抗地高辛人源小分子抗体的获取

目的 从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗地高辛抗体,并构建双体抗体.方法 以固相化的地高辛对构建的大容量噬菌体抗体库进行筛选,3～4轮后挑取克隆用酶联免疫吸附测定方法鉴定其特异性,对抗地高辛阳性抗体克隆进行DNA指纹分析及测序分析.选取活性好的克隆进行改造,构建双体抗体.结果 在抗体库的筛选过程中可见到明显的富集现象,获得了4株可与地高辛特异性结合的人源抗体,经DNA指纹分析及测序分析证明为不同克隆基因,阳性克隆的可变区基因轻链均属于λ第一亚群,重链分别属于第三和第四亚群.选取4号克隆进行基因改造,构建双体抗体表达载体,获得了活性较好的双体抗体.结论 利用噬菌体抗体技术获得了人源性抗地高辛抗体,并改造成应用前景较好的双体抗体,可能为临床诊断及治疗洋地黄类药物中毒提供具有实用价值的人源抗体.     

二氮嗪对大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡的影响

目的研究二氮嗪开放线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡的影响。方法采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将20只大鼠随机分成4组,假手术组、缺血组、缺血＋二氮嗪治疗组和缺血＋二氮嚷＋MitoK（ATP）通道特异性抑制剂5-HD组。观察各组凋亡细胞数和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的变化。结果与缺血组比较,二氮嗪使凋亡细胞数明显减少（83．2±9．04 vs 123．96±13．45）,Bcl-2表达增高（0．17±0．01 vs 0．13±0．01）,Bax表达下降（0．15±0．02 vs 0．20±0．03）,差异具有显著性（P＜0．05）。5-HD能取消这些作用（P＜0．05）。结论局灶性脑缺血再灌注损伤时,二氮嗪能通过上调半暗带区Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少神经元凋亡,对脑缺血损伤起保护作用。     

商陆属植物根有效成分含量比较

采用比色法测定并比较了国产４种商陆属ｐｈｙｔｏｌａｃｃａ植物中主要有效成分商陆总皂甙和商陆多糖的含量，结果表明多药商陆Ｐ．ｐｏｌｙａｎｄｒａ Ｂｔａ．总皂甙含量最高，达６．２４％；多糖以商陆Ｐ．ａｃｉｎｏｓａ Ｒｏｘｂ。最，１０．５７％。本实验结果为开发本属植物资提供了依据。     

胃炎合剂为主治疗慢性胃炎658例分析

慢性胃炎是消化内科常见病之一。目前治疗药物和方法较多,各家报道效果不一,如何合理用药,提高疗效,减少耐药发生是治疗慢性胃炎成败的重大课题。我们自2000年3月至2004年8月对经胃镜及病理确诊的慢性胃炎病人658例,全部采用胃炎合剂为主的综合治疗,效果满意,现报道如下:1临床资料1.1一般资料658例中男423例,女235例,年龄17～86岁,平均45.5岁。病史最短者6个月,最长达46年。临床表现为:上腹饱胀,嗳气541例(82.2%),纳差607例(92.2%),烧心、反酸236例(35.9%),口苦127例(19.3%),上腹隐痛502例(76.3%),恶心、呕吐105例(16.0%),消瘦、贫血62例(9.…     

泼尼松联合环孢素A治疗干燥综合征合并血小板减少的临床观察

Thirty patients with confirmed primary sjogren syndrome and thrombocytopenia during January 2002 and December 2007 were investigated.All the participants received 0.5 mg·kg-1·d-1 Prednisone and 100 ms/d CosA for 1 year.Clinical symptoms and the levels of white blood eell.platelet count,erythrocyte sedimentation rate,liver function,immunoglobin,and rheumatoid factors were recored before and after the treatment.After one-year follow.up,platelet count was elevated(t=11.4179,P< 0.01).There was no significant change in erythrocyte sedimentation rate.The concentrations of immunoglobin and rheumatoid factors were significantly decreased at 1 year(t=5.4222,P<0.01;t= 9.2857.P<0.01).Prednisone plus CosA could effectively treat primary sjOgren syndrome combined with thrombocytopenia and result in fewer side effects.     

肾移植术后并发恶性肿瘤10例

我院于1991年至2006年12月共行424例肾移植，其中汉族309例，维吾尔族（维族）57例，哈萨克族（哈族）44例，俄罗斯族5例，回族4例，蒙古族2例，锡伯族2例，朝鲜族1例。424例肾移植术后并发恶性肿瘤10例，其中汉族4例，回族2例，维族2例，哈族2例。患者中女性5例，男性5例，年龄17～61岁，平均47．5岁，均为第1次接受肾移植，供者均为汉族，供、受者血型相符。术后免疫抑制方案为：     

用蛋白Ⅷ在噬菌体表面展示抗体分子效果的观察

目的 观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ（cpⅧ）和次要外壳蛋白Ⅲ（cpⅢ)在噬菌体表面呈现效果的差异。方法 分别构建通过cpⅢ或cpⅧ展示抗乙肝表面抗原（HBs)Fab,ScFv和抗角蛋白（Ker)Fab的表达载体，制备噬菌体抗体，比较其抗原结合活性和Fab呈现水平。用多种方法尝试提高cpⅧ介导的噬菌体展示效果。结果 cpⅧ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体（Fab和ScFv)的展示效果均低于cpⅢ的展示，增加cpⅧ－Fab对野生型cpⅧ的表达比例，试用不同菌株，在Fab和cpⅧ之间插入间隔序列及换用控制更为严密的启动子等,匀未能改善cpⅧ介导的噬菌体展示。结论 以前所报道的通过cpⅧ多价展示Fab段不是普遍存在的现象，对有些抗体基因不能达到多价展示。     

抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体的原核表达及其生物活性

目的：研制抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa Fab抗体。方法：通过问接免疫荧光试验和血小板聚集抑制试验，选取鼠源抗血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa单克隆抗体(mAb P140)。从分泌该mAb的杂交瘤细胞株(P140)中，克隆到抗体轻链基因和重链Fd段基因，构建原核表达重组质粒p3MH／P140x-Fd，并在XLI-Blu菌株中进行表达。采用钴亲和层析法对P140 Fab抗体进行纯化，用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法，对P140 Fab抗体进行检测，并通过血小板聚集抑制试验，观察P140 Fab抗体的抗栓活性。结果：SDS-PAGE和Western blot表明，纯化的P140Fab抗体的相对分子质量(Mr)约为47000。ELISA的结果显示，P140 Fab抗体可与人血小板特异性结合。在体外ADP诱导的血小板聚集试验中，P140 Fab抗体对血小板聚集的抑制作用成剂量依赖性，IC50的平均值为16．85mg/L。结论：成功地研制出具有抗栓活性的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的Fab抗体。     

BPI N端优势抗原表位的模拟合成及其人源抗体的筛选

杀菌／渗透增强蛋白（bactericidal／permeability increasing protein，BPI）是存在于人及哺乳动物多形核白细胞中的一种阳离子抗菌蛋白。研究证实BPI功能性氨基端片段（rBPl2。／rBPl23）具有与天然BPI55，相同的生物学活性，它们不仅能广谱杀伤G^-菌还能有效中和内毒素。     

通气治疗对海水淹溺肺水肿兔肺上皮细胞中酶活性的影响

通气治疗对海水淹溺肺水肿兔肺上皮细胞中酶活性的影响王琰董文度袁驾南徐根兴张敏华刘虹赵增荣（海军医学高等专科学校细胞生物研究室）本实验选用１０只新西兰纯种一级雄性兔（平均体重为２．５６±０．１０ｋｇ），进行肺内海水灌注复制海水淹溺肺水肿（ＰＥ－ＳＷＤ）...