经鼻给予抗ICAM-1抗体对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨经鼻腔给予抗细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体(单抗)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组及脑缺血再灌注+经鼻给予高、中、低剂量抗ICAM-1单抗干预组.采用插线法制作局灶脑缺血再灌注模型.各干预组于缺血1 h经鼻给予抗ICAM-1单抗,再灌24 h后取脑行冠状切片.采用TTC、HE及免疫组化染色法测定脑梗死体积及免疫组化阳性区占总面积比.结果 缺血再灌注组脑标本均可见缺血侧的脑膜充血,脑组织肿胀;单纯脑缺血再灌注组及低、中、高抗ICAM-1单抗干预组脑梗死体积(以像素值表示)分别为57 042±12 483、32 871±4 325、25 932±3 103和15 325±3 356,免疫组化阳性区面积占总面积比分别为(6.64±0.476)%、(5.15±0.987)%、(4.36±0.682)%和(3.42±0.537)%,各组间差异均有统计学意义.结论 (1)脑缺血再灌注可使脑组织ICAM-1表达显著增高;(2)经鼻腔给予抗ICAM-1单抗可有效降低脑组织ICAM-1的表达,缩小脑梗死体积;(3)经鼻腔给予抗ICAM-1单抗的剂量同脑梗死体积呈负相关;(4)脑缺血再灌注时ICAM-1免疫组化阳性区面积比与脑梗死体积呈正相关.     

放射免疫治疗非霍奇金淋巴瘤研究进展

放射免疫治疗（RIT）是非霍奇金淋巴瘤治疗的一种新方法，将单克隆抗体与放射性同位素结合，注入人体内与肿瘤细胞特异性结合，以实现对瘤体的内照射治疗。RIT是在分子靶向治疗的基础上发展起来的，因其具有放射性同位素的作用，故能补充分子靶向治疗的不足。近年来RIT的研究取得了显著进展，主要被应用于治疗复发、难治性、低度恶性、滤泡性、转化型B细胞淋巴瘤。     

bevacizumab治疗乳腺癌的基础和临床研究

分子靶向药物bevacizumab是针对血管内皮生长因子(VEGF)的重组人源化单克隆抗体,在多种恶性肿瘤的治疗中显示了临床效果。现就bevacizumab的作用机制及其在乳腺癌治疗中的临床研究进展作一综述。     

单克隆IgH基因重排检测在B-NHL诊断和随访中的意义

目的　评价单克隆IgH基因重排检测在恶性淋巴瘤 (B NHL)临床中的应用价值。方法　用半巢式PCR检测单克隆IgH基因重排。病例组为B NHL ,包括 6 9例石蜡包埋组织切片、治疗前 16例骨髓和 2 9例外周血、阳性者治疗后复查骨髓和外周血 ;对照组为 10例慢性淋巴结炎、3例T NHL和 2例HD。结果　对照组均阴性。病例组 :切片中单克隆IgH基因重排阳性率为 6 3.8% (44 / 6 9) ;骨髓和外周血阳性率分别为 43 .8%(7/ 16 )和 41.4% (12 / 2 9) ,细胞形态学检查未见异常细胞者阳性率分别为 33 .3% (3/ 9)和 31.3% (5 / 16 )。 16例同时采集骨髓和外周血者 ,阳性率分别为 43 .8% (7/ 16 )和 37.5 % (6 / 16 ) ,两者无统计学差异。治疗前单克隆IgH重排阳性者 ,6例完全缓解 (CR)后转阴 ,处于持续缓解状态 ,1例临床缓解后 13个月仍阳性 ,现在继续随访中 ,另 1例CR后持续阳性者 ,6个月后复发。结论　切片、骨髓和外周血中检测单克隆IgH基因重排可以作为B NHL诊断和随访微小残留病灶的辅助手段     

杂交瘤细胞株功能性与非功能性Vk基因结构分析

本研究利用逆转录ＰＣＲ技术和家族特异性引物，先后从９株分泌不同特异性单抗杂交瘤细胞株中扩增出轻，重链可变区基因，并经克隆和序列测定。其中利用轻链引物从分泌抗转铁蛋白受体单抗的杂交瘤细胞株中扩增出了无功能的ＶＫ序列。经分析和ＧｅｎＢａｎｋ数据库比较，该序列虽与ＢＡＬＢ／ｃＶＫ２１－Ｅ细胞株分泌的抗体轻链有９８％同源性，但是在Ｖ／Ｊ连接区内有４个碱基对缺失，导致后续阅读框架移位，因而出现终止密码子而致     

抗莱氏支原体单克隆抗体的研制

通过细胞融合技术，筛选出ＭＡＬ－１和ＭＡＬ－２两株抗莱氏支原体（Ａ．Ｌａｉｄｌａｗｉｉ，Ａ．Ｌ）单克隆抗体（单抗）。通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法测得单抗相对应的抗原分子量均为６７．４６ｋｕ。用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）检测，单抗与细胞培养中另外３种常见污染的支原体和呼吸道肺炎支原体无交叉反应。将单抗用于检测支原体污染的细胞培养物，结果表明，此单抗能特异性地检出莱氏支原体。故可用其推断支原体污染途径，便于制定防治措施。     

99Tcm标记人源化抗人血小板膜糖蛋白Ⅲ a单克隆抗体SZ21F(ab)2血栓栓塞显像

目的用动物血栓栓塞模型显像评估99^Tc^m标记人源化抗人血小板膜糖蛋白（GP）Ⅲa单克隆抗体（简称单抗）F（ab）2片段SZ21F（ab）2的应用价值。方法通过体外抑制二磷酸腺苷（ADP）诱导的犬血小板聚集实验，评估SZ21F（ab）2与血小板结合的亲和性和特异性。以2-亚氨基噻吩盐酸盐（IT）法修饰SZ21F（ab）2分子的亚氨基，以99^Tc^m-葡庚糖酸钠（GH）转换络合法进行标记。分别用快速薄层层析（ITLC）法和ELISA测定标记物的放化纯及生物活性。对3条肺动脉血栓和8条（包括上述3条）后肢深静脉血栓栓塞比格犬模型进行显像研究。结果SZ21F（ab）2抑制ADP诱导的犬富含血小板血浆（PRP）聚集实验的半数有效剂量（IC50）为（2．49±1．88）μg／ml。ITLC法测得标记物的放化纯为90％～95％，ELISA测定结果表明标记后抗体保留了免疫活性。注射显像剂后1h，肺动脉血栓部位和后肢深静脉血栓部位均出现放射性浓聚。注射后3h，在体显像肺动脉血栓和后肢深静脉血栓栓塞模型的放射性靶／本底（T／B）比值分别为3．03±1．18和3．51±0.62。肺动脉血栓部位和后肢深静脉血栓部位的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）分别为0．083％ID／g和0．076％ID／g。体外检测结果表明：肺动脉血栓与正常肺组织的单位质量放射性比值平均为12．8，后肢深静脉血栓与血液的单位质量放射性比值平均为5．2，与肌肉的比值平均为127.0。结论99^Tc^m-SZ21F（ab）2与人血小板具有较高的亲和力，有潜在的血栓显像应用前景。     

188Re-BAC5联合PYM-BAC5导向治疗鼻咽癌的体外实验研究

目的 在前人工作的基础上,分别设计了内放疗和化疗靶向治疗药物--鼻咽癌单克隆抗体188Re标记物[188Re-鼻咽癌单克隆抗体(BAC5)]和BAC5与平阳霉素(PYM)的耦联物(PYM-BAC5),观察了两药联合使用对体外培养的鼻咽癌细胞(CNE2)的抑制作用.方法 直接法标记188Re-BAC5.以SnCl2、2-巯基乙醇(2-ME)和柠檬酸-酒石酸作还原剂和耦联剂,葡聚糖T-40被氧化成多醛基葡聚糖(PAD)用以耦联PYM和BAC5.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测2种抗肿瘤药物对体外培养CNE2的抑制作用,并以188ReO4-、188Re-mIgG和PYM为对照组,生理盐水为空白对照组.结果 188Re-BAC5标记率为92%～95%,放射性浓度为5254 kBq/ml;PYM-BAC5中m(PYM):m(BAC5)=1:0.526,n(PYM):n(BAC5)=1:51.2种药单独治疗组、联合治疗组及各自对照组的抑制效应都呈明显的剂量-效应关系.但188Re-BAC5对CNE2的抑制作用随放射性浓度的增加而增加,半数抑制浓度(IC50)为264 kBq/ml,抑制作用明显强于188ReO4-(IC50=882 kBq/ml)和188Re-mIgG(IC50=1062 kBq/ml)组.PYM-BAC5的IC50为10.07 μg/ml,而单纯PYM的IC50为63.60 μg/ml;联合用药中188Re-BAC5的IC50为32.1 kBq/ml,PYM-BAC5的IC50为1.70 μg/ml,分别明显小于2种药单用时各自的IC50,以上各组差异均有统计学意义(t=22.62和37.70,P＜0.01).结论 靶向治疗组(188Re-BAC5)抑瘤效果明显好于非靶向组;联合靶向治疗组(188Re-BAC5 +PYM-BAC5)的抑瘤效果明显好于单独用药组.     

40例形态学和免疫学分型不一致的急性白血病分析

选用一组国产敏感特异的McAb,采用APAAP桥联免疫酶标组化染色技术对40例形态学和免疫学分型不一致的急性白血病进行了分析。结果表明,32例形态学难以分类或虽能分类但与免疫学分型不同的急性白血病均有明确的细胞系列特异性标记表达。其中B-ALL14例、T-ALL1例、ANLL2例、同时表达T和B系相关分化抗原的双标-ALL 11例、HAL4例,同时表达淋巴和髓系相关的特异性标记。有8例未测到任何标记抗原,归属于急性未分化型白血病。     

内毒素核心糖脂单克隆抗体的血清学反应性及保护作用的初步研究

以S.minnesota R595菌为免疫原,通过细胞融合获得8株分泌抗核心糖脂单抗的杂交瘤细胞系。对其中的两株代表性单抗2D6E7和3H4 2F7的血清学反应性以及在小鼠Hb/Mu腹腔感染模型中的保护作用进行了初步研究。菌体吸收试验和间接免疫荧光试验(ⅡF)表明,单抗能与多种革兰氏阴性杆菌(GNB)产生交叉反应,并且光滑型GNB的煮沸菌体荧光染色呈阳性,活菌染色呈阴性。保护性试验结果表明,3H4 2F7单抗能显著提高S.minnesota(野生菌株),鼠伤寒杆菌和E.Coli等光滑型GNB攻击的小鼠存活率(P<0.05),显示出抗核心糖脂单抗的良好交叉保护作用。若攻击前、后2h或攻击同时输入单抗3H4 2F7,对光滑型GNB的感染均有明显保护效果(P<0.05);2D6 E7单抗未表现有保护活性。