高速逆流色谱法分离制备吴茱萸中的柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱

目的:制备柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱化学对照品.方法:采用高速逆流色谱法分离纯化吴茱萸二氯甲烷萃取物,溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:5:5),上相做固定相,下相做流动相,流速2.0mL·min<'-1>,仪器转速855rpm,进样量400mg,所得样品由高效液相色谱法检测纯度.结果:一次分离可制备6.2mg柠檬苦素、10.4mg吴茱萸碱、10.5mg吴茱萸次碱,其纯度分别为96.2%、98.1%和95.4%.结论:该方法操作简单,可作为柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱化学对照品的制备分离方法.     

HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^-1乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4～3.213、0.784 5～8.982、0.998～3.194、0.622 5～19.92、25.05～300.6、2.513～30.15和7.775～93.30μg·m L^-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、...     

鸦胆子药渣抗葡聚糖硫酸钠诱导小鼠肠炎作用研究＊

目的 建立葡聚糖硫酸钠（Dextran sulphate sodium，DSS）诱导的小鼠肠炎模型，观察鸦胆子药渣提取物对溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis，UC）小鼠的治疗作用。方法 采用DSS自由饮水建立UC小鼠模型，将BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪（5-ASA，200 mg·kg^-1），鸦胆子药渣低剂量组（25 mg·kg^-1），中剂量组（50 mg·kg^-1），高剂量组（100 mg·kg^-1），通过观察小鼠一般情况并评估疾病活动指数（DAI），结肠大体形态，组织学改变，以及通过ELISA法测定小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平。结果 鸦胆子药渣能够明显改善DSS导致的小鼠体重下降，DAI评分和组织损伤评分的升高；以及通过鸦胆子药渣各剂量治疗后，小鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平较模型组均显著下降。结论 鸦胆子药渣能有效缓解UC模型小鼠结肠炎症，其机制可能与抑制促炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平升高有关。     

HPLC-FLU法测定人血清中硫酸吲哚酚浓度及其在血液透析病人中的应用

目的：建立测定人血清中硫酸吲哚酚浓度的高效液相色谱-荧光检测法,了解血液透析和血液透析滤过对硫酸吲哚酚的清除效果。方法：血清样品经乙腈沉淀蛋白;采用Hypersil BDS C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈-水-三氟乙酸（15∶85∶0.2,V/V/V）,流速为1mL/min;入射波长为280nm,发射波长为390nm。分别测定尿毒症患者透析前后血清中硫酸吲哚酚浓度。结果：线性范围为0.5~80.0μg/mL,线性方程为Y=2.438×104X＋6.964×103,r=0.9986;日内、日间精密度均小于15%,方法回收率为92.8%~111.4%,提取回收率为90.9%。血液透析和血液透析滤过后患者血清中硫酸吲哚酚的下降率分别为（19.6±7.3）%和（25.3±7.0）%。结论：本法简便、快速、灵敏、准确,可用于测定人血清中硫酸吲哚酚浓度。     

高速逆流色谱法分离制备吴茱萸中的柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱

目的:制备柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱化学对照品。方法:采用高速逆流色谱法分离纯化吴茱萸二氯甲烷萃取物,溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶5∶5),上相做固定相,下相做流动相,流速2.0mL.min-1,仪器转速855rpm,进样量400mg,所得样品由高效液相色谱法检测纯度。结果:一次分离可制备6.2mg柠檬苦素、10.4mg吴茱萸碱、10.5mg吴茱萸次碱,其纯度分别为96.2%、98.1%和95.4%。结论:该方法操作简单,可作为柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱化学对照品的制备分离方法。     

清开灵口服制剂“成分-靶标-功效”网络分析及实验验证研究

探索清开灵口服制剂清热解毒、镇静安神作用的“成分-靶标-功效”网络调控机制。通过选取清开灵口服制剂中23个主要成分为研究对象,利用TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库预测化合物潜在作用靶点,运用UniProt数据库校准靶点基因,借助OmicsBean分析系统与STRING 10数据库对靶点进行基因本体(Gene Ontology, GO)功能富集分析和KEGG信号通路分析,利用Cytoscape 3.8.2软件进行可视化处理,构建“成分-靶标-通路-药理作用-功效”网络。对23个主要成分和15个关键靶点进行分子对接,验证其结合能力。最后采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型,验证清开灵口服制剂中6个单体成分的抗炎作用。结果发现23个目标化合物可作用于236个相关靶点,干预33条关键信号通路,主要有花生四烯酸代谢、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)信号通路、TRP通道的炎性介质调节、cAMP信号通路、cGMP-PKG信号通路、Th17细胞分化、白细胞介素17(i...     

LC-MS/MS法测定坦索罗辛在比格犬血浆中的浓度及其缓释制剂的药动学研究

目的:建立坦索罗辛血药浓度LC-MS/MS测定方法,并研究坦索罗辛缓释制剂在比格犬体内的药代动力学。方法:6只比格犬空腹单次口服给予含有0.4 mg的盐酸坦索罗辛缓释胶囊,给药前(0 h)、给药后不同时间点各采血0.3 mL,分离血浆后,加入内标愈创木酚甘油醚,经乙酸乙酯萃取,以甲醇:水:甲酸(80∶20∶0.2,V/V/V)为流动相,在反相C18色谱柱进行分离。采用电喷雾离子源(ESI源)的正离子方式检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子反应为m/z409.0→m/z228.0(坦索罗辛)和m/z199.0→m/z125.0(内标,愈创木酚甘油醚)。结果:坦索罗辛在线性范围内0.05～10.0 ng/mL线性良好,定量下限为0.05 ng/mL,批内、批间精密度(RSD)均小于13.4%。盐酸坦索罗辛缓释制剂0.4 mg口服给药后AUC0-24 h为(7.82±1.92)ng.h.mL-1、AUC0-∞为(8.04±2.02)ng.h.mL-1t、1/2为(2.96±2.13)h。结论:LC-MS/MS法灵敏度高、分析快速,适用于比格犬血浆中坦索罗辛的药动学研究,坦索罗辛缓释胶囊口服给药后半衰期短,消除快。