益骨胶囊含药血清对成骨细胞骨保护蛋白mRNA表达的影响

目的:观察益骨胶囊含药血清对体外培养的大鼠成骨细胞骨保护蛋白mRNA的影响。方法:实验于2004-05/2005-02在广州暨南大学生命科学技术学院细胞与蛋白质工程实验室完成。选取12月龄SD雌性大鼠20只,随机分为2组。中药给药组(益骨胶囊由淫羊藿、当归、白芍、枸杞子等8味中药组成)和蒸馏水对照组,每组10只。运用大鼠灌胃的方法制备含药血清和对照血清,分离、培养新生大鼠的颅骨成骨细胞,传代后分为2组(含药血清组和空白血清对照组),每组8孔,分别在培养24,48h时用反转录聚合酶链反应技术测定特异性电泳条带所显示成骨细胞中骨保护蛋白mRNA的相对表达量,酶联免疫法检测48,72和96h时200mL/L终浓度培养上清中骨保护蛋白的浓度。结果:两组动物各10只,均无亡失,所取血清正常用于细胞培养。①成骨细胞在接种4h后可见部分细胞贴壁、伸展。随培养时间延长,细胞伸出较多突起,细胞形态为单核,多边形及梭形,培养2d细胞基本全部贴壁,主要为梭形或多边形,培养6d左右基本贴满瓶壁,呈铺路石样排列。单层铺满培养瓶后可出现重叠生长,传代细胞大约15d天左右开始形成矿化结节。②特异性电泳条带显示益骨胶囊含药血清培养后24h和48h成骨细胞骨保护蛋白mRNA的表达均高于空白血清对照组犤(0.196±0.015,0.236±0.016),(0.152±0.018,0.206±0.022),P<0.01犦;③200mL/L终浓度的益骨胶囊含药血清培养后48,72和96h成骨细胞骨保护蛋白的表达明显高于空白血清对照组犤(0.1230±0.0128,0.1681±0.0130,0.1983±0.0186),(0.1067±0.0106,0.1385±0.0126,0.1588±0.0121),P<0.01或P<0.05犦。结论:益骨胶囊含药血清具有促进成骨细胞表达骨保护蛋白的作用。提示益骨胶囊能够通过对成骨细胞的影响而对骨吸收环节具有抑制作用,但是否对其他信号通路也有作用尚待研究。     

药物临床试验 监查稽查·广东共识(2014年)

第一部分监查一、监查员资质1、应有适当的医学、药学或相关专业的大专及以上学历;2、经过专业化的培训,取得GCP培训证书;3、熟悉有关试验药物的临床前和临床方面的信息以及临床试验方案及其相关的文件;4、具有良好的沟通能力,并为研究者和临床试验机构所接受。二、监查计划1、每个项目必须根据试验的具体情况制定相适;     

益骨胶囊含药血清对成骨细胞骨保护蛋白mRNA表达的影响

目的：观察益骨胶囊含药血清对体外培养的大鼠成骨细胞骨保护蛋白mRNA的影响。方法：实验于2004—05／2005—02在广州暨南大学生命科学技术学院细胞与蛋白质工程实验室完成。选取12月龄SD雌性大鼠20只，随机分为2组。中药给药组(益骨胶囊由淫羊藿、当归、白芍、枸杞子等8味中药组成)和蒸馏水对照组，每组10只。运用大鼠灌胃的方法制备含药血清和对照血清，分离、培养新生大鼠的颅骨成骨细胞，传代后分为2组(含药血清组和空白血清对照组)，每组8孔，分别在培养24，48h时用反转录聚合酶链反应技术测定特异性电泳条带所显示成骨细胞中骨保护蛋白mRNA的相对表达量，酶联免疫法检测48，72和96h时200mL／L终浓度培养上清中骨保护蛋白的浓度。结果：两组动物各10只，均无亡失，所取血清正常用于细胞培养。①成骨细胞在接种4h后可见部分细胞贴壁、伸展。随培养时间延长，细胞伸出较多突起，细胞形态为单核，多边形及梭形，培养2d细胞基本全部贴壁，主要为梭形或多边形，培养6d左右基本贴满瓶壁，呈铺路石样排列。单层铺满培养瓶后可出现重叠生长，传代细胞大约15d天左右开始形成矿化结节。②特异性电泳条带显示益骨胶囊含药血清培养后24h和48h成骨细胞骨保护蛋白mRNA的表达均高于空白血清对照组【(0．196&;#177;0．015，0．236&;#177;0．016)，(0．152&;#177;0．018，0．206&;#177;0．022)，P&;lt;0．01】；③200mL／L终浓度的益骨胶囊含药血清培养后48，72和96h成骨细胞骨保护蛋白的表达明显高于空白血清对照组【(0．1230&;#177;0．0128．0．1681&;#177;0．0130，0．1983&;#177;0．0186)，(0．1067&;#177;0．0106，0．1385&;#177;0．0126．0．1588&;#177;0．0121)，P&;lt;0．01或P&;lt;0．05】。结论：益骨胶囊含药血清具有促进成骨细胞表达骨保护蛋白的作用。提示益骨胶囊能够通过对成骨细胞的影响而对骨吸收环节具有抑制作用，但是否对其他信号通路也有作用尚待研究。     

克黄利胆胶囊治疗乙型黄疸型肝炎肝胆湿热证的临床研究

目的:评价克黄利胆胶囊治疗乙型黄疸型肝炎肝胆湿热证的有效性和安全性。方法:采用多剂量、平行对照、随机、双盲双模拟、多中心研究设计。216例患者被分为3组,试验1组给予克黄利胆胶囊2粒,克黄利胆模拟胶囊1粒,苦黄颗粒模拟颗粒1袋,每日3次;试验2组给予克黄利胆胶囊3粒,苦黄颗粒模拟颗粒1袋,每日3次;对照组给予克黄利胆模拟胶囊3粒,苦黄颗粒1袋,每日3次。疗程均为7天。结果:治疗后试验1组、试验2组与对照组的总胆红素均值均较治疗前降低,3组治疗前、后的总胆红素均值差异均有统计学意义(P<0.001);3组的退黄疗效总有效率分别为:64.06%、58.82%和61.76%,组间差异无统计学意义(P>0.05);3组的中医证候总积分较治疗前相比呈逐周下降趋势,中医证候总有效率分别为:98.44%、97.06%和97.06%,组间差异无统计学意义(P>0.05):3组的肝功检查分析及药物不良反应发生率比较均无统计学意义(P>0.05)。结论:克黄利胆胶囊治疗乙型黄疸型肝炎肝胆湿热证是安全有效的,值得临床推广使用。     

循经点穴法配合中药治疗晚期肝癌初探

肝癌俗称癌中之王,手术化疗效果均差,因此,人们认真地探索使用中药,气功在对肝癌的治疗中提高疗效的可能性。祖国医学认为,肝居于胁下,为足厥阴经所系,并通过经络与全身气血、皮、肉、筋、脉及其它脏腑有机地联系在一起。经络在生理上具有运行营卫气血、沟通表里、抵御病邪、保护机体的功能。在病理变化时,既可由外感风寒湿邪的侵袭留止而受损,叉可因痰、食、毒、血瘀、气滞等因素而不通,以致病邪留滞予经络,日久成积成肿,形成肿瘤。根据肿瘤的病因,治疗上除了辨证施治以外,着重     

淫羊藿苷通过雌激素受体和p38MAPK信号诱导MC3T3-E1Subclone14细胞的分化

目的观察淫羊藿苷(ICA)对MC3T3-E1Subclone14前体成骨细胞株活力、分化的影响,以及雌激素受体(ER)信号、p38MAPK信号在分化过程中的作用。方法 WST-8方法检测MC3T3-E1Subclone14细胞活力;pNPP法检测细胞碱性磷酸酶活性(ALP);ELISA检测I型胶原(ColI)和骨钙素(BGP);Western印迹法检测p38MAPK的蛋白磷酸化;并分别用ICI182780阻断ER受体或SB203580阻断p38MAPK信号后检测ICA对细胞ALP、Col I、BGP的影响;Western印迹法检测ICI182780阻断ER受体信号后,ICA对p38MAPK蛋白磷酸化的影响。结果 ICA(10-7、10-6、10-5mol/L)对细胞活力与对照组比较,在统计学上无显著差异(P>0.05);ICA可以浓度依赖性的提高细胞的ALP、Col I和BGP和矿化结节数量(P<0.01,P<0.05);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度的ICA促细胞分化的特性明显下降(P<0.01);ICA可以浓度组依赖性的提高细胞p38MAPK的蛋白磷酸的水平(P<0.01);SB203580阻断p38MAPK信号后,10-5mol/L浓度的ICA促分化的特性下降(P<0.01);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度ICA促p38MAPK磷酸化明显减弱(P<0.01)。结论 ICA可以促进MC3T3-E1Subclone14细胞分化,ER受体信号、p38MAPK信号在促分化过程中起着重要作用,ER受体信号通路在p38MAPK信号通路的上游。     

加味桃核承气汤治疗糖尿病肾病138例临床观察

将138例Ⅳ期糖尿病肾病患者随机分为两级,通过加味桃核承气汤加基础治疗（治疗组）与单纯运用基础治疗（基础组）的比较观察,评价加味桃核承气汤对糖尿病肾病患者空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（PBG）、24h尿蛋白定量、内生肌酐清除率（Ccr）、胆固醇（CH）、甘油三酯（TG）的影响。结果治疗组FBG、PBG、24h尿蛋白定量、CH、TG均明显下降,Ccr升高,与治疗前比较有显著性差异（P＜0．01,P＜0.05）;基础组除FBG、PBG明显下降外,其他变化不明显。结论认为,加味桃核承气汤能改善糖尿病肾病患者糖、脂代谢紊乱,逆转其肾小球滤过率逐步下降的趋势,减少尿蛋白排出量。     

益骨胶囊对去卵巢大鼠骨密度及血浆和骨组织CGRP和SP含量的影响

目的观察补肾活血中药复方益骨胶囊对去卵巢大鼠骨密度及血浆和骨组织中降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)含量的影响,探讨其作用机制。方法 6月龄SD雌性大鼠40只,随机分为4组:假手术组、模型组、益骨胶囊低剂量组、益骨胶囊高剂量组。模型组、益骨胶囊低剂量组、益骨胶囊高剂量组均行双侧去卵巢手术,术后1周益骨胶囊低、高剂量组用灌胃法给服益骨胶囊(1.16 g/100 g和10.44 g/100 g),模型组灌服生理盐水,12周后观察各组大鼠骨密度的改变,并用ELISA法检测各组大鼠血浆和骨组织CGRP和SP的含量。结果与假手术组比较,模型组骨密度显著降低(P<0.01),血清和骨组织中CGRP和SP也明显降低。与模型组比较,益骨胶囊低剂量和高剂量组骨密度明显增高(P<0.01),血浆和骨组织CGRP和SP明显增高(P<0.01),但仍低于假手术组(P<0.01)。结论益骨胶囊能够调节血浆和骨组织CGRP和SP的含量,这可能是其抗骨质疏松的作用机理之一。     

肿瘤安胶囊辅助治疗气虚痰结夹瘀证非小细胞肺癌的临床研究

目的:评价肿瘤安胶囊辅助治疗非小细胞肺癌(气虚痰结夹瘀证)的临床疗效及安全性.方法:随机、平行、双盲单模拟、安慰剂对照的多中心临床研究.432例非小细胞肺癌随机分为试验组(A组)和对照组(B组),所有受试者在化疗基础上服用试验用药如下:A组324例服用肿瘤安胶囊,B组108例服用安慰剂,每次6粒,每日3次,化疗的当天开始服用,连续服药21 d为1周期,共2个周期.观察两组化疗通过率、化疗减毒作用、中医证候、体重变化、实体瘤疗效、安全性指标及不良事件的观察.结果:与B组比较,A组治疗第1周期、第2周期后化疗毒副反应分度积分均明显低于B组(P<0.05或P<0.001),且A组治疗第2周期积分低于自身治疗第1周期(P<0.01);A组在改善中医症候、改善患者行为状况、保持体重稳定性方面疗效显著优于B组(P<0.05或P<0.001).A组在化疗通过率、实体瘤疗效方面与B组比较差异无统计学意义(P>0.05).试验期间未发现明显的毒副反应.结论:肿瘤安胶囊辅助治疗非小细胞肺癌一气虚痰结夹瘀证,可减轻化疗毒副反应,改善临床症状,提高患者生存质量,无毒副作用,是理想的癌症辅助治疗药物.     

补肾活血液对地塞米松诱导雄鼠骨质疏松的影响

目的:研究补肾活血液预防和治疗地塞米松致雄性大鼠骨质疏松的效果,并探讨其作用机制。方法:采用12月龄SD雄性大鼠46只,随机分组给药,18周后分别测定全身骨密度(BMD)、股骨抗弯强度(FBS)以及血清中骨钙素(BGP)、甲状旁腺素(PTH)、睾酮(T)、雌二醇(E_2)的水平。结果:全身BMD、FBS预防组显著高于地塞米松组(P<0.01),与空白对照组比较未见明显差异;治疗组高于地塞米松组(P<0.05),但低于空白对照组(P<0.05);预防组、治疗组的血清T水平高于地塞米松组(P<0.01和P<0.05),血清PTH低于地塞米松组(P<0.05),血清E_2以及BGP的水平略高于地塞米松组,但无统计学意义。结论:补肾活血液可以有效地预防和治疗地塞米松诱导的雄性大鼠骨质疏松。