重组人血管内皮抑素间插联合顺铂对H22小鼠腹水瘤抑制作用的研究

目的 观察重组人血管内皮抑制素（恩度）间插联合顺铂腹腔内注射治疗小鼠腹水瘤的疗效和安全性。方法 采用肝细胞癌H22腹水瘤细胞株建立小鼠腹水瘤模型。120只造模后的ICR小鼠随机分为4组：对照组（生理盐水d1～d10）、恩度组（恩度8mg／kg,d1～d5,d7～d10,生理盐水d6）、顺铂组（顺铂004mg／kg,d6,生理盐水d1～d5,d7～d10）及恩度联合顺铂组（恩度8mg／kg,d1～d5,d7～d10;顺铂0.04mg／kg,d6）,每组30只,每只小鼠腹腔注射的药物体积均为0.2ml。记录各组小鼠腹水体积、腹水中肿瘤细胞、红细胞计数以及生存期;观察各组荷瘤小鼠腹膜和腹腔脏器种植转移情况;检测各组小鼠的腹膜渗透性、血常规和肝肾功能;流式细胞仪检测各组小鼠腹腔积液中肿瘤细胞凋亡情况。结果 与对照组相比,恩度组和顺铂组和恩度联合顺铂组均能减少荷瘤小鼠腹腔积液的体积、肿瘤细胞数和红细胞数,延长荷瘤小鼠的生存时间。在上述指标中,恩度联合顺铂组与恩度组和顺铂组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。恩度联合顺铂组小鼠腹腔积液中肿瘤细胞的凋亡率显著高于恩度组和对照组（P＜0.05）,但与顺铂组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;恩度联合顺铂组小鼠的腹膜渗透性明显低于顺铂组和对照组（P＜0.05）,但恩度联合顺铂组与恩度组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。恩度联合顺铂组小鼠的体重增加及腹腔种植转移均少于其他3组。各组小鼠均未出现血常规和肝肾功能明显异常。结论 恩度间插联合顺铂腹腔内应用治疗小鼠H22腹水瘤疗效显著,安全性好。     

肿瘤靶向载体N-正辛基-N′-琥珀酰基壳聚糖的制备和结构表征

目的：对壳聚糖的结构进行修饰，制备N-正辛基-N＇-琥珀酰基壳聚糖。方法：以壳聚糖为原料，通过与正辛醛、丁二酸酐反应，在其2位氨基引入琥珀酰基和正辛基。产物用FTIR、^1H NMR、元素分析对其进行表征。用粉末X-衍射、DSC、TG对其物理性质进行分析，并初步考察了其对K562肿瘤细胞的亲和性。结果：合成了N-正辛基-N＇-琥珀酰基壳聚糖，其结晶程度下降，水溶性增加，与K562肿瘤细胞亲和性较好。结论：N-正辛基-N＇-琥珀酰基壳聚糖可作为新型肿瘤靶向载体.     

枳实对大鼠小肠电活动影响的下丘脑作用机制研究

目的观察枳实对在体大鼠小肠电活动的影响,探讨其作用与下丘脑内脑肠肽胆囊收缩素(CCK)、生长抑素(SS)的相关性。方法采用消化道腔外电极记录法观察枳实组与生理盐水组移行性综合肌电(MMC)周期时程、活动期/周期比例、活动期每分钟快波数的变化；采用免疫组织化学法结合显微图像定量分析扫描系统检测下丘脑背内侧核(DMH)、腹内侧核(VMH)、下丘脑外侧区(LHA)CCK的相对含量,以及下丘脑VMH、LHA、室旁核(PVN)SS的相对含量。结果枳实组与生理盐水组比较MMC周期缩短、活动期/周期比例增大、活动期每分钟快波数增加,差异有显著性；与生理盐水组及空白对照组比较枳实组DMH、VMH、LHA的CCK阳性神经元表达降低；VMH、LHA、PVN的SS阳性神经元表达增高,与生理盐水组及空白对照组比较差异有显著性。结论枳实对大鼠小肠电活动有兴奋作用,这种兴奋作用可能与下丘脑内的CCK、SS有关。     

阿莫西林颗粒治疗小儿感染性疾病1983例

目的:评价阿莫西林颗粒(再林)对小儿感染性疾病的疗效及安全性.方法:采用随机对照开放试验,试验组1 983例,口服阿莫西林颗粒40～80mg·kg-1,tid;对照组693例,口服头孢拉定干混悬剂6.25～12.5mg·kg-1,tid,疗程7～14d.结果:试验组痊愈率和总有效率分别为69.49%和91.88%,优于对照组的35.93%和60.46%(P＜0.05);细菌清除率试验组96.67%,对照组83.33%,2组比较差异有极显著性(P＜0.01);不良反应发生率试验组1.46%,对照组4.91%,差异有极显著性(P＜0.01).结论:阿莫西林颗粒治疗儿科感染性疾病疗效较好,在服药前需详细询问青霉素及其他药物过敏史,首剂应在医护人员密切观察下服药.     

肝癌诱导特异性血管新生实验方案的建立

目的 建立一套用于研究和评价抗肝癌血管新生的实验方案。方法 以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为细胞模型,以正常胎肝细胞系L02为对照,应用荧光定量的Boyden小室、划痕实验检测肝癌条件培养基（HCM）、肝癌细胞系HepG2等诱导作用下对HUVEC迁移的影响;应用荧光定量的粘附实验检测上述诱导作用对HUVEC的粘附作用;应用CFSE／PKH-26 染色流式细胞术检测上述诱导作用对HUVEC增殖的作用;应用小管形成实验、Matrigel 栓实验检测上述诱导作用对HUVEC小管形成行为及对SCID小鼠体内血管新生的影响。结果 体外实验显示,HCM能够比正常条件培养基（NCM）更能诱导HUVEC的趋化和迁移运动,差异有统计学意义（P＜0.05）; HepG2较L02更容易粘附HUVEC细胞,差异有统计学意义（P＜0.05）; HCM较NCM更能促进HUVEC的增殖,与L02相比,HepG2和HUVEC共培养更能促进人脐静脉内皮的增殖,差异有统计学意义（P＜0.05）; HCM和/或HepG2与HUVEC 共培养均有利于HUVEC形成管型,而NCM和/或L02与HUVEC共培养对HUVEC形成管型无明显影响。Matrigel栓实验显示,HepG2较L02更能促进SCID小鼠体内的血管新生。结论 以上一系列改良的体内、外经典实验能够用于抗肝癌血管新生药物的研究和评价。     

氟尿嘧啶缓释植入剂与注射液腹腔给药治疗H22小鼠腹水瘤对照的研究

目的:比较氟尿嘧啶缓释植入剂(中人氟安)和普通氟尿嘧啶注射液(5-FU)两种剂型对H22小鼠腹水瘤模型的抑制作用及其机制。方法:68只H22腹水瘤模型小鼠,随机分为赋形剂对照组、生理盐水对照组、中人氟安组(4mg/只)和5-FU组(4mg/只)。严密观察各组小鼠的一般状态、体质量变化和生存期,计算腹水体积和镜下腹水中每毫升中的肿瘤细胞数,流式细胞仪检测腹水肿瘤细胞凋亡率和S期细胞比例,实时荧光定量RT-PCR(QRT-PCR)和蛋白质印迹法检测腹水肿瘤细胞Bcl-2和bax基因的mRNA和蛋白表达。结果:与两对照组相比,中人氟安组和5-FU组小鼠的一般状态良好,体质量增长缓慢,全身症状出现较晚,生存期延长(14和13dvs 21和19d,P值均<0.01),其中,中人氟安组中位生存期较5-FU组延长,P=0.047。中人氟安组的腹水体积少于5-FU组〔(5.1±0.7)mL vs(7.8±0.9)mL〕,P<0.05;但2组每毫升腹水中的肿瘤细胞数差异无统计学意义〔(7.02±0.98)×108 mL-1 vs(7.86±1.05)×108 mL-1〕;P>0.05。中人氟安组的肿瘤细胞凋亡率和S期比例〔(24.9±5.0)%和(52.19±4.60)%〕均高于5-FU组〔(20.1±4.5)%和(39.25±5.84)%〕,P值均<0.05;同时,前者Bcl-2基因的mRNA与蛋白表达较后者减少(△Ct值为9.57±0.67 vs 7.11±0.35,灰度值为0.22±0.029 vs 0.46±0.480),P值均<0.05;而bax基因的mRNA与蛋白表达较后者增多(△Ct值为2.05±0.21 vs 3.72±0.53,灰度值为0.55±0.026 vs 0.34±0.018),P值均<0.05。结论:同等剂量的中人氟安对于小鼠H22腹水瘤的抑制作用明显强于普通5-FU注射液,其机制可能与前者具有较长的半衰期、明显增加H22腹水瘤细胞凋亡率和S期细胞比例有关。     

内皮抑素和多西环素抑制黑色素瘤血管生成和瘤细胞增殖的研究

目的：研究内皮抑素和多西环素对黑色素瘤细胞的生长增殖及血管生成的影响方法：C57／BL6小鼠57只，进行小鼠B16黑色素瘤动物实验，将小鼠分多西环素组（D）、多西环素加内皮抑素组（DE）、内皮抑素组（E）和空白对照组（C）4组，给予内皮抑素和多西环素处理，取瘤组织进行苏本素-伊红（HE）染色，比较各组坏死率、微血管密度（MVD）的差异进行免疫组织化学染色检测肿瘤组织增殖细胞核抗原（PCNA）的表达结果：三个药物处理组MVD数量均较对照组少且差异有统计学意义（F=10．888，P〈0．05），表明多西环素和内皮抑素抑制肿瘤微血管生成：由于多西环素和内皮抑素减少了肿瘤血供进而抑制瘤细胞增殖、促进其坏死，三个处理组瘤细胞坏死率均较对照组高．其中多西环素加内皮抑素组（DE）与对照组间的差异有统计学意义（F=7．229，P〈0．05），PCNA在各处理组的表达较对照组低，差异均有统计学意义（F=17．729，P〈0．05）．结论：多西环素和内皮抑素联合使用，影响黑色素瘤组织PCNA的表达和微血管生成．明显抑制黑色素瘤细胞的生长增殖。     

自由基清除剂依达拉奉对脓毒性休克家兔的治疗作用

目的：观察依达拉奉(ED)对脓毒性休克家兔血气、血生化指标及动物存活率的影响。方法：动物脓毒性休克后1 h用3个剂量ED(1．6,0．8,0．4 mg·kg~(-1))治疗,测定4个时相点动脉血气及酸碱度,并测血乳酸(L)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)含量。观察24 h时动物存活情况。结果：家兔脓毒性休克4 h后出现代谢性酸中毒合并呼吸性酸中毒,L、LDH、BUN明显升高,SOD活性明显降低,动物死亡率为70％。不同剂量ED治疗后可改善血气、酸碱平衡紊乱,增强SOD和CAT活性,降低LD、MDA浓度及LDH活性。治疗后3个剂量组动物死亡率分别为0,0和33％,明显低于模型组(P<0．05)。结论：ED能增强脓毒性休克机体的抗氧化能力,降低脓毒性休克死亡率。     

氟尿嘧啶缓释剂（中人氟安）大鼠腹腔内植入给药安全性的实验研究

目的　探讨大鼠腹腔内植入氟尿嘧啶缓释剂（中人氟安）的不良反应及其机制。方法　选取５６只健康雄性ＳＤ大鼠,随机分为生理盐水组、赋型剂对照组（Ｌ-聚乳酸）、中人氟安组（２０ｍｇ）和普通氟尿嘧啶（５-ＦＵ）注射液组（２０ｍｇ）,每组１４只。适应性饲养１周后开始实验。给药前、后检测各组大鼠体重、血常规及肝肾功能指标;给药第２１天处死大鼠,观察腹腔脏器的粘连情况,ＨＥ染色光镜观察腹腔脏器、粘连组织的病理学改变。结果　与生理盐水组大鼠的体重增长比较,中人氟安组无明显差异,而５-ＦＵ注射液组大鼠的体重增长缓慢（Ｐ＜０.０５）。给药第７天,中人氟安组大鼠外周血白细胞、中性粒细胞、红细胞和血小板浓度分别为（１１.４６±０.７１）×１０^９／Ｌ、（１.７５±０.１４）×１０^９／Ｌ、（６.４７±０.２８）×１０^１２／Ｌ和（６７０.００±７４.７９）×１０^９／Ｌ,与给药前水平相近;而普通５-ＦＵ注射液组大鼠外周血白细胞、中性粒细胞浓度分别为（８.７３±０.５４）×１０^９／Ｌ和（０.５２±０.１２）×１０^９／Ｌ,均低于给药前水平（Ｐ＜０.０５）。与给药前比较,给药第１４天各组大鼠外周血的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血肌酐和尿素氮均无明显变化。中人氟安组大鼠的腹腔脏器粘连率为５７.１４％,明显高于普通５-ＦＵ注射液组的２１.４３％（Ｐ＜０.０５）;其腹腔脏器间粘连程度亦较普通５-ＦＵ注射液组严重（Ｐ＝０.０４５）。ＨＥ染色光镜下观察中人氟安组大鼠的小肠、结肠和胃组织未见异常,而脾肝包膜、脾胃浆膜和胃肝包膜粘连紧密。结论　中人氟安大鼠腹腔内植入给药的毒性低,较为安全,但易引起大鼠腹腔脏器粘连,其粘连发生机制可能与药物颗粒植入方式及药物载体Ｌ-聚乳酸相关。     

重组人血管内皮抑素对血管新生的影响研究

目的 探讨重组人血管内皮抑素（Endostar,恩度）对血管内皮细胞趋化、迁移、粘附、增殖及小管形成等与血管新生相关生物学行为的影响。方法 以原代培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为细胞模型,通过Boyden小室荧光定量分析、划痕试验、HUVEC荧光定量粘附分析、CFSE染色流式细胞术、CCK-8定量检测、小管形成试验和Matrigel栓试验研究恩度对HUVEC与血管新生相关的生物学行为的影响。结果 恩度在5～50 000ng／ml范围内可抑制血管内皮生长因子诱导HUVEC的迁移运动,且浓度为50ng／ml和500ng／ml时效果最明显;恩度在5～50 000ng／ml间可呈剂量依赖的方式抑制HUVEC向损伤部位的迁移。与0ng／ml相比,50、500和5000ng／ml 恩度处理的HUVEC的粘附率、增殖率及HUVEC形成网状小管结构的数量、面积和长度均降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）; Matrigel栓实验结果显示,恩度在50～5000ng／ml间对SCID小鼠体内血管新生有明显的抑制作用。结论 恩度在细胞水平能抑制HUVEC与血管新生相关的生物学行为,包括HUVEC的趋化、迁移、粘附、增殖和小管形成;在动物水平能抑制SCID小鼠体内的血管新生,据此推断恩度能抑制血管新生。