双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参＊

目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对，设计特异性的引物探针，建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq （Probe qPCR） 10 μL，人参上下游引物各0.5 μL，西洋参上下游引物各0.3 μL，人参与西洋参特异性探针各0.4 μL，DNA模板2 μL，灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s；然后以95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品，包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA，以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测，用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线，人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线，其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。     

白及属药用植物的资源分布及繁育

白及属药源植物丰富,该属植物兼具多种用途,且已极度濒危。通过对白及属药用植物的来源进行梳理,并对其药材常见混伪品进行比较鉴别,详细描述了该属植物不同空间尺度上的自然生境,收集整理其地理分布信息,探讨进行人工栽培适宜的土壤、气候及地理条件。重点对白及属植物的人工繁育技术进行系统总结和展望,基于白及属繁育系统特征及繁殖特性,认为种子无菌萌发是较为适宜的繁育手段,而新一代种子直播萌发技术的出现和栽培关键技术的突破,将大大提高白及属植物的繁育效率,从而转变资源供给方式。制定更具针对性的保护策略,加快人工繁育关键技术研究,以及加强资源和繁育的基础研究,将有助于提高保护和利用效率,对于白及属药用资源的可持续利用具有重要意义。     

不同产地川党参质量评价研究

目的：评价不同产地的川党参质量。方法：参照《中国药典》2010年版（一部）要求对5个不同产地的川党参的水分、总灰分、浸出物等指标进行分析,采用紫外分光光度法测定其总多糖含量,采用常规重量法测定其总皂苷含量,采用气相色谱法测定其农药残留含量,采用火焰原子吸收法对川党参中5种重金属As、Hg、Cu、Pb、Cd进行测定。结果：5个产地川党参样品水分含量范围为5．74％～7．13％;总灰分含量范围为4．15％～4．94％;浸出物含量范围为57．83％～67．31％;多糖含量范围为14．79％～27．81％;皂苷含量范围为1．49％～2．05％。重庆巫山县、巫溪县、奉节县和贵州道真县4个产地样品的多糖含量和皂苷含量差异不大,湖北恩施的川党参样品的多糖含量显著高于其它4个产地,皂苷含量显著低于其它4个产地。5个产地样品的农药残留及重金属含量均符合国家标准。结论：川党参质量状况良好。重庆市巫山县、巫溪县、奉节县及贵州省道真县4个产地的质量差异不大,湖北恩施与其它4个产地的质量差异较大。     

髂内动脉化疗泵注药预防浸润性膀胱癌术后复发54例体会

1994年3月至2005年6月,作者采用髂内动脉置化疗泵,依次注射抗癌药物预防浸润性膀胱癌术后复发59例,其中54例获随访,疗效满意,现报道如下.     

延胡索类药材资源研究进展

延胡索药用历史悠久,是著名道地药材“浙八味”之一,2015版《中华人民共和国药典》收载紫堇属植物延胡索Corydalis yanhusuo的干燥块茎为正品延胡索药材。由于历史原因及各地用药习惯差异,有多种延胡索类植物干燥块茎也作延胡索药材使用,造成品种混乱,影响用药安全、有效。本文通过本草考证和文献比较研究,对延胡索类药材的历史沿革、植物来源、资源与分布、化学成分、功效及应用进行系统整理和总结,以期为药材鉴定及质量控制研究奠定基础,同时为延胡索类药用植物资源保护和合理利用提供参考。     

基于Illumina Miseq分析黄精根腐病根际土壤真菌群落结构及多样性＊

目的研究患根腐病和健康黄精的根际土壤真菌群落结构组成、丰富度和多样性变化情况,为查明黄精根腐病发生机制提供线索。方法以4年生黄精根腐病根际土壤(GG组)、4年生健康黄精根际土壤(GJ组)和未种过黄精的土壤(GK组)为研究对象,采用Illumina Miseq技术分析土壤真菌群落结构组成。结果 9个土壤样品基因组共获得有效ITS1序列1063335条,病株组土样真菌OTUs数显著少于健康组和空白组土样。种群多样性指数显示病株组最低,空白组最高,在门分类水平上,患根腐病组及健康组土样的主要优势菌群均为子囊菌门、担子菌门、Zoopagomycota、毛霉门、壶菌门。在属分类水平上,3组真菌群落结构组成及丰度差别较大,与黄精根腐病相关的病原菌镰刀菌属Fusarium存在于所有样品中,而有益菌木霉菌属在健康组和空白组土样的丰度显著高于患病组土样。结论黄精根腐病株和健康株根际土壤微生物组成具有显著性差异,对于探究黄精根腐病发生的微生态机制和改良种植黄精土壤微生物具有理论指导作用。     

基于斑马鱼模型的三峡阳菊叶水提物安全性评价研究

目的 以斑马鱼为模型,评价三峡阳菊叶水提物（WELTGY）对斑马鱼整体形态以及心脏、肾脏和肝脏等主要脏器的影响。方法 用不同浓度（2.8、3.4、3.8、4.8、5.8、6.8 mg/mL）的WELTGY处理受精后72 h（72 hpf）的斑马鱼,处理24、48 h后,观察斑马鱼死亡率、畸形率和整体形态;显微镜下观察斑马鱼心脏形态并拍照,记录心率,使用ImagePro Plus 5.1测量斑马鱼静脉窦-动脉球（SV-BA）距离,评价WELTGY对斑马鱼心脏的影响;显微镜下观察拍照记录各组斑马鱼是否有眼水肿,判断WELTGY对斑马鱼肾脏的影响;用WELTGY处理肝脏标记绿色荧光的转基因斑马鱼Tg（LFABP：EGFP）,荧光显微镜下拍照记录斑马鱼肝脏荧光情况,评价WELTGY对斑马鱼肝脏的影响。结果 与对照组比较,2.8 mg/mL及以下浓度的WELTGY对斑马鱼的整体形态、心脏、肾脏和肝脏无明显影响;3.4 mg/mL以上浓度的WELTGY导致斑马鱼鱼鳔减小,对心脏、肝脏、肾脏无影响;4.8 mg/mL以上浓度的WELTGY导致斑马鱼心率显著降低（P<0.01）,对心脏SV-BA距离、肾脏、肝脏荧光强度和荧光面积无明显影响。结论 WELTGY毒性微弱,对斑马鱼幼鱼几乎没有毒性;高浓度下会导致轻微心脏毒性,在家禽养殖业的使用中有必要合理控制用量。     

传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究

建立稳定、可靠的金钱草ISSR-PCR反应体系,为金钱草遗传多样性分析、优良品种选育、药材分子鉴定奠定基础。该研究在7水平单因素实验的基础上,采用L₁₆（4⁵）正交试验设计,应用SPSS 19.0进行方差分析,对影响反应体系的5个主要因素在4个水平上进行优化。利用优化的反应体系,筛选引物最适退火温度,以23份不同产地金钱草材料检测体系稳定性。结果显示模板DNA,引物,dNTP,Mg²⁺,Taq酶5个因素对金钱草ISSR-PCR反应结果均有极显著影响,影响大小依次为引物>Taq酶>模板DNA>Mg²⁺>dNTP,确定最优反应体系为总体积25 μL,模板DNA 60 ng,引物0.3 μmol·L^-1,dNTP 0.2 mmol·L^-1,Mg²⁺ 1.8 mmol·L^-1,Taq酶1.25 U。经不同产地样品检测,该优化体系稳定、可靠。该研究为其他物种ISSR-PCR体系的优化提供参考。     

肾纤维膜剥脱加囊肿去顶减压治疗成人型多囊肾

肾纤维膜剥脱加囊肿去顶减压治疗成人型多囊肾费继光，任风鸣，范小玲，李启中，宋少康，石红林，丁德刚，单磊，姬彤宇我院自１９８３～１９９３年，采用囊肿去顶减压的方法将肾纤维膜完全剥脱，为６２例成人型多囊肾患者进行了手术治疗，效果满意。现报告如下。１陆床资...     

氮磷钾配比对白及生长和产量的影响

目的优选不同氮磷钾配比对白及生长及产量的影响,为白及人工施肥提供技术依据。方法采用L_9(3~3)正交试验设计,通过田间小区试验,研究不同氮磷钾配比对白及植株生长、产量和经济效益的影响。结果不同水平的N、P、K施肥量明显增加白及的株高、茎粗、叶片长、叶片宽和产量,综合考虑生长和产量两方面,其影响程度为NKP,N、P、K三因素各水平对产量影响顺序是N_(225)N_(450)N_0,P_(75)P_(150)P_0,K_(300)K_(150)K_0。白及施用不同配比氮磷钾肥后,对产量的影响均达到极显著水平(P0.01),以处理5 (N_(225)P_(75)K_(300))效果最好,较处理1(N_0P_0K_0)增产124.85 kg·hm~(-2)。白及产量随氮、磷、钾肥施用量的增加而增加,但肥料施用过多,产量反而下降。结论合理的氮磷钾配比能促进白及生长、提高产量和增加效益,在该试验条件下,以处理5(N_(225)P_(75)K_(300))效果最好。