双氢青蒿素通过调节凋亡相关蛋白的表达及活性氧的产生而抑制胰腺癌JF-305细胞的增殖

探讨双氢青蒿素诱导人胰腺癌JF-305细胞凋亡作用及活性氧在双氢青蒿素诱导JF-305细胞凋亡中的作用。采用MTT法考察不同浓度双氢青蒿素对人胰腺癌JF-305细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,Hochest 333258荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V荧光染色法检测JF-305细胞凋亡的变化,DCFH-DA检测凋亡过程中活性氧(ROS)的变化。Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达的变化。与对照相比,双氢青蒿素作用JF-305细胞48 h,细胞增殖受到明显抑制(P0.05);细胞被阻滞于G2/M期;细胞出现核浓缩聚集、碎裂的凋亡形态,细胞凋亡比例升高(P0.05);DCFH-DA检测双氢青蒿素给药组细胞ROS明显升高(P0.05);Western blot结果显示,双氢青蒿素作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。双氢青蒿素能诱导JF-305细胞凋亡,其凋亡过程可能与ROS的生成增加相关。     

蜂毒肽诱导人肝癌细胞系SMMC-7721程序性坏死

目的探讨蜂毒肽（MLT）对人肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用及可能机制。 方法采用MTT法检测不同浓度蜂毒肽对人肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤及程序性坏死特异性抑制剂-1 (Nec-1)对蜂毒肽杀伤SMMC-7721细胞的抑制作用。Hoechst 33342及PI双染色观察细胞程序性坏死的发生,流式细胞术检测细胞程序性坏死率,透射电子显微镜检测细胞超微结构变化,Western blotting法检测SMMC-7721细胞内受体相互作用蛋白1(RIP1)的表达变化。 结果与对照组比较,不同浓度蜂毒肽作用SMMC-7721细胞24 h后,细胞增殖活力明显下降(P<0.05);细胞染色呈深蓝色和红色的形态;细胞膜完整性被破坏、细胞器肿胀、细胞器膜被破坏、核膜完整性丧失,表明细胞发生坏死;Westen blotting结果显示,SMMC-7721细胞内RIP1表达比例升高。与蜂毒肽给药组比较,Nec-1预处理组细胞增殖活力显著提高,细胞坏死率降低,细胞内RIP1表达下调。 结论蜂毒肽通过RIP1介导的程序性坏死途径诱导SMMC-7721细胞死亡。     

β-七叶皂昔钠联合甲泼尼龙减少一氧化碳中毒迟发脑病发病率的相关研究

目的探讨β-七叶皂甘钠联合甲泼尼龙减少一氧化碳中毒迟发脑病发病率的相关性。方法选取2018年11月—2019年2月在保定市第二医院治疗的一氧化碳中毒患者120例,回顾性分析,分为β-七叶皂昔钠联合甲泼尼龙组(简称观察组)和β-七叶皂甘钠组(简称对照组),观察两组患者迟发性脑病发病率,检测各组患者血清中Caspase-3、Casepase-9、IL-4、IL-10的变化以及观察两组患者服药后的不良反应。结果对两组患者疗效进行比较发现,观察组患者优良率88.3%(53/60)明显高于对照组患者73.3%(44/60)(P<0.05),迟发性脑病的发病率6.7%(4/60)明显低于对照组患者20.0%(12/60)(P<0.05)。对发生迟发性脑病的患奢进行Caspase-3、Caspase-9、IL-4、IL-10检测发现,其Caspase-3、Caspase-9、IL-4、IL-l0水平明显低于未发病患者;同时对比两种用药出现的不良反应发现差异无统计学意义(P>0.05)。结论β-七叶皂昔钠联合甲泼尼龙可以有效改善一氧化碳中毒患者并发迟发脑病的概率,降低患者体内Caspase-3、Caspase-9、IL-4、IL-10水平,值得临床进一步研究。     

肿瘤靶向药物的研究进展

开发抗肿瘤药物的新型靶向载体系统、寻找新靶点、改善药物在体内的代谢动力特性、增加药物在肿瘤部位的富集、减少靶向药物对正常细胞的杀伤、降低毒副作用,是近年抗肿瘤药物的研究热点.本文就载体系统及靶点的研究进展进行了介绍.     

镇痫片质量标准研究

目的建立镇痫片的质量标准。方法采用薄层色谱法对其处方中石菖蒲、广郁金和远志进行定性鉴别;用反相高效液相色谱法测定人工牛黄中胆红素的含量。结果在所使用的色谱条件下,胆红素出峰位置未见干扰,胆红素在0.0439~0.3073μg范围内线性关系良好(r=0.9998)。镇痫片中胆红素的平均加样回收率为98.62%,相对标准偏差为1.09%(n=6)。结论该方法操作简单、稳定、专属性和重现性良好,可作为镇痫片的质量控制方法。     

灵芝多糖硫酸酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的：对灵芝多糖（GLP）进行硫酸酯化分子修饰,观察灵芝多糖硫酸酯（GLPS）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,初步探讨其作用机制。方法：硫酸酯化修饰GLP,得到GLPS;将100只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、GLP组（40mg·kg^-1·d^-1）、GLPS组（40 mg·kg^-1·d^-1）和尼莫地平组（1 mg·kg^-1·d^-1）,每组20只。采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,观察脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损评分和脑组织含水量,检测大鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平,ELISA法检测脑组织中匀浆中核因子kappa B（NF-κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测大鼠脑组织中热休克蛋白70（HSP-70）和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）表达水平。结果：与模型组比较,GLP和GLPS组大鼠神经功能评分降低（P<0.01）,脑组织含水量减少（P<0.05或P<0.01）,SOD活性升高（P<0.05或P<0.01）,MDA水平降低（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、TNF-α、IL-1和IL-6水平降低（P<0.05或P<0.01）,且GLPS组变化较GLP组明显（P<0.05）;Western blotting检测,与模型组比较,GLP组和GLPS组大鼠脑组织中p-Akt蛋白表达水平升高（P<0.05）,GLPS组大鼠脑组织中HSP-70蛋白表达水平升高（P<0.01）,而GLP组HSP-70蛋白表达水平升高效果不明显。结论：硫酸酯化修饰可以明显改善GLP对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,其作用机制可能通过调控HSP70/PI3K/Akt信号通路,抑制再灌注后继发的炎症反应,从而发挥对神经细胞的保护作用。     

β-七叶皂苷钠对急性一氧化碳中毒迟发性脑病的改善效果

目的 探讨β-七叶皂苷钠对急性一氧化碳中毒迟发性脑病的改善效果及IL-4、IL-10、TGF-β1的变化。
方法 比较高压氧联合β-七叶皂苷钠（联合治疗组）和单独使用高压氧（单独治疗组）治疗急性一氧化碳中毒迟发性脑病的效果,检测各组患者血清中IL-4、IL-10、TGF-β1的变化。在治疗前后分别用蒙特利尔认知评估表（MoCA）、简易精神状态检查表（MMSE）对患者进行神经心理评估,使用KEYPOINT肌电图/诱发电位仪检测事件相关电位P300的潜伏期判断认知水平。
结果 联合治疗组患者的总有效率为90.5%,高于单独治疗组患者（总有效率61.9%）（P < 0.05）。联合治疗组患者血清IL-4、IL-10、TGF-β1水平高于单独治疗组（P < 0.01）,动脉平均流速低于单独治疗组,差异有统计学意义（P < 0.01）。两组患者的不良反应率差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后患者的MoCA评分和MMSE评分均显著提高,事件相关电位P300的潜伏期明显缩短（P < 0.05）。
结论 β-七叶皂苷钠可以有效改善急性一氧化碳中毒患者迟发性脑病,提高患者体内IL-4、IL-10、TGF-β1水平,且患者不良反应率低,值得临床进一步研究。
     

青蒿素通过线粒体途径诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的分子机制研究

目的探讨青蒿素能否通过激活人肝癌细胞HepG2的线粒体凋亡途径,诱导细胞凋亡。方法不同浓度青蒿素与人肝癌细胞HepG2共培养24 h,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测HepG2细胞周期与凋亡,Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡形态,Western blot检测HepG2细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9和细胞色素C(Cytochrame,Cyto-C)表达水平。结果与对照组相比,青蒿素作用HepG2细胞24 h后,细胞增殖明显受到抑制,差异有统计学意义(P0.05)。0.2、0.4和0.8 mmol/L青蒿素给药组,细胞G_2/M期比例明显升高(P0.05),细胞核出现染色质不均匀,核浓缩聚集、碎裂凋亡形态,细胞凋亡比例升高,上述差异均有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,青蒿素作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Caspase-3、Caspase-9和Cyto C蛋白表达升高,上述差异均有统计学意义(P0.05)。结论青蒿素对HepG2细胞增殖具有抑制作用并能诱发细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡途径相关,使细胞周期阻滞于G_2/M期。