UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分

目的:建立UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分(秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯)的方法,比较不同厂家及批次秦皮配方颗粒中7种成分含量的差异,为秦皮配方颗粒的科学质量控制提供依据。方法:采用Waters超高效液相色谱仪,Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~1 min,5%~10%A;1~10 min,10%~12%A),流速0.4 m L·min~(-1),进样量2μL,柱温38℃,检测波长220 nm。结果:色谱峰纯度结果表明方法专属性良好。秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯分别在各自范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.0%(RSD 2.0%),99.5%(RSD2.1%),99.9%(RSD 1.5%),99.7%(RSD 2.2%),99.4%(RSD 1.4%),100.8%(RSD 1.8%),99.4%(RSD 2.6%)。结论:该方法简便、准确,适用于秦皮配方颗粒中7种成分的同时定量测定,分析时间明显缩短,并对秦皮配方颗粒中除秦皮甲素和秦皮乙素之外的多种成分首次进行了定量测定,不同厂家及批次的秦皮配方颗粒主要成分含量存在一定的差异。     

核苷酸交叉互补基因1和B细胞特异单克隆鼠白血病毒整合位点基因1在青少年儿童脑胶质瘤中的表达与放疗疗效及预后的关系

目的 探讨儿童及青少年胶质瘤组织中核苷酸交叉互补基因1(ERCC1)、B细胞特异单克隆鼠白血病毒整合位点基因1(BMI-1)的表达与胶质瘤放疗敏感性及预后的关系.方法 收集2000年1月-2006年2月初诊接受手术、单纯放疗或同期放化疗、由中山大学肿瘤防治中心病理确诊为胶质瘤的儿童及青少年患者肿瘤石蜡标本85例.采用免疫组织化学二步法检测ERCC1、BMI-1蛋白的表达,统计分析二者与胶质瘤患者临床病理特征、放疗疗效、术后总生存率的关系.结果 ERCC1、BMI-1蛋白在85例胶质瘤组织中的阳性率分别为32.9%(28例)、37.6%(32例);BMI-1在高级别胶质瘤中的表达显著高于低级别,差异有统计学意义(P=0.027).BMI-1、ERCC1高表达患者放疗有效率明显低于低表达患者(P=0.020,0.024).Kaplan-Meier生存分析显示ERCC1、BMI-1蛋白高表达患者术后总生存时间短于低表达患者(P=0.028,0.006).多因素Cox回归分析显示病理级别、术后行为状态评分、放疗疗效、BMI-1的表达是青少年儿童脑胶质瘤患者独立的预后因素(Pa<0.05).结论 ERCC1、BMI-1蛋白表达与胶质瘤放疗疗效相关,BMI-1蛋白高表达与胶质瘤的恶性程度及预后相关,是青少年儿童胶质瘤患者的独立预后指标.     

基质辅助激光解吸电离质谱法在中药领域的应用进展

中药具有丰富的化学成分和复杂的作用途径，在治疗和预防疾病方面疗效显著，为保证中药质量及开发新药，一些分析检测方法应运而生。基质辅助激光解吸电离质谱法（MALDI-MS）是一种“软电离”的新型质谱技术，具有高通量、高灵敏度、低成本、低样品消耗量、线性范围宽、电离温和、适用于热不稳定物质等特点，为中药的分子水平研究提供了技术支撑。目前该技术被广泛用于中药成分分析和组学研究领域，在药材真伪鉴别、分子实时筛选和构建活性成分的代谢网络途径方面发挥重要作用，其中，选择合适的基质和样品制备技术是保证检测效果的关键。随着新型基质的开发与优化、样品制备技术的不断完善、MALDI-MS与多种分析方法的联用，将会大幅提高其检测效果。基于此，笔者概述了MALDI-MS在中药领域的应用情况，包括高通量检测中药活性成分、监测机体内药物及其代谢物状况、原位可视化表征中药活性成分组织分布信息等，并探讨了MALDI-MS的应用前景和不足之处，以期为中药成分鉴定、药物利用及代谢的相关研究提供技术支撑。     

小鼠Mmp-9 shRNA重组慢病毒包装、筛选及干扰效果检测

目的:设计、筛选、构建并鉴定Mmp-9小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),并构建其慢病毒表达载体,为血管化疾病的防治提供理论依据及实验室数据。方法:针对基质金属蛋白酶9靶基因设计siRNA序列,并合成小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)结构的DNA,与经AgeΙ和EcoRΙ酶切的pSIL-RFP连接、转化大肠杆菌感受态细胞,构建成携带Mmp9-shRNA慢病毒质粒载体(pSIL-RFP/MMP9-shRNA),PCR及测序鉴定后,Western blot筛选出携带最佳siRNA的慢病毒质粒载体,并利用慢病毒包装质粒(pHelper1.0和pHelper2.0)将其制备成MMP9-shRNA慢病毒,并测定病毒滴度为1×1010pfu/l。结果:PCR和DNA测序证实合成的含基质金属蛋白酶9短发卡RNA慢病毒载体寡核苷酸链正确插入pSIL-RFP载体,表明实验成功构建基质金属蛋白酶9RNA干扰慢病毒表达载体。结论:成功的构建并筛选出针对小鼠Mmp9基因沉默的特异性shRNA重组慢病毒,为血管化性疾病的防治研究提供基础。     

生活方式病离你有多远

生活方式病是发达国家在对一些慢性非传染性疾病进行了大量的流行病调查研究后得出的结论。这些慢性非传染性疾病的主要病因就是人们的不良生活方式。包括疾病有：肥胖、高血压、冠心病、等心血管疾病,脑中风等脑血管疾病,糖尿病和以部分恶性肿瘤。这些疾病都是现代医学还难以治愈,并严重的危害人们的生命和健康。     

儿童颌面部腺泡型横纹肌肉瘤1例及文献回顾

横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)是起源于横纹肌细胞或向横纹肌细胞分化的间叶细胞的恶性肿瘤,是儿童和青少年最常见软组织恶性肿瘤,它具有高度可变的生物学行为 [1],临床表现不典型,影像表现缺乏特异性,早期诊断及合理治疗对病人的预后至关重要.现将本院收治的1例儿童腺泡状横纹肌肉瘤报告如下.     

放射性脑坏死的影像学特征及手术治疗

目的总结放射性脑坏死的影像学特点及手术治疗经验。方法回顾性分析19例经手术治疗的放射性脑坏死病人的临床资料,其中鼻咽癌放疗后13例,行切除坏死病灶或部分切除坏死病灶联合颞极切除及颞肌下减压;其他肿瘤6例,行部分切除坏死病灶及去骨瓣减压。结果术后随访6～72个月,头痛症状消失13例,偏侧肢体麻木及偏瘫症状好转6例,癫疒间发作次数减少5例。无严重手术并发症。结论对保守治疗无效的放射性脑坏死,手术可迅速缓解病人颅内压增高症状,治疗效果满意。     

131I-Anti-EGFRv Ⅲ的制备及对U87胶质瘤细胞的放射免疫效应

目的 研究放射性核素碘(131I)标记表皮生长因子受体Ⅲ型突变体单克隆抗体IgG(Anti-EGFRvⅢ)的方法及放射免疫活性,观察标记产物131I-Anti-EGFRvⅢ对U87胶质瘤细胞的生物学效应.方法 利用Iodogen法标记131I至Anti-EGFRvⅢ,测定放化纯度、标记率、比活度、稳定性.经体外细胞结合试验分析131I-Anti-EGFRvⅢ的免疫活性,通过MTT法检测放射免疫效应.结果 131I-Anti-EGFRvⅢ放射化学纯度>90%,24、48、72 h放射性化学纯度依次为91.25%、90.74%和89.88%.标记率为64.56%,比活度为0.56 MBq/μg.131I-Anti-EGFRvⅢ与U87细胞结合率为41.69%,1.110 MBq 131I-Anti-EGFRvⅢ即有最大抑制细胞生长效应,随着时间延长,抑制效应更加明显.结论 Iodogen法标记131I-Anti-EGFRvⅢ具有较好的放射免疫活性,体外能够有效抑制U87胶质瘤生长.     

42例儿童窝沟封闭临床疗效观察

国外认为窝沟封闭项目是预防龋齿的重要方法之一，仅次于氟化物项目。国内自70年代以后开始研究和使用窝沟封闭剂，近年来，随着人们对口腔卫生保健意识的提高，医院已经逐步推广窝沟封闭。本研究旨在观察儿童窝沟封闭的防龋效果，我院自2003年1月-2005年1月对门诊的42名6～14岁儿童的第一、二恒磨牙进行窝沟封闭，并对封闭后龋齿发生情况进行追踪观察，现报告如下。