内标校正法在栀子药材多成分定量分析中的应用

目的尝试内标校正法在栀子不同类化合物定量分析中的应用。方法利用高效液相色谱质谱联用技术(HPLC/DAD-MS)对栀子中京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、绿原酸、西红花苷I和西红花苷II进行定性定量分析。采用内标校正法,以栀子苷或西红花苷I为参照物,考察其他成分相对参照物的校正因子(fkm),进行系统适用性考察,并比较计算值与实测值的差异。结果分别以栀子苷或以西红花苷I为参照物,评价栀子中栀子苷、西红花苷I和西红花苷II的含量是可行的,校正因子系统适用性良好(RSD<5%),内标校正法测定结果与实测值基本一致(RSD<5%)。结论内标校正法实用、高效,可用于特定不同类成分含量测定。     

栀子药材质量综合评价研究

目的:综合考察栀子药材质量。方法:采用HPLC方法建立中药栀子药材指纹图谱,色谱柱:Grace Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.8 m L.min-1,检测波长为240 nm、330nm、440nm,柱温为20℃;考察了药材中栀子苷、西红花苷I、京尼平龙胆二糖苷3种指标成分TLC鉴别和水分、总灰分、酸不溶灰分、醇浸出物等药材常规理化实验项目。结果:对不同产地的栀子进行指纹分析,将所得指纹图谱分别导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》进行谱峰匹配分析,最终成功建立了30批栀子药材的综合指纹谱库。并指认了15个共有峰;采用SPSS统计学软件,对30个不同产地的栀子常规理化实验项目测定进行聚类分析比较,结果表明,不同产地栀子药材间品质差异较大。结论:本实验为栀子药材综合质量评价体系的建立提供理论和实验依据。     

基于蛋白质组学技术探讨榆栀止血颗粒治疗异常子宫出血大鼠的作用机制

目的：使用蛋白质组学技术研究榆栀止血颗粒对异常子宫出血大鼠蛋白表达的影响，探究其作用机制。方法：除对照组外通过药物致早孕大鼠流产的方法建立实验模型，30只SPF级Wistar妊娠雌鼠随机分为模型组、给药组和对照组，每组10只。给药组连续给予榆栀止血颗粒7 d，于第1、2、3、7天检测各组大鼠出血量。采用定量蛋白质组学分析榆栀止血颗粒对大鼠血清中蛋白表达差异的影响，并分析差异蛋白参与的信号通路。针对筛选出的差异蛋白和信号通路，利用平行反应监测技术进行验证。结果：模型组大鼠从第1天开始子宫出血量较对照组显著增加（P <0.01）；与模型组比较，给药组大鼠从第1天开始子宫出血量显著减少（P <0.01）。共定量得到5 496个蛋白质。给药组与模型组之间有84个差异蛋白（上调28个，下调56个）。差异蛋白主要富集于PI3K/Akt信号通路、补体和凝血级联、血小板激活等信号通路。选择玻连蛋白、纤溶酶原、丝氨酸蛋白酶抑制剂D1素辅因子Ⅱ等进行PRM验证，验证结果与TMT结果一致。结论：榆栀止血颗粒能够通过调节玻连蛋白、纤溶酶原等蛋白的表达水平，实现对异常子宫出血大鼠的治疗作用。