TLR4/MyD88信号通路介导卵巢癌紫杉醇耐药机制的研究进展

卵巢癌(epithelial ovarian cancer)是病死率最高的妇科恶性肿瘤.目前,手术加以紫杉醇为基础的联合化疗仍然是卵巢癌的主要治疗方法,但化疗耐药制约着卵巢癌患者的长期生存,而紫杉醇耐药是卵巢癌复发的主要原因之一[1-2].     

细胞毒效应的DNA荧光测定法测定恶性肿瘤患者外周血NK细胞活性

本文根据溴化乙锭(EB)可特异地与双链DNA嵌合产生荧光反应的特性,建立了细胞毒效应的DNA荧光测定法。本法的主要特点是通过测定效应细胞和靶细胞作用后残留靶细胞DNA的荧光强度和对照靶细胞的DNA荧光强度,分析效应细胞对靶细胞的杀伤效应。研究结果表明,人外周血淋巴细胞与人红白血病K562靶细胞按不同的效靶比例共同培养20小时后,未损伤的残留靶细胞DNA的荧光强度和对照靶细胞DNA的荧光强度的比值与效应细胞的杀伤效应呈负相关性。本文检测了34例正常人和30例恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞的NK细胞活性,其平均值分别为51.96±6.62%和25.02±10.83%两者之间有非常显著的差异(P<0.01),表明用DNA荧光测定法检测NK细胞对K562靶细胞的杀伤活性具有较高的敏感性。     

Podoplanin在食管鳞状细胞癌患者中的表达及临床预后:回顾性队列研究

目的分析Podoplanin蛋白在食管鳞状细胞癌(鳞癌)患者中的表达情况,探寻其与食管鳞癌患者脉管内出现瘤栓、淋巴结转移、肿瘤分化及预后之间的关系,为减少食管鳞癌患者肿瘤复发,延长无病生存时间及总生存时间提供临床证据。方法回顾性分析2010年6月至2012年6月我院胸外科经胃镜确诊为食管鳞癌并接受手术治疗、完成随访70例患者的临床资料,其中男39例、女31例,平均年龄63.6岁。脉管瘤栓阳性35例,脉管瘤栓阴性35例。查看术后病理标本,并切取纳入该研究患者的正常食管组织(即距肿瘤边缘5 cm的食管组织)作为对照。结果 Podoplanin在正常食管组织中阳性表达率为34.2%,在肿瘤组织中阳性表达率为62.8%;在脉管瘤栓阳性和阴性的食管鳞癌患者中阳性表达率分别为77.1%、48.6%;在淋巴结转移阳性和阴性的食管鳞癌患者肿瘤细胞内阳性表达率分别为71.9%、23.1%,差异均有统计学意义(P0.05)。肿瘤细胞内Podoplanin表达阴性的食管鳞癌患者平均无病生存期15.2个月,明显长于肿瘤细胞内Podoplanin表达阳性的食管鳞癌患者(P0.05)。结论临床上可将Podoplanin在肿瘤细胞、脉管内的阳性表达作为判断食管鳞癌患者预后的重要参考指标。     

氯喹对食管癌细胞系放射增敏的实验研究

目的 探讨氯喹对食管癌TE-1细胞系的放射增敏作用及其主要机制.方法 采用MTT法检测不同浓度氯喹对TE-1细胞的生长抑制作用.分别用单纯照射或照射前联合氯喹、照射后联合氯喹作用于TE-1细胞,作用6 h后用Western blot测定自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达,用Lyso-Tracker Red DND-99/Hochest 33258进行荧光染色,并用荧光显微镜观察细胞内酸性囊泡(AVOs)的变化.克隆形成实验分析细胞增殖的改变,拟合剂量-生存曲线并计算放射增敏参数.结果 氯喹对TE-1细胞的生长抑制作用呈浓度依赖性.辐射显著诱导TE-1细胞LC3和Beclin1的表达,并促进LC3-Ⅰ转换为LC3-Ⅱ.与单纯照射及照射前加药相比,照射后加药显著降低TE-1细胞内AVOs的荧光强度(F=16.44, P<0.05)和克隆形成率,照射前加药和照射后加药的SER_D0分别为1.037和1.439(t=8.30, P<0.05).结论 氯喹能增加食管鳞癌TE-1细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制自噬作用相关.     

氯喹靶向溶酶体增加非小细胞肺癌A549细胞对紫杉醇的敏感性

目的:探讨靶向溶酶体药物氯喹对非小细胞肺癌A549细胞对紫杉醇的化疗敏感性的影响.方法:以紫杉醇及氯喹作用于A549细胞,Lyso-Tracker Red DND-99进行细胞内溶酶体染色,采用荧光显微镜观察细胞内溶酶体变化,应用MTT比色法比较药物对A549细胞的生长抑制作用.结果:在紫杉醇作用的A549细胞浆内可观...     

放射线联合人血管内皮生长抑素对HNE1鼻咽癌移植瘤生长抑制作用

目的研究放射线联合重组人血管内皮生长抑素(Endostatin)对HNE1鼻咽癌移植瘤生长、转移的抑制作用.方法应用裸鼠建立HNE1移植瘤模型;待瘤体平均体积达627mm3±47mm3,40只裸鼠随机分成治疗组单独放疗(RT)组,单用Endostatin组,单次20cy照射后 连续使用Endostatin 14天组,连续使用Endostatin 14天后 单次20Gy照射组和空白对照组;绘制肿瘤生长曲线;取瘤体用免疫组化检测乏氧诱导因子-α(HIF-α)和微血管内皮CD34的表达,观察肿瘤乏氧及其微血管密度的变化.结果与空白对照组比较,照射20GY后 连续Endostatin 14天组,其照射后20天抑瘤率84.79%,而先用Endostatin组 后照射组及单独照射组,单独使用Endostatin(使用完14天以后的第7天)组的抑瘤率分别是83.91%,64.95%,19.47%;其中各放射治疗组的减瘤率分别为44.1%,54.1%和18.1%(P=0.000);使用Endostatin联合放射线及单用Endostatin组,肿瘤新生血管减少,HIF-α表达降低.结论放射线联合Endostatin的策略,其肿瘤控制率优于单用Endostatin或单用放射线,且能明显抑制HNE1鼻咽癌移植瘤生长和转移.照射后使用Endostatin可以在较短的时间获得较好的局部控制率;而先给予Endostatin再照射具有明显的放射增敏作用,可获得较长的再生长延缓时间,但两者的长期疗效无明显统计学差异(P=0.077).提示采用分割照射方案同时加用Endostatin可能会取得更好的临床疗效.     

转染融合基因的DC抗肿瘤免疫效应

 目的 研究转染融合基因（GM-CSF-survivin GM-ΔSur）的树突状细胞（DC）在体外诱导高效而特异的抗肿瘤免疫效应 。方法 用jetPEI^TM-Macrophage转染体系,将构建的GM-ΔSur融合基因转染入DC,用流式细胞仪检测DC的表面分子 HLA-DR、CD83、CD80、CD86表达的高低;用LDH法测定转染融合基因的DC诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）杀伤肿瘤细胞（HT-29和OVCAR-3）的能力。结果 转染融合基因的DC细胞中可检测到GM-ΔSur融合蛋白的表达;DC表面高表达HLA-DR、CD83、CD80、CD86;PHA/rhIL-2长期培养（21d）的T细胞CD8^＋比例明显增加;转染融合基因的DC 对HT-29肿瘤细胞的杀伤率显著高于未修饰的DC的杀伤率。结论 GM-ΔSur基因转染修饰的DC能选择性诱导MHC-I类分子限制的CTL的特异性,显著提高DC的抗原提呈功能和诱导高效而特异的抗肿瘤免疫效应。     

糖皮质激素诱导肿瘤细胞抗凋亡的信号转导通路

糖皮质激素(如地塞米松)对大多数非实体性肿瘤(如淋巴瘤)具有促凋亡和抗增殖的作用而被广泛应用于肿瘤的治疗。另有研究表明,地塞米松联合细胞毒药物治疗实体瘤,可诱导起源于上皮组织的多种恶性肿瘤对化疗药物介导的细胞凋亡产生抵抗而影响疗效。因此,抗肿瘤药物联合糖皮质激素治疗实体肿瘤日渐引起临床工作者的关注。糖皮质激素诱导实体肿瘤细胞抗凋亡的作用与细胞类型有关,其分子机制与功能性糖皮质激素受体介导的细胞信号转导通路相关。现对糖皮质激素诱导肿瘤细胞抗凋亡作用的信号转导通路进行综述。     

对卵巢癌治疗中PARP抑制剂适应证从BRCA突变到HRD、铂敏感变迁的思考

人体细胞中的DNA每天都会遭受大量的内源性和外源性损伤，但这些细胞中的DNA损伤可以通过多种修复机制来保持基因组的保真性。不仅正常细胞可以使用这些修复途径，癌细胞也能在不断增殖的细胞中修复损伤的DNA。人体内DNA损伤修复（DNA damage response，DDR）过程主要有两种机制［1-4］：（1）聚腺苷二磷酸核糖聚合酶［poly（ADP-ribose） polymerase，PARP］参与的DNA单链断裂后的损伤修复。（2）BRCA1/2基因参与的同源重组修复（双链修复）。这两种DNA损伤修复机制保障了遗传物质复制、细胞分裂等过程的顺利进行。两种修复机制中的一种发生修复过程障碍时，另一种机制则可以代偿修复。如果细胞的这两种DNA损伤修复能力都受到抑制，则可能促进细胞的凋亡。随着对DDR的不断了解，PARP尽管主要作用于DNA的单链损伤修复，但也可协同BRCA修复DNA的双链损伤，当BRCA1/2突变失效时，PARP能接管BRCA在DNA修复过程中的作用。基于上述理论，在BRCA基因突变的肿瘤细胞中已经存在同源重组修复缺陷（Homologous Recombination Deficient，HRD），此时再应用PARP抑制剂，就能同时抑制单链断裂的损伤修复，使两种DNA损伤修复途径均出现障碍，进而促进肿瘤细胞的凋亡，发挥更强的抗肿瘤作用，即所谓的“合成致死”作用机制，也即PARP抑制剂杀灭癌细胞的主要机制。