基于肠道菌群探讨甘草泻心汤对伊立替康致小鼠腹泻的影响

目的 研究甘草泻心汤对化疗相关腹泻小鼠肠道菌群的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组、洛哌丁胺（阳性药,0.4 mg·kg^-1）组和甘草泻心汤高、低剂量（16.4、4.1 g·kg^-1）组;采用连续4 d ip 55 mg·kg^-1伊立替康诱导小鼠化疗相关腹泻模型;记录小鼠首次排便时间、稀便级、稀便率和腹泻指数;采用试剂盒测定小鼠肠道消化酶活力及炎症因子水平;采用高通量测序技术分析结肠内容物肠道菌群变化。结果 与对照组比较,模型组小鼠首次排便时间显著缩短（P<0.01）,稀便级、稀便率和腹泻指数显著升高（P<0.01）;消化酶乳酸脱氢酶（LDH）、淀粉酶（AMS）和脂肪酶（LPS）活力显著降低（P<0.01）;炎症因子白细胞介素1β （IL-1β）、环氧化酶2 （COX-2）、细胞间黏附分子1 （ICAM-1）和肿瘤坏死因子α （TNF-α）水平显著升高（P<0.01）;肠道菌群α多样性Simpson指数显著升高（P<0.05）;肠道菌群β多样性差异较大;变形菌门、梭杆菌门、变形菌纲、梭杆菌纲、肠杆菌目、梭杆菌目、拟杆菌科、丹毒丝菌科、埃格特菌科和拟杆菌属丰度显著升高（P<0.01）,Muribaculaceae和norank_f__Muribaculaceae丰度显著降低（P<0.01）。与模型组比较,甘草泻心汤高、低剂量组小鼠首次排便时间显著延长（P<0.05、0.01）、稀便率和腹泻指数显著降低（P<0.05、0.01）,高剂量组稀便级显著降低（P<0.01）;高、低剂量组各消化酶活力显著回升（P<0.05、0.01）;高、低剂量组各炎症因子水平显著降低（P<0.05、0.01）;高剂量组Simpson指数显著降低（P<0.05）,β多样性更趋近对照组,显著回调各优势物种丰度的显著性变化（P<0.05、0.01）。结论 甘草泻心汤对于伊立替康诱导的腹泻小鼠具有明显的治疗作用,可能是其通过调整腹泻小鼠肠道菌群实现。     

黄芩葡萄糖醛酸水解酶基因的克隆、生物信息学分析及表达

该文从黄芩叶中提取总RNA,利用RT-PCR技术克隆了葡萄糖醛酸水解酶基因(sbGUS)的全长(GeneBank登录号KR364726)。该基因全长1584 bp,含有1个完整的开放阅读框,编码527个氨基酸,为不稳定亲水蛋白。生物信息学分析结果显示sbGUS编码蛋白分子质量为58.7248 kDa,等电点pI 5.55,含有信号肽和1个跨膜区,具有1个水解酶超级家族结构域1个未整合的转移糖苷酶催化结构域。二级结构中α-螺旋(Alpha helix)占25.62%,延伸链(extended strand)占28.84%,β-转角(Beta turm)占13.28%,无规卷曲(random coil)占32.26%。序列比对和系统进化分析表明, sbGUS基因与黄芩(BAA97804.1)核苷酸相似性为98.93%、氨基酸相似性为98.29%,在9个位置氨基酸不同。实时荧光定量PCR检测sbGUS在根中表达丰度最高,其次为花和茎,在叶中表达量最低。这为进一步鉴定sbGUS的功能及开展黄芩素的合成生物学研究奠定基础。     

经皮微波消融联合重组人白细胞介素-2治疗肝转移癌的临床疗效观察与研究

目的 观察超声引导下经皮微波消融治疗(PMAT)联合重组人白细胞介素-2(rhIL-2)治疗肝转移癌的可行性、安全性和疗效,以及对肝癌患者免疫功能的影响.方法 采用随机数字表法将72例消化道肿瘤肝转移患者分为两组,观察组34例,接受局部病灶PMAT联合rhlL-2全身用药治疗,对照组38例,仅行单纯PMAT治疗,观察两组术后生活质量、并发症及T淋巴细胞亚群变化,并统计两组0.5、1.0、2.0年累积复发率和累积生存率.结果 观察组0.5、1.0、2.0年累积复发率分别为20.59％ (7/34)、32.35％ (11/34)、64.71％ (22/34),对照组分别为26.32％ (10/38)、60.53％(23/38)、89.47％( 34/38),两组1.0、2.0年累积复发率比较差异有统计学意义(P＜0.05).观察组0.5、1.0、2.0年累积生存率分别为91.18％(31/34)、70.59％(24/34)、38.24％(13/34),对照组分别为89.47％(34/38)、47.37％(18/38)、31.58％(12/38),两组l.0年累积生存率比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者生活质量、免疫功能均有所提高,且未出现严重并发症.结论 PMAT联合rhIL-2治疗消化道肿瘤肝转移是安全可行的,其疗效明显优于单纯PMAT治疗,可明显提高患者生活质量及机体免疫功能,延长生存时间,降低肿瘤复发率,且不良反应小,严重并发症发生率低,适合并值得临床开展.     

SIRT1基因沉默对DLBCL细胞放射敏感性影响

目的 探究SIRT1基因沉默对DLBCL放射敏感性影响。方法 利用免疫组织化学观察SIRT1在DLBCL组织中的蛋白表达情况,蛋白印迹法检测SIRT1在DLBCL细胞系OCI-Ly3、SU-DHL-2、SU-DHL-4及人正常B细胞永生化细胞系HMy2.CIR中的表达情况。利用Lipofectamine 2000转染试剂盒将si-SIRT1及si-NC转染到SU-DHL-4细胞中并检测转染后SIRT1的表达;MTT法和克隆形成实验检测经放射处理后细胞放射敏感性的变化。成组t检验差异或单因素方差分析。结果 SIRT1在DLBCL组织中的阳性率为72.6%(103/140),明显高于SIRT1在RLH中的阳性率(26.5%,8/25)(P=0.001);SIRT1在DLBCL细胞系中的表达水平显著高于人正常B细胞永生化细胞系HMy2.CIR细胞(P=0.020);SIRT1基因沉默后,SIRT1在SU-DHL-4细胞中的表达量明显降低(P=0.008)。放射处理后,SIRT1基因沉默组的细胞增殖率和克隆形成率显著低于对照组(P=0.030)。结论 SIRT1基因沉默明显提高了DLBCL细胞的放射敏感性,为DLBCL细胞的治疗提供了一个新的靶标。     

ERK通路参与调控胰腺癌细胞吉西他滨化疗抵抗

目的检测ERK蛋白在胰腺癌细胞株产生吉西他滨(GEM)化疗抵抗前后的表达,分析ERK通路在化疗抵抗中的作用。方法通过浓度梯度递增诱导法建立对不同浓度吉西他滨化疗抵抗的胰腺癌细胞株模型;应用免疫组化检测各个化疗抵抗浓度细胞株ERK的表达;使用ERK通路阻断剂和激活剂分别作用于化疗抵抗最低和最高浓度,再检测ERK的表达;运用MTT法检测各因素对细胞耐药的影响,计算IC50值。结果经过吉西他滨化疗诱导后,ERK的表达随着化疗抵抗浓度的增加而升高;ERK通路特异性阻断剂作用于最低及最高浓度的化疗抵抗细胞株后,ERK蛋白的表达降低,细胞的1C50值降低,细胞对化疗药物的敏感性增强;ERK通路激活剂作用后,ERK蛋白的表达增强,细胞的IC50值升高,细胞对化疗药物的敏感性增强。结论 ERK通路参与调控胰腺癌细胞吉西他滨化疗抵抗。     

吉西他滨与奥沙利铂联合化疗治疗晚期膀胱癌的疗效和不良反应

[目的]探讨吉西他滨联合奥沙利铂方案治疗晚期膀胱癌的疗效及不良反应。[方法]56例Ⅳ期膀胱癌接受吉西他滨联合奥沙利铂方案化疗:吉西他滨1000mg/m2,d1和d8,奥沙利铂135mg/m2,d1;21d为1个周期,每2疗程评价疗效。[结果]本组65例晚期膀胱癌患者完全缓解(CR)3例(5.36%),部分缓解(PR)27例(48.21%),总有效率(CR+PR)43.57%。在疼痛缓解、全身情况明显改善,生存质量和KPS评分提高等方面均取得了较好疗效。主要不良反应为骨髓抑制、外周神经毒性、消化道反应等。无治疗相关死亡者。[结论]吉西他滨与奥沙利铂联合化疗是治疗晚期膀胱癌的有效方法,并且毒副反应相对较轻。     

CT引导下125I粒子植入治疗局部晚期非小细胞肺癌

目的 探讨CT引导下125I粒子植入治疗局部晚期肺癌的疗效,并与常规放疗对比.方法 分析本院局部晚期肺癌患者66例,均为经一线化疗后仍有残留的,其中34例后续治疗选用125I粒子植入,另32例后续选用局部根治性放疗,对比治疗中并发症发生率.治疗结束后2个月,复查胸部CT对比两组治疗效果,并统计两组无病生存期.结果 并发症:125I粒子植入组并发气胸6例(18％),出血10例(29％);根治性放疗组并发放射性肺炎4例(12％),肺部感染6例(19％).治疗2个月后复查胸部CT,125I粒子植入组有效率为82.3％,根治性放疗组有效率为55.8％.结论 CT引导下粒子植入治疗局部晚期肺癌,与单纯根治性放疗相比,有效率高,并发症少,值得推广和应用.