毛霉目病原真菌的实验室鉴定及体外抗真菌药物敏感 性分析

摘要:目的以分子测序为参考 ,评估形态学、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对毛霉目真菌的鉴定能力,分析毛霉目真菌对两性霉素B、泊沙康唑的体外药敏特点。方法收集 2018年1月-2022年2月广东省人民医院25例毛霉病住院患者标 本,进行镜检并对培养的茵落行形态学鉴定、质谱鉴定、分子测序和体外药敏试验。结果KOH 湿片法阳性率(76%)高于革兰染色法(32%),差异有统计学意义(P<0.05);形态学鉴定可将68%的菌株鉴定到属水平,3株鉴定错误,2株无法鉴定;将所 有菌株进行质谱鉴定,单用IVD和RUO数据库鉴定率分别为56%和44%,两库联合可将鉴定率提高为64%。毛霉目真菌对两性霉素B的抑制50%菌株生长的最小抑菌浓度(MIC3o)为1μg/mL,根霉属相比其他属对两性霉素B表现出较高的MIC 值,其中2株MIC>32 μg/mL,另2株MIC为8 μg/mL;根霉属对泊沙康唑的MICso为0.5 μg/mL,横梗霉属MICgo为4 μg/ mL,小克银汉霉属MICg0为2 μg/mL,有部分菌株表现出较低MIC值,同样亦有部分菌株对泊沙康唑表现出较高的MIC 值。结论 将传统镜检、培养与质谱技术和分子技术相结合,尽量将毛霉目真菌准确鉴定到种,并积极开展毛霉体外药敏试验,可为临床治疗提供参考依据。     

医学高校师生对PBL的评价与期望对比研究

目的进行医学高校师生对PBL法的评价与期望对比研究。方法以某医学高校师生为研究对象,以问卷调查数据为基础,进行医科院校师生对于现行PBL法的教学课堂评价与期望的对比研究。结果高校师生对PBL法的评价与期望存在部分差异,学生对该教学法的实施普遍期待,但超过半数学生不知道如何参与;部分教师表示其在实际操作中可能存在问题与局限;在激发学生学习兴趣与主动性方面,几乎所有教师都认同该教学方法,但大部分学生却怀有不确定或中立态度。尽管存在差异,但师生们对PBL法提高学生自主学习能力等方面的优点都表现出一致性赞同。结论 PBL教学法在提高学生综合素质与课堂质量方面的显著成效符合新时期医学高校师生的期望,但也不能忽视其在实际操作中可能存在的困难与局限;教师可在今后传统课堂模式中逐渐融入PBL教学法,在实践中加以改良,达到高效完成课堂教学的目的。     

患儿分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌耐药基因分析

目的分析临床患儿分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性和耐药基因。方法收集2015年6月-2018年6月医院的住院患儿分离非重复的CRKP 29株,对最小抑菌浓度(MIC)进行检测,PCR扩增常见的碳青霉烯类耐药基因(bla_(KPC),bla_(SME),bla_(GES),bla_(VIM),bla_(IMP),bla_(NDM),bla_(OXA-48))、超广谱β-内酰胺酶耐药基因(bla_(SHV),bla_(TEM),bla_(CTX-M-1group),bla_(CTX-M-2group),bla_(CTX-M-8group),bla_(CTX-M-9group))、头孢菌素酶耐药基因(bla_(MOX),bla_(CIT),bla_(DHA),bla_(ACC),bla_(EBC),bla_(FOX))。结果29株CRKP对美罗培南和亚胺培南完全耐药,对阿米卡星,米诺环素,左氧氟沙星,氨曲南的耐药率分别为3.45%,10.34%,17.24%,93.10%,对头孢类和酶抑制类药物均耐药,对多黏菌素和替加环素均敏感。29株CRKP均携带碳青霉烯类耐药基因,以bla_(NDM-5)基因阳性率最高为51.72%(15/29),bla_(NDM-1)基因阳性率为31.03%(9/29),bla_(KPC-2)基因阳性率为17.24%(5/29),1株既携带bla_(KPC-2)又携带bla_(IMP-4)。结论本地区分离的患儿CRKP菌株均为多药耐药菌,患儿临床分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药的机制主要是产NDM-5型碳青霉烯酶。     

检出3株携带新型基因盒组合形式Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌

目的 研究整合子介导铜绿假单胞菌耐药及多重耐药的机制。方法 整合子PCR法扩增整合子的可变区;联合限制性片段长度多态性分析（RFLP）和DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因。结果 98株南京地区铜绿假单胞菌中有35株（35．7％）整合子可变区扩增阳性,扩增片段大小1．0-4．0kb。共检出6种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类、β-内酰胺类和磺胺类抗菌药耐药的基因,其中有3例为新型基因盒组合形式,包括aadA6-orfD、aadB-blaP1和aadB-aac（6′）-Ⅱa-blaCARB-8,Genbank基因号分别为DQ 091179、DQ 141316和DQ 288251。结论 整合子参与了铜绿假单胞菌的耐药和多重耐药,主要携带氨基糖苷类耐药基因,首次报道了3种携带新型基因盒组合形式的Ⅰ类整合子。     

血清甲基化SFRP2在上消化道肿瘤诊断中的可行性

目的:探究结直肠癌(colorectalcancer,CRC)癌甲基化分泌卷曲相关蛋白2(secretedfrizzledr e l a t e dp r o t e i n2, S F R P 2)在上消化道肿瘤诊断中的可行性。方法:收集4 1例上消化道肿瘤患者和36例无相关胃肠疾病患者的血清,采用基于甲基化特异性PCR的方法检测甲基化的SFRP2(mSFRP2)。结果:SFRP2的灵敏度在上消化道癌中为68.3%,在食管癌中为60.0%,在胃癌中为71.0%。特异性为77.8%,提示SFRP2的甲基化状态与患者年龄、性别及肿瘤属性(原发性或继发性)之间不存在相关性(P0.05)。此外,随着肿瘤大小和病理分化程度的增加,SFRP2甲基化阳性率也逐渐增加。结论:CRC甲基化标志物SFRP2用于上消化道肿瘤的筛查是可行的,尤其在胃癌检测方面。SFRP2的甲基化检测将是一个新的很有前景的非侵入性的上消化道肿瘤筛查工具。     

发现大肠埃希菌喹诺酮耐药株gyrA基因新亚型和aac（6′）-Ⅰ b-Cr、mdfA基因

目的 了解大肠埃希菌(E.coli)对常用抗菌药物的耐药性及喹诺酮类DNA旋转酶基因、多药外排基因及氨基糖苷类修饰酶基因（AMEs）的存在情况。 方法 收集2006年1月~2008年10月本院临床标本分离的E.coli 60株,用K-B法检测细菌对16种抗菌药物的敏感性,用PCR及测序技术分析6种喹诺酮类基因(gyrA、qnrA、qnrB、qnrS、qepA、mdfA)和1种AMEs基因aac(6′)-Ⅰ b。 结果 60株菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为78.4%（47/60）;55株菌存在gyrA基因突变,其中3株菌gyrA与美国NCBI中已登录的gyrA基因序列不同,为新亚型;mdfA基因均阳性;对9株aac(6′)-Ⅰ b基因PCR阳性产物进行测序,证实5株携带aac（6′）-Ⅰ b-Cr双功能酶基因。 结论 gyrA基因突变是E.coli对喹诺酮类药物最主要的耐药机制,耐喹诺酮类药物的E.coli株中发现aac（6′）-Ⅰ b-Cr基因和gyrA新亚型,E.coli检出mdfA基因为中国大陆地区首次报道。     

亲代谢型谷氨酸受体配基对帕金森病大鼠的神经保护作用

目的探讨PD模型大鼠黑质致密部亲代谢型谷氨酸受体(mGluRs)的蛋白表达及其配基的药物治疗作用。方法6-羟基多巴单侧黑质损毁法建立大鼠PD模型。免疫组织化学法观察黑质致密部mGluR1a,2/3,4,5,8和酪氨酸羟化酶(TH)的表达,并用Nissl和Fluoro-JadeB荧光双染法在激光共集焦显微镜下观察退行性变的神经元。结果6-羟基多巴导致损毁侧mGluRs和TH免疫活性下降。Ⅰ组mGluRs拮抗剂和Ⅱ,Ⅲ组mGluRs激动剂能使治疗组相应的受体表达升高,尤其是mGluR5,mGluR2/3和mGluR4的蛋白表达。其中,以APDC组(Ⅱ组mGluRs激动剂)的保护效应最为显著。5个非假手术组退行性变细胞与正常细胞的比值(D/V)均有不同程度地增高。结论mGluRs可能参与PD的发生、发展过程。Ⅰ组mGluRs拮抗剂和Ⅱ组mGluRs激动剂具有一定的神经保护功能。     

亲代谢型谷氨酸受体配基对帕金森病大鼠的神经保护作用

目的 探讨PD模型大鼠黑质致密部亲代谢型谷氨酸受体(mGluRs)的蛋白表达及其配基的药物治疗作用。方法 6-羟基多巴单侧黑质损毁法建立大鼠PD模型。免疫组织化学法观察黑质致密部mGluRla，2／3，4，5，8和酪氨酸羟化酶(TH)的表达，并用Nissl和Fluoro-Jade B荧光双染法在激光共集焦显徽镜下观察退行性变的神经元。结果 6-羟基多巴导致损毁侧mGluRs和TH免疫活性下降。I组mGluKs拮抗剂和Ⅱ，Ⅲ组mGluKs激动剂能使治疗组相应的受体表达升高，尤其是mGluR5，mGluB2／3和mGluR4的蛋白表达。其中，以APDC组(Ⅱ组mGluRs激动剂)的保护效应最为显著。5个非假手术组退行性变细胞与正常细胞的比值(D／V)均有不同程度地增高。结论 mGluRs可能参与PD的发生、发展过程。I组mGluRs拮抗剂和Ⅱ组mGluRs激动剂具有一定的神经保护功能。     

小儿甲状腺癌的手术治疗

目的讨论多功能保留性颈淋巴结清扫术在小儿分化型甲状腺癌手术中的运用.方法通过回顾近7年来对6例患儿实施的多功能保留性颈淋巴结清扫,分析术后患儿的围手术期恢复、并发症及预后情况.结果 6例患儿术后均顺利恢复,随访5例至今无复发,无疤痕挛缩,无胸锁乳突肌纤维化,3例患儿有程度不等耳后皮肤麻木,颈部、肩部外形基本满意.结论通过严格掌握颈淋巴结清扫适应证,精心切口选择,细致手术操作,多功能保留性颈淋巴结清扫术对小儿甲状腺癌的治疗有突出优越性.     

超声引导下PTGD在低位恶性梗阻性黄疸疾病中的应用

目的讨论超声引导下经皮经肝穿刺胆囊置管引流术(PTGD)在低位恶性梗阻性黄疸疾病中的应用价值。方法对2006年3月—2007年3月在我院超声科所施行的8例PTGD术进行回顾性分析。结果8例PTGD术均获得成功。术中超声均能较清晰地显示穿刺针穿入胆囊床的位置、导丝进入胆囊的深度,导管在胆囊中的位置。并发症主要有:疼痛、发热、渗血、引流管阻塞等。结论在低位恶性梗阻性黄疸疾病的诊治中,超声引导下PTGD具有实时、准确,置管快捷、方便等优点,提高患者的生活质量,延长了患者的生存时间,同时为外科手术提供了必要的准备和条件,但也存在携带不便等缺点。