苯巴比妥对S（ ）-和R（-）-普罗帕酮（PPF）体外I相代谢有无立体选择性的影响。方法：将消旋普罗帕酮与对照或苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体孵育后,采用手性衍生化反相高效液相色谱法,测定对映体的经时孵育曲线和酶动力学参数（最大反应速度、米氏常数、内在消除率）。结果：在对照大鼠肝微粒体中,PPF的I相代谢无立体选择性。经苯巴比妥诱导处理后,在5mg/L底物浓度时R（-）-PPF的代谢快于S（ ）-PPF,两对映体的米氏常数和内在清除率有显著性差异。结论：苯巴比妥选择性地诱导了大鼠肝微粒体对PFF的I相代谢。     

尿中双酚S测定的涡旋辅助液液微萃取-高效液相色谱法

目的建立涡旋辅助液液微萃取-高效液相色谱法测定尿中双酚S的方法。方法以乙腈为分散剂,正辛醇为萃取剂,萃取尿中双酚S。采用单因素轮换实验确定最佳萃取条件,并评估方法学性能指标。结果尿中双酚S在0.0~160 μg/L范围线性相关系数大于0.999,检出限为0.76 μg/L,样品加标回收率为88.06%~103.81%,日内精密度范围为1.78%~2.85%,日间精密度范围为2.65%~4.25%。结论该法准确可靠,灵敏度高,适用于职业接触人群及非职业人群尿中双酚S的测定。     

三七总皂苷和三七剪口高效液相色谱指纹图谱和含量测定方法的建立

 目的 建立三七总皂苷和三七剪口的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱和含量测定方法，为三七总皂苷的质量控制提供有效手段。 方法 采用三七总皂苷对照品作为随行对照, 用岛津 C18（150 mm × 4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-水梯度洗脱，检测波长 203 nm，流速均为 1.0 ml·min^-1，确定构成三七总皂苷指纹的 10 个共有峰。 结果 采用梯度洗脱的方法能使三七总皂苷的 5 种主要成分三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 和 Rd 实现基线分离，并可对这 5 种主要成分进行定量。以人参皂苷 Rgl 为参比峰，所测定的 10 批三七总皂苷样品的相似度均 ≥ 0.995. 结论 所建立的 HPLC 指纹图谱和测定方法以三七总皂苷对照品作为随行对照，可避免由于仪器、试剂和人员的不同所产生的误差，并且简化了实验操作，可作为三七总皂苷的质量控制手段。