基于网络药理学结合GEO数据库多芯片分析法探讨糖痹外洗方治疗糖尿病足的作用机制

目的 基于网络药理学结合GEO数据库多芯片研究糖痹外洗方治疗糖尿病足相关疾病的潜在治疗靶点及可能作用机制。方法 采用TCMSP、TCMIP、TCMID、HERB数据库筛选糖痹外洗方化学成分及作用靶点。在GEO数据库中检索糖尿病足及相关疾病差异表达基因,汇总得到糖尿病足靶点。使用微生信在线作图平台对疾病靶点和化学成分靶点取交集,并构建交集靶点蛋白互相作用（PPI）网络。采用Metascape平台工具对交集靶点进行基因本体（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。根据分析结果,选取度值排名靠前的化合物和蛋白,使用AutoDock Vina进行分子对接。结果 共得到糖痹外洗方活性成分99个,成分靶点427个,糖尿病足靶点2 217个,交集靶点64个。关键靶点蛋白主要有表皮生长因子受体（EGFR）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARG）、环加氧酶2（PTGS2）、Janus激酶2（JAK2）、基质金属蛋白酶1（MMP1）等,关键成分有槲皮素、山柰酚、木犀草素等。GO功能富集分析得到665个生物过程、30个细胞组分、80个分子功能。KEGG通路富集分析共得到100条通路信息,主要有脂质与动脉粥样硬化通路、Janus激酶-信号传导及转录激活因子1（JAK-STAT）信号通路、磷脂酰肌醇-3-羟激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）信号通路、糖尿病并发症晚期糖基化终末产物/AGEs受体（AGE-RAGE）信号通路、核因子-κB（NF-κB）通路等。分子对接结果显示,地奥司明、鞣花酸、木犀草素、杨梅素和槲皮素与EGFR、JAK2、MMP1等关键靶点有较好的结合能力。结论 糖痹外洗方具有多成分、多靶点等特点,其可能主要作用于糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、脂质与动脉粥样硬化通路和JAK-STAT信号通路等的多个关键靶点,从而发挥治疗糖尿病足相关疾病的效果。     

阿魏侧耳多糖酶水解制备工艺研究

目的：采用蛋白酶水解法提取制备阿魏侧耳多糖。方法：采用硫酸一苯酚显色测定多糖的含量,采用UV法测定蛋白质的含量。研究不同蛋白酶在不同条件下对阿魏侧耳多糖提取率和除蛋白效果的影响。结果：最佳酶底比为8mg·g^-1,温度60℃,最适pH值为6．0,最佳酶解时间为90min。结论：采用蛋白酶水解法可以制得纯度很高的阿魏侧耳多糖。     

阿魏侧耳多糖酶水解制备工艺研究

目的:采用蛋白酶水解法提取制备阿魏侧耳多糖。方法:采用硫酸-苯酚显色测定多糖的含量,采用UV法测定蛋白质的含量。研究不同蛋白酶在不同条件下对阿魏侧耳多糖提取率和除蛋白效果的影响。结果:最佳酶底比为8mg·g-1,温度60℃,最适pH值为6.0,最佳酶解时间为90min。结论:采用蛋白酶水解法可以制得纯度很高的阿魏侧耳多糖。     

阿魏菇多糖对整体荷瘤小鼠肿瘤和免疫作用的实验研究△

目的:研究阿魏菇多糖的抗肿瘤作用和免疫作用。方法:采用H22荷瘤小鼠,考察阿魏菇多糖对H22荷瘤小鼠瘤重和抑瘤率的影响,并考察阿魏菇多糖对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响。结果:阿魏菇多糖可以提高H22荷瘤小鼠的抑瘤率,增加荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,并显著增强DNFB诱导的小鼠DTH的作用。结论:阿魏菇多糖对H22肉瘤具有较强的抑制作用,并显著增加荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数。阿魏菇多糖能显著增强DNFB诱导的小鼠DTH的作用。     

催乳素对老年大鼠细胞免疫功能的影响

目的　观察催乳素 (prolactin,PRL)对老年大鼠 T淋巴细胞功能的影响。方法　采用 MTT法测定 PRL对脾淋巴细胞增殖反应和IL- 2活性的影响。结果　 PRL能提高 3月龄青年大鼠和 2 4月龄老年大鼠脾淋巴细胞增殖能力和 IL - 2分泌量 ,但 PRL对老年大鼠脾淋巴细胞的增殖指数 (Stimulation Index,SI)和产生 IL- 2的能力均低于青年大鼠 (P<0 .0 1 )。结论　 PRL在体外能提高老年大鼠 T淋巴细胞增殖和 IL - 2生成 ,但其作用低于青年大鼠。     

阿魏菇多糖对整体荷瘤小鼠肿瘤和免疫作用的实验研究

目的：研究阿魏菇多糖的抗肿瘤作用和免疫作用。方法：采用H22荷瘤小鼠,考察阿魏菇多糖对H22荷瘤小鼠瘤重和抑瘤率的影响,并考察阿魏菇多糖对二硝基氟苯（DNFB）诱导的小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响。结果：阿魏菇多糖可以提高H22荷瘤小鼠的抑瘤率,增加荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,并显著增强DNFB诱导的小鼠DTH的作用。结论：阿魏菇多糖对H规肉瘤具有较强的抑制作用,并显著增加荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数。阿魏菇多糖能显著增强DNFB诱导的小鼠DTH的作用。     

神秘果提取物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血糖及脂代谢的影响

目的:研究神秘果提取物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血糖及脂代谢的影响。方法:采用一次性腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,分别用神秘果提取物0.10、0.05、0.025 g/kg三个剂量灌胃给药5周,测定其血糖、糖耐量、血脂等血清生化指标。结果:连续服用神秘果提取物可以明显降低糖尿病大鼠的血糖,有效改善糖耐量水平,调节血脂含量。结论:该研究表明神秘果提取物对糖尿病大鼠有保护作用。     

黄芩苷对孤养小鼠的抗焦虑作用

目的研究黄芩苷(baicalin)对孤养小鼠的抗焦虑作用。方法制备孤养小鼠模型,应用小鼠高架十字迷路实验、小鼠明暗箱实验、小鼠孔板实验和隔离小鼠攻击实验考察黄芩苷对孤养小鼠的抗焦虑作用。结果黄芩苷可以对抗孤养小鼠在高架十字迷路实验、明暗箱实验和孔板实验中所表现出的焦虑样行为,在隔离小鼠攻击实验中表现抗攻击作用。结论黄芩苷对孤养小鼠有显著的抗焦虑作用。     

土龙粉对小鼠免疫功能的影响

目的探讨土龙粉对小鼠免疫功能的影响。方法用土龙粉灌胃小鼠7d。通过二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应(DTH)试验,血清溶血素抗体生成实验和碳粒廓清实验考察土龙粉对小鼠免疫功能的影响。结果土龙粉能明显增加小鼠胸腺、脾的重量,促进DTH作用,显著提高血清溶血素水平,促进单核-巨噬细胞吞噬能力,加快碳粒廓清速率。结论土龙粉对小鼠的免疫功能有明显的增强作用。     

阿魏侧耳多糖抗癌作用机理研究△

目的:阿魏侧耳(阿魏菇)多糖(Pleurotus ferulae polysaccharide,PFP)抗宫颈癌作用的机理研究。方法:MTT法、中性红比色法和Griess法。结果:灌胃给药500 mg.kg-1的阿魏菇多糖可抑制小鼠宫颈癌U14移植瘤的生长,抑瘤率达到39%,临床抗宫颈癌药顺铂的抑瘤率为46.5%,阿魏菇多糖与顺铂共同作用时,抑瘤率达到65.1%;但是在体外实验中,不同浓度阿魏菇多糖分别作用于人宫颈癌HeLa和人乳腺癌MCF-7细胞不同时间后,却不能抑制两种细胞的生长;在5μg.mL-1的脂多糖刺激下,阿魏菇多糖不能促进脾淋巴细胞的增殖;不同浓度的阿魏菇多糖作用于腹腔巨噬细胞24 h,能使腹腔巨噬细胞的吞噬能力显著增强,并且呈现明显的剂量依赖性,与此同时阿魏菇多糖也促进了腹腔巨噬细胞的增殖,但是却不能刺激腹腔巨噬细胞释放NO。结论:阿魏菇的抗宫颈癌机制可能是通过促进小鼠机体免疫功能而实现的。