灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝酸脲诱导的大鼠视网膜损伤中Caspase-3表达的影响

目的观察灵芝孢子油(ganoderma spore oil,GSO)对N-甲基-N亚硝酸脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的视网膜外核层细胞损伤的作用及对Caspase-3时空表达的影响。方法50d♀SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、MNU造模(MNU)组、二十二碳六烯酸处理(DHA)组和灵芝孢子油处理(GSO)组。各组分别于MNU造模前0h及造模后1d、3d、7d、10d处死大鼠取材,采用RT-PCR、免疫荧光技术检测视网膜中Caspase-3表达和分布的变化,TUNEL法检测视网膜细胞凋亡情况。结果①RT-PCR检测:与NC组比较,MNU组1d、3d、7d视网膜Caspase-3表达增强(P<0.01);GSO组和DHA组1d、3d低于MNU组(P<0.01),1dGSO组表达较DHA组低(P<0.01)。②免疫荧光检测:在3d,GSO组和DHA组Caspase-3表达水平低于MNU组,GSO组较DHA组稍弱。③TUNEL法检测:NC组在视网膜各层均未发现凋亡细胞,MNU造模后可见外核层细胞凋亡。GSO组和DHA组在1d、3d外核层细胞凋亡百分率少于对应的MNU组(P<0.01),3d GSO组低于DHA组(P<0.01)。结论灵芝孢子油可能通过下调视网膜Caspase-3的表达,阻抑MNU诱导的视网膜外核层光感受器细胞凋亡的作用。     

不同浓度川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的作用

目的观察川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用。方法收集眼科临床手术切除的人翼状胬肉标本,消化分离成纤维细胞,进行体外细胞培养。分别在pH为7．40和pH为600的条件进行,以无血清RPMI1640培养液配制终浓度为4．0mg／ml、2．0mg／ml、1．0mg／ml、0．5mg／ml和0．25mg／ml的川芎嗪药液,0.02％的丝裂霉素C（MMC）作为阳性对照组,pH为740和／或pH为6．00的RPMI1640培养液作正常对照组,对体外培养的胬肉成纤维细胞进行作用。通过光镜观察对细胞进行计数;四甲基偶氮唑盐（MTT）技术检测显示细胞存活率,间接免疫荧光技术检测细胞波形蛋白（Vimentin）的表达。结果细胞计数和MTT法检测结果显示,在pH为740的条件下,与正常1640培养液组比较,4．0mg／ml的川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用（P〈0．001）。在pH为6．00的条件下,与正常1640培养液组比较,不同浓度的川芎嗪和pH为6．00的1640培养液对人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用,与pH为6．00的1640培养液组比较,4．0mg／ml的川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用明显强于其他浓度的川芎嗪,0.5mg／ml和0.25mg／ml的川芎嗪可明显促进人翼状胬肉成纤维细胞的生长（p〈0.001）。结论川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的生长具有双重作用,较高浓度的川芎嗪（4．0mg／ml）对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有抑制作用。较低浓度的川芎嗪（0.5mg／ml、0.／ml）在pH为6．00的条件下对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有保护作用。     

灵芝孢子油对NN-亚硝脲诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的影响

目的 探讨灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝脲 (MNU) 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞变性动物模型的治疗作用,为防治视网膜变性提供一种有价值的现代化中药。方法 大鼠随机分为5组,对照组、灵芝孢子油治疗组、二十二碳六烯酸 (DHA) 治疗组、灵芝孢子油+DHA 治疗组和模型组,在造模前 2 d 用不同的药物 ig 给药,第3天采用 40 mg/kg MNU 单次剂量 ip 造模,造模后继续 ig 给药至第10天,造模后1、3、5、7、10 d 进行视网膜电图(ERG)检查,并取眼球进行眼病理检查。结果 不同用药组各时间点的b波振幅明显高于模型组 (P＜0.05、0.01);灵芝孢子油组的a波振幅明显高于模型组 (P＜0.05),但与 DHA 组和灵芝孢子油+DHA 组相比较,无明显差异 (P＞0.05)。眼病理结果,不同用药组在各个时间点与相应的模型组比较,MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器损伤均明显减轻 (P＜0.05)。结论 灵芝孢子油和 DHA 可减轻 MNU 对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程度,促进 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤的功能恢复。     

半胱氨酸蛋白酶3、bax和bcl-xl在N-甲基-N亚硝酸脲诱导的大鼠视网膜损伤后的表达

目的 观察N-甲基-N亚硝酸脲（MNU）诱导的大鼠视网膜损伤过程中凋亡相关分子半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、bcl-2相关X蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤/白血病-xl（bcl-xl）在视网膜中的时空表达,探讨其在MNU诱导的视网膜损伤中的作用。方法 将鼠龄50 d的30只SPF级雌性SD大鼠随机分为MNU模型组（24只大鼠）和正常对照组（6只大鼠）。模型组按40 mg/kg的剂量腹腔注射MNU建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml/kg。模型组大鼠根据MNU注射后不同处死时间再分为1、3、7、10 d组,每小组各6只大鼠。正常对照组大鼠注射后3 d处死。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组视网膜中caspase-3、bax和bcl-xl的基因表达情况;免疫荧光技术检测其在视网膜中的表达以及分布的变化,并用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导dUTP 缺口末段标记（TUNEL）法检测视网膜细胞凋亡的变化。结果经病理学检测确定造模成功。RT-PCR检测结果表明,［与正常对照组相比（caspase-3和bax的相对吸光度（RA）值为62.45±7.65、46.53±4.41］,MNU模型1 d 组caspase-3（83.23±8.11,P=0.009）和bax（72.73±9.46,P=0.004）的表达均增强,3 d 组二者表达水平均最高 （caspase-3 RA =140.48±18.40,P=0.000;bax- RA=102.36±13.97,P=0.001）,10 d 组caspase-3的表达水平（RA =47.32±5.37,P=0.027）低于对照组,而10 d bax的表达 （RA=48.27±4.40,P=0.997）基本恢复至对照组水平;bcl-xl在4个造模组中的表达水平（1 d RA =63.29±4.29,P=0.000;3d RA =79.83±5.58,P=0.000;7 d RA=70.19±4.42,P=0.000;10 d RA =66.05±4.97,P=0.000）均高于正常对照组（RA =45.98±3.06）,3 d 组的表达水平最高。MNU诱导后1、3、7 d 组的bax/bcl-xl比值（1 d为1.15±0.14,P=0.143;3 d为1.28±0.16,P=0.001;7 d为1.17±0.08,P=0.079）大于对照组（1.01±0.09）,其中3 d组的比值最大,但10 d 组bax / bcl-xl比值（0.73±0.07,P=0.001）小于对照组。免疫荧光检测结果显示,caspase-3、bax和bcl-xl的表达变化分别与其RT-PCR检测结果一致;正常对照组在视网膜各层均未发现凋亡细胞,MNU 1 d 组的外核层可检测到大量凋亡细胞核［凋亡率（AI）为34.96±3.44,P=0.000］,3 d 组的外核层检测的凋亡细胞最多（AI=76.97±5.83,P=0.000）,10 d 组未检测到凋亡细胞。结论 MNU诱导的视网膜光感受器细胞凋亡可能是通过上调caspase-3及引起bax/bcl-xl表达失衡并明显倾向促进细胞凋亡造成的。     

灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝脲诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的影响

目的 探讨灵芝孢子油对N-甲基N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜光感受器细胞变性动物模型的治疗作用,为防治视网膜变性提供一种有价值的现代化中药.方法 大鼠随机分为5组,对照组、灵芝孢子油治疗组、二十二碳六烯酸(DHA)治疗组、灵芝孢子油+DHA治疗组和模型组,在造模前2 d用不同的药物ig给药,第3天采用40 mg/kg MNU单次剂量ip造模,造模后继续ig给药至第10天,造模后1、3、5、7、10 d进行视网膜电图(ERG)检查,并取眼球进行眼病理检查.结果 不同用药组各时间点的b波振幅明显高于模型组(P＜0.05、0.01);灵芝孢子油组的a波振幅明显高于模型组(P＜0.05),但与DHA组和灵芝孢子油+DHA组相比较,无明显差异(P＞0.05).眼病理结果,不同用药组在各个时间点与相应的模型组比较,MNU诱导的大鼠视网膜光感受器损伤均明显减轻(P＜0.05).结论 灵芝孢子油和DHA可减轻MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程度,促进MNU诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤的功能恢复.     

247例干眼症患者临床特征分析

目的 通过分析干眼症患者的临床资料,了解其临床特征,为诊断提供经验支持。设计 回顾性病例系列。 研究对象 收集2010年10月至2011年12月就诊于临沂市人民医院眼科的干眼症患者247例（494眼）。 方法 对上述患者的临床资料进行总结分析,并进行相关检查,包括裂隙灯、角膜荧光素染色、泪膜破裂时间（BUT）和基础泪液分泌试验（SΙt）。干眼症诊断标准：在确定排除眼部其他疾病后,（1） BUT≤5 s,主观症状1项阳性;（2） 5 s 相似文献   

MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤过程中视网膜VEGF表达的变化

目的： 探讨N-甲基-N-亚硝脲（MNU）诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤过程中视网膜血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化。方法: 50 d龄雌性SD大鼠55只,随机分5组,正常组和造模组（分4个组）,造模组40 mg/kg MNU单次腹腔注射,在注射后1 d、3 d、7 d和10 d取眼球立即分离视网膜以提取总RNA,通过RT-PCR检测VEGF mRNA的表达情况;摘取眼球进行冰冻切片,免疫荧光技术检测VEGF蛋白质在视网膜中的表达以及分布的变化。结果: RT-PCR检测结果表明,与正常对照组比较,MNU造模后1 d,VEGF mRNA的表达均较强,3 d VEGF表达最高,P＜0.01;7 d和10 d恢复正常,无明显差异,P＞0.05。免疫荧光检测结果显示,VEGF蛋白质表达与RT-PCR检测结果基本一致,VEGF蛋白质在视网膜各层均有表达,造模后1 d和3 d,外核层损伤较重,外核层VEGF的表达明显增强。结论: MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤可使VEGF的表达增强,提示VEGF可能参与MNU诱导的视网膜光感受器细胞的损伤修复。     

干眼的治疗现状

干眼是一种临床常见的慢性眼表疾病,发病率逐年增加。我们综述了应用人工泪液、皮质类固醇、环孢霉素A、泪小管填塞术、颌下腺移植术和中医药等方面治疗干眼的现状。     

干眼的研究现状

干眼是一种临床常见的慢性眼表疾病,是指由于泪液质和量的异常或泪液流体动力学异常引起的泪膜不稳定和眼表损害,从而导致眼部不适症状的一类疾病。不适感觉包括眼干涩、眼红、眼痒、异物感等。近年来,随着干眼发病率的增加,干眼越来越受到人们的重视。就干眼的临床症状、流行病学研究、病因、发病机制、分类和诊断等方面进行综述。     

干眼症患者435例临床症状分析

目的分析不同类型干眼症患者的临床表现及其特点。方法收集2006年10月至2008年2月就诊于我科的435例(870眼)干眼症患者的资料,并进行相关检查,包括裂隙灯检查、角膜荧光素染色、泪膜破裂时间(breakuptime,BUT)检查和基础泪液分泌试验(Schirmer Ⅰtest,SⅠt)。结果435例干眼患者中,眼部不适症状中最多见者为眼部干涩312例和视疲劳308例,其次是眼痒265例,视物模糊/视力下降247例,眼红241例,异物感213例,畏光/流泪和眼痛均为197例,眼烧灼感112例,睫毛上粘有碎屑、球结膜出血和眼睑痉挛者少见。女性发病率多于男性。非-Sjgren综合征眼患者386例,平均年龄(34.70±12.84)岁。BUT≤5s者410例;角膜荧光素染色阳性患者427例;SⅠt≤5mm者335例,6mm≤SⅠt<10mm者83例。结论干眼症患者的临床症状具有多样性特点,尤以眼干涩、视疲劳、眼痒和视物模糊/视力下降最为多见;角膜荧光素染色检查、BUT、SⅠt检查是诊断干眼症的主要依据。