基于Wnt/β-catenin信号通路探讨"理气化湿方"对接种胃癌MGC-803细胞裸鼠肿瘤组织关键因子β-catenin、Wnt3a、Lgr5+表达的影响

目的:观察理气化湿方对皮下接种胃癌MGC-803细胞裸鼠肿瘤组织的干预作用及其对瘤体β-catenin、Wnt3a、Lgr5+基因和蛋白表达的影响.方法:将胃癌MGC-803细胞接种于健康雄性裸鼠腋下,成瘤后将裸鼠随机分为模型组、胃复春组(0.56?g/kg)和理气化湿方低、中、高剂量(3.9、7.8、15.6?g/kg)组,每组7只.各组分别灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,共灌胃4周.灌胃结束后处死所有裸鼠,取肿瘤组织,切片、染色,显微镜下观察病理组织学改变.另一部分肿瘤组织应用RT-PCR法、Western?Blot法检测β-catenin、Wnt3a、Lgr5+基因和蛋白的表达情况.结果:模型组肿瘤组织细胞大小形态不一,核浆比例增大,核分裂明显,个别腺体呈共壁现象或囊状扩张;理气化湿方中、高剂量组肿瘤组织细胞形态较均匀,固有腺体排列整齐紧密,偶有淋巴细胞浸润,腺上皮和腺管分界清楚.与模型组比较,各给药组肿瘤组织β-catenin、Wnt3a、Lgr5+基因与蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),其中理气化湿方中、高剂量组上述基因与蛋白表达水平明显低于胃复春组(P<0.05),而中、高剂量组组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:理气化湿方可通过抑制β-catenin、Wnt3a、Lgr5+增殖,调控Wnt/β-catenin信号通路的异常活化,从而改善瘤体的病理状态、分化程度.     

从肺论治法对溃疡性结肠炎大鼠肺组织iNOS mRNA 表达的影响

目的：观察从肺论治法对溃疡性结肠炎（UC）大鼠肺组织中诱生型一氧化氮合成酶（iNOS）mRNA 表达的影响。方法：选取52 只大鼠,采用家兔结肠黏膜组织致敏与三硝基苯磺酸（TNBS）-乙醇模型相结合的免疫复合法复制UC 大鼠模型（造模成功率为78%）。从造模成功的40 只大鼠及正常组大鼠中随机选出8 只作为干预前（0 周时间点）的模型组及正常组。剩余造模成功的32 只大鼠随机分为模型组、西药组（柳氮磺胺吡啶）、从肺论治组（黄芪桔梗汤）、从肠论治组（黄芪黄连汤）,每组8 只,另取8 只正常大鼠为对照,连续干预4 周（4 周时间点）后,分别于0 周、4 周时间点采用Real Time-PCR 法测定肺组织中iNOS mRNA 表达。结果：与正常组比较,0 周急性期模型组大鼠肺组织中iNOS mRNA 转录水平明显上调（P<0.05）;4 周治疗后,与正常组比较,模型组大鼠iNOS mRNA 转录水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,从肺论治组大鼠iNOS mRNA 转录水平显著降低（P<0.01）。结论：iNOS 催化合成的NO 在肺部疾病中发挥了重要作用,可引起气道炎症、水肿、肺损伤等。从肺论治法通过抑制iNOS 的异常活化,进而减轻肺部损伤。     

健脾化瘀解毒中药复方对溃疡性结肠炎患者血清细胞因子EGF、TGF-β1及TNF-α的影响

[目的]通过观察健脾化瘀解毒复方治疗溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效,进一步探讨其分子生物学作用机制。[方法]采用随机、阳性药平行对照方法,将60例轻中度溃疡性结肠炎患者分为观察组30例和对照组30例,观察组给予健脾化瘀解毒复方中药,对照组给予美沙拉嗪4 g/d,疗程为3个月,观察治疗前后高敏C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)、Mayo评分的变化,并检测血清中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。[结果]血清CRP值、PLT、Mayo评分、EGF、TGF-β1及TNF-α表达治疗前观察组和对照组无统计学差异(P0.05),与治疗前相比,健脾化瘀解毒复方组和观察组治疗后CRP值、PLT、Mayo评分降低、EGF升高、TGF-β1及TNF-α表达降低,均具有统计学差异(P0.01);与对照组相比,健脾化瘀解毒复方组PLT、Mayo评分、TNF-α均具有统计学差异(P0.05);且观察组治疗有效率为93.1%优于对照组的76.7%。[结论]健脾化瘀解毒复方具有良好的抗溃疡性结肠炎的作用,其机制可能与调节血清EGF、TGF-β1、TNF-α的表达有关,其抗炎效果优于美沙拉嗪组。     

流行性感冒中医治疗概况

中医学称流行性感冒(以下简称"流感")为"时行感冒"或"重伤风",主要临床表现有:恶寒发热、头痛身重、咳嗽、咽痛、鼻塞流涕等。其认识素有"伤寒论"和"温病论"两种,初期病位于表(肺卫),按"伤寒"(六经)则属于太阳经表证(表     

健脾化瘀解毒复方对溃疡性结肠炎患者炎症因子及免疫屏障影响

目的:观察健脾化瘀解毒复方的临床疗效,探讨其对炎症因子及免疫屏障的影响。方法:选取2014年1月—2016年9月医院诊治的60例慢性复发型活动期或慢性持续型轻中度的溃疡性结肠炎患者,随机分为对照组30例和观察组30例,对照组给予美沙拉嗪颗粒4 g/d,口服,观察组予以健脾化瘀解毒复方口服2次/d,连续治疗3个月,比较两组治疗前后血沉(ESR)、血清降钙素原(PCT)、疾病活动指数(DAI)及肠镜下黏膜病变的变化,酶联免疫法(ELISA)检测血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)及黏膜地址素细胞黏附分子(MAd CAM-1)的水平。结果:治疗前两组患者ESR、PCT、DAI、肠镜下黏膜病变及血清中IL-6、IL-8、IL-10、MAd CAM-1无统计学差异(P0.05)。与治疗前相比,两组治疗后ESR、PCT、DAI显著降低(P0.01),血清中IL-6、IL-8、MAd CAM-1表达明显降低(P0.01,P0.05),而血清中IL-10表达显著升高(P0.01);与对照组相比,观察组ESR、DAI明显降低(P0.01,P0.05),血清中IL-6显著降低、IL-10显著升高均具有统计学差异(P0.05);且两组患者黏膜充血水肿、糜烂、溃疡均有显著好转(P0.01,P0.05),健脾化瘀解毒复方在改善黏膜充血水肿、糜烂方面较美沙拉嗪具有更明显优势(P0.05)。结论:健脾化瘀解毒复方具有明显的修复肠道黏膜、减轻肠道炎症的作用,其机制可能与调节肠道黏膜屏障,提高肠道局部免疫能力有关;在调节IL-6、IL-10平衡方面其作用优于美沙拉嗪。     

从肺论治法和从肠论治法对克罗恩病大鼠肺与结肠TGF-β1含量的影响比较

目的:观察从肺论治法和从肠论治法对克罗恩病(CD)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)含量的影响。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)水溶液+无水乙醇一次灌肠法建立大鼠克罗恩病模型后分别灌喂从肺论治方(黄芪桔梗汤)、从肠论治方(黄芪黄连汤)和西药柳氮磺胺吡啶(SASP)进行实验性治疗,然后于0周、第3周两个时间点测定肺和结肠TGF-β1蛋白表达、TGF-β1 mRNA转录水平变化及血清中TGF-β1水平。结果:模型组大鼠0周时,结肠及肺组织中TGF-β1蛋白和TGF-β1 mRNA转录水平均较正常组显著升高(P<0.01),血清TGF-β1水平显著性高于正常组(P<0.01);3周后,模型组仍较正常组显著性性升高,各治疗组均较模型组显著性下调(P<0.01,P<0.05)。在下调结肠组织TGF-β1蛋白水平上,西药组虽然较模型组降低(P<0.05),但与正常组之间亦存在差异(P<0.01);且效果低于与中药从肠论治组(P<0.05)。而中药从肺论治组和从肠论治组与正常组之间没有明显差异。在下调肺组织TGF-β1 mRNA转录水平上,西药组与从肠论治组虽然较模型组降低(P<0.01),但与正常组之间亦存在差异(P<0.01)。而从肺论治组与正常组之间没有明显差异,但与从肠论治与西药组间存在差异(P<0.05)。在下调血清TGF-β1水平上,各治疗组虽较模型组下降但与正常组亦存在差异(P<0.01,P<0.05),而且从肠论治组较从肺论治组显著性降低(P<0.01)。结论:中西药物均能下调CD肺、肠组织、及血清中过度表达的TGF-β1,起到抗炎、促进修复、预防纤维化的作用;从肠论治方在减轻CD结肠组织的炎症反应、预防和减轻结肠组织纤维化方面效果突出;从肺论治方减轻肺内炎症和损伤,防止肺纤维化形成方面效果突出。     

健脾化滞丸治疗不同证型溃疡性结肠炎的临床疗效及对血清白细胞介素8、单核细胞趋化因子1和巨噬细胞迁移抑制因子水平的影响

目的观察健脾化滞丸治疗不同证型溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效及对血清白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)和巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)水平的影响。方法将126例UC患者按辨证分为大肠湿热组(34例)、脾虚湿蕴组(32例)、脾肾阳虚组(30例)、寒热错杂组(30例),4组均在UC基础治疗基础上予健脾化滞丸治疗。疗程2个月。比较4组治疗前后改良Mayo评分、临床症状评分及血清IL-8、MCP-1、MIF水平,并统计疗效。结果脾虚湿蕴组总有效率96.88%(31/32),高于大肠湿热组[85.29%(29/34)]、脾肾阳虚组[83.33%(25/30)]及寒热错杂组[86.67%(26/30)](P<0.05)。治疗后4组改良Mayo评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗后脾虚湿蕴组均低于大肠湿热组、脾肾阳虚组及寒热错杂组(P<0.05)。治疗后4组各临床症状评分均较本组治疗前降低(P<0.05),治疗后脾虚湿蕴组腹痛、腹泻、纳差、乏力症状评分均低于大肠湿热组、脾肾阳虚组、寒热错杂组(P<0.05)。治疗后4组血清IL-8、MCP-1、MIF水平均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗后脾虚湿蕴组均低于大肠湿热组、脾肾阳虚组、寒热错杂组(P<0.05)。结论不同证型UC患者在基础治疗基础上加用健脾化滞丸后,临床效果均良好,均能改善临床症状,其作用机制与下调血清IL-8、MCP-1、MIF水平有关。其中健脾化滞丸对脾虚湿蕴证UC患者疗效和下调炎性指标作用更为显著。     

毒热平注射液对流感病毒FMl感染小鼠免疫功能的影响

目的 研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4(IL-4),干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平,CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制.方法 以ICR小鼠(SPF级)作为研究对象.实验分为7组:毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组.流感病毒FM1感染小鼠造模连续7 d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT-PCR法测定肺组织中INF-γ mRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Western blot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平.结果 FM1感染模型组的肺指数明显高于正常组(P<0.001),利巴韦林组,双黄连组及毒热平注射液大、中,小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低(P<0.001或P<0.01),其中以毒热平中剂量组最好.毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4 mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4 mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组(P<0.001);毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γ mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义(P>0.05).毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达(P<0.001),抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组(P<0.05).结论 毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γ mRNA基因转录,抑制IL-4 mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达.