牛磺酸对大鼠脑创伤凝血状态影响的研究

目的应用血栓弹力图(TEG)评价牛磺酸(taurine)治疗脑创伤(TBI)SD大鼠的血液凝固状态变化情况。方法 SD大鼠随机分为假手术组、TBI组、牛磺酸治疗组(TAU组)。TBI组和TAU组用液压脑损伤打击仪建立重型TBI模型(左脑打击)。造模成功后即刻从尾静脉给药,假手术组和TBI组给予相同剂量的生理盐水。牛磺酸治疗组给予牛磺酸治疗(给药量为200mg/kg)。每组动物连续给药7天,第8天从颈总静脉及腹主动脉取血,用TEG测量各组大鼠血液凝固情况。结果各组动脉血和静脉血比较:假手术组动脉血达到最大振幅的时间(TMA)、综合凝血指数(CI)与静脉血比较差异有统计学意义;TBI组动脉血反应时间(R)、血凝块的形成时间(K)、α角、最大振幅(MA)、CI与静脉血比较差异有统计学意义。各组静脉血组比较:TAU组静脉血CI值明显高于假手术组和TBI组。结论脑创伤8天大鼠的动脉血与静脉血液凝固状态存在差别,而TAU组则无此现象,这说明牛磺酸可能具有平衡TBI后动静脉血液凝固性的作用,但长时间使用牛磺酸,可能导致血液高凝状态。     

TauT转基因大鼠的构建及鉴定

目的:为研究牛磺酸转运体（TauT）在神经系统疾病中的作用，构建并繁育脑特异性表达TauT转基因模型大鼠（TauT+/-大鼠）。方法:将TAUT cDNA插入脑特异性PDGF启动子下游，构建转基因表达载体，显微注射法建立TAUT转基因大鼠。Genotype鉴定转基因大鼠的基因型。经过配种繁殖和鉴定后，绘制2～8月龄生长曲线、测定各脏器质量、脏体系数和脏脑系数；RT-PCR技术检测TauT+/-大鼠大脑组织中Slc6a6 mRNA基因表达水平；Western blot 检测TauT+/-大鼠在大脑、心、肝组织的TauT蛋白表达，并对TauT+/-大鼠大脑组织进行免疫组化染色和HE染色，IPP软件对免疫组化图像进行处理。结果:成功构建PDGF-Slc6a6表达质粒，得到3只TauT+/-大鼠F0代。经过繁殖和鉴定，与同窝阴性大鼠（TauT-/-大鼠）比较，TauT+/-大鼠大脑组织Slc6a6 mRNA基因表达水平显著升高，大脑、心、肝组织TauT蛋白表达水平没有显著性差异，HE染色和免疫组化结果显示TauT+/-大鼠脑组织海马区和皮层区未见异常，TauT蛋白表达没有显著性差异。结论:成功构建TauT转基因大鼠品系，为后续研究TauT在大脑中的作用提供一种较好的动物模型。     

透明质酸-半乳糖化壳聚糖复合支架与牛磺酸联合治疗脑创伤大鼠的初步研究

目的 探索透明质酸-半乳糖化壳聚糖复合支架（HGC）联合牛磺酸（Tau）对脑创伤（TBI）大鼠的治疗作用.方法 选择成年SD大鼠40只,随机分为假手术组（Sham组）、脑创伤组（TBI组）、透明质酸-半乳糖化壳聚糖复合支架组（HGC组）、透明质酸-半乳糖化壳聚糖复合支架与牛磺酸联合治疗组（HGC-Tau组）,每组10只.TBI、HGC及HGC-Tau组采用液压打击法在大鼠左侧大脑半球制作TBI模型,Sham组仅在相同位置开骨窗,不予打击.HGC组于造模后7d将30μl HGC植入大鼠脑皮质损伤区,HGC-Tau组以同样方法植入相同体积HGC与牛磺酸的混合物.TBI后1、3、7、10、14、21 d进行改良型神经功能评分（mNSS）,其中17～21 d进行Morris水迷宫（MWM）实验.TBI后28 d采用实时定量PCR及免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白质（GFAP）的基因及蛋白表达水平.结果 HGC-Tau组mNSS评分在TBI后14d及21d显著低于TBI组（P＜0.05）,HGC组各时间点评分与TBI组相比,差异均无统计学意义（P＞0.05）,HGC-Tau组与HGC组相比,评分在TBI后14、21 d显著降低（P＜0.05）;HGC-Tau组MWM检测目标象限百分比从创伤后18d开始明显大于TBI组（P＜0.05）,HGC组创伤后21 d目标象限百分比显著大于TBI组（P＜0.05）,HGC-Tau组仅在18、19 d目标象限百分比明显大于HGC组（P＜0.05）;HGC组及HGC-Tau组TBI后28 dGFAP mRNA及蛋白表达量与TBI组相比显著下降（P＜0.05）,且较HGC组,HGC-Tau组下降更加明显（P＜0.05）.结论 单纯使用HGC仅能抑制创伤性脑损伤后胶质细胞增生,对神经功能改善无明显作用.HGC联合Tau治疗可抑制重型脑损伤后胶质细胞增生,改善神经功能,表明生物材料与药物联合治疗脑外伤具有一定的应用前景.     

脑蛋白水解物中多肽组分的高效毛细管电泳分析

目的 利用高效毛细管电泳法比较2种水解方法提纯的脑蛋白水解物中的多肽组分,同时监测进口脑蛋白水解物注射液的多肽组分分布.方法 采用固相萃取法提取脑组织中的多肽成分,以PACE/A5500型高效毛细管电泳仪对进口脑蛋白水解物注射液和本实验室提取的脑组织匀浆物进行比较.结果 进口脑蛋白水解物注射液中多肽成分大部分集中在＞14400区域,本实验室提纯的脑蛋白水解物成分中多肽多集中在相对分子质量6000 ～ 14 400区域,且纯度及含量均较高.结论 高效毛细管电泳法可有效地对脑蛋白水解物注射液中多肽组分进行分析和比较,2种提纯方法对脑蛋白的裂解能力相差不大.     

牛磺酸对重型颅脑创伤大鼠脑线粒体呼吸功能的影响

线粒体是产生能量的重要部位.颅脑创伤使得神经元线粒体电子传递链遭到破坏,氧化呼吸功能受损,引起一系列脑供氧减少的级联反应~([1]).     

以“评分标准”为重点的同质化临床教学平台在全科住院医师规范化培训中的应用探索

全科医师是综合素质较高的复合型医学人才,规范化培训是全科医师合法执业之前必须经历的重要实践过程。规范化培训学员在培训基地的学习和实践、业务水平和个人能力的培养,是提升基本医疗服务的关键所在。培养高素质的全科医师是全科医学发展的基本保障[1],是我国医疗改革的重中之重[2]。加强全科医师规范化培养基地建设和管理,规范培养内容和方法[3],是培养合格全科医师的重要条件。强化训练临床能力的教学环节是全科医师规范化培训基地保证规范化培训学员教学质量的重点和难点。目前教学资源紧缺,带教理念、考核、反馈机制不健全等问题始终存在,如何更好地提高临床带教效率、改进临床教学方法,不断总结经验、探索新的带教手段,让规范化培训学员培训后能尽快独立处理病人,是全科医师规范化培训一直关注的问题。     

亚低温治疗颅脑创伤患者颅内生化代谢动态研究

目的应用微透析技术研究了24例颅脑创伤患者脑细胞间液中葡萄糖(Glu)、乳酸(Lac)、丙酮酸(Pyru)、甘油(Gly)、乳酸/葡萄糖比值(L/G)和乳酸/丙酮酸比值(L/P)的变化规律以及亚低温治疗的影响。方法将微透析导管分别插入患者脑创伤病灶半暗带区、相对正常脑组织区和腹部皮下组织,收集微透析液,灌流速度为0.3μl/min。1管透析液/h。平均收集时间为67.37±21.20h;收集的透析液用生化分析仪测定Glu、Lac、Pyru和Gly。结果(1)亚低温治疗较常温治疗可明显降低患者脑创伤病灶半暗带区GLY,明显升高L/P比值, 而Glu、Lac、Pyru、L/G与常温组无显著性差异;(2)亚低温治疗较常温治疗能显著降低相对正常的脑组织Glu、Lac含量和L/P比值,但对Pyru、L/G、Gly较常温组无显著性差异;(3)亚低温治疗较常温治疗可显著提高Glu含量,降低腹部组织Lac、Gly含量和L/G、L/P的比值,但对Pyru含量无明显调节作用。结论微透析技术提供了一种实时监测颅脑创伤患者脑和皮下组织细胞间液生化指标的手段,亚低温治疗能预防患者近损伤区细胞膜的进一步降解,对未受伤的脑组织和腹部组织具有更好的保护作用,从而防止继发性损害。     

胶束毛细管电动色谱法在血浆硫喷妥钠水平监测中的应用

目的 评价胶束毛细管电动色谱法在血浆硫喷妥钠水平监测中的应用价值.方法 采用胶束毛细管电动色谱法测定25例重型颅脑损伤患者的59份血浆中的硫喷妥钠.结果 硫喷妥钠有效血浆水平为（2.24±0.61） mg/L.硫喷妥钠质量浓度的线性范围为1～ 800 μg/mL,最低检出质量浓度为1.0 μg/mL,平均回收率为99.8％.结论 胶束毛细管电动色谱法为监测血浆硫喷妥钠水平的可靠方法.     

亚低温对颅脑创伤大鼠脑血流量及组织间液乳酸水平的影响

目的 利用微透析技术观察颅脑创伤大鼠伤后2.5h内邻近受伤区侧脑室透析液中乳酸、脑血流量的变化及亚低温治疗效果。方法 28只Wistar雌性大鼠随机分为正常对照组、常温创伤组和亚低温治疗组。亚低温组动物于创伤后用冰袋进行全身降温,在脑温降至30℃并保持1h后,加热复温至37℃。将透析管插入邻近受伤区的侧脑室区,位于前囱后1.5mm,中线旁2.5mm,深度3.5mm;灌流速度为4μl/min,每30min采1管样本,后两组均于收集第2管样本后制作颅脑创伤动物模型,继续透析至2.5h。应用激光多普勒血流仪监测脑血流量的变化。结果 (1)对照组大鼠透析液中乳酸水平在各时限内差异无显著性意义(P>0.05);常温创伤组于伤后1.5h内乳酸水平明显升高,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01);亚低温组经低温治疗后,乳酸水平降低,与其余两组相比差异有显著性意义(均P<0.01)。(2)常温创伤组大鼠,仅在伤后20min时出现脑血流量减少,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05);而其余各时限与对照组比较差异均无显著性意义(P>0.05)。亚低温组经治疗后2h内脑血流量持续降低,与常温创伤组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论 亚低温治疗可降低损伤区周围脑组织血流量,加速大鼠神经细胞对乳酸的代谢,从而起到神经细胞保护作用。