小鼠cbfa1多克隆抗体制备及在骨和牙胚中的表达

目的　制备cbfa1多克隆抗体并进行鉴定和效价分析 ,观察其在骨和牙胚中的表达情况。方法　用自制的融合蛋白免疫新西兰大白兔 ,制备多抗血清 ,提取小鼠牙胚、颅骨和肝脏组织的总蛋白进行westernblot ,同时采用免疫组化染色观察其组织表达特性。结果　cbfa1蛋白在小鼠颅骨和牙胚组织中均有表达 ,在人骨肉瘤细胞系中呈强阳性表达。在免疫组化和westernblot的有效作用滴度分别为 1:40 0和 1:10 0 0。结论　成功地制备了兔抗小鼠cbfa1多克隆抗体     

变形链球菌CH43变链素Ⅰ基因片段的克隆及表达

目的:获得编码变形链球菌CH43变链素Ⅰ前体肽基因片段,并诱导其在不杀伤工程菌的前提下高效表达。方法:用PCR技术从变形链球菌CH43基因库中扩增出编码变链素Ⅰ成熟肽mutA基因片段相应大小的DNA片段,将片段与pMD18 T载体连接后测序。将测序正确的mutA按照BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pProEX,将连接产物转化入E.coliDH5α,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白。以IPTG浓度、A600值、诱导时间各梯度优化表达。结果:PCR获得的mutA序列与GenBank报道的一致(为147bp)。优化了诱导条件使重组载体在E.coliDH5α中高效表达,融合蛋白经SDS PAGE,在相对分子质量为5. 7×103处有特异的蛋白条带,在A600为1. 666时,加入IPTG至终浓度为1. 0mmol/L,诱导6h,目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白量的20%左右。结论:成功克隆变形链球菌CH43变链素ⅠmutA基因片段,并在E.coliDH5α中高效表达。     

人牙周膜细胞体外三维立体培养模型的建立

目的：建立人牙周膜细胞（PDLC）体外三维立体培养模型，初步探讨两种支架材料应用于牙周组织工程的可行性，为进一步研究牙周组织生理病理及牙周组织工程奠定实验基础。方法：组织块法培养人PDLC，传代扩增后，接种于珊瑚和珊瑚转化羟基磷灰石（CHA）两种三维支架上，体外继续培养3d，进行细胞计数和扫描电镜观察。结果：细胞在两种支架材料上均能形成良好贴附并增殖，扫描电镜可见两种支架材料均具有良好的多孔网状结构，细胞在支架材料上生长旺盛，伸展充分。结论：可通过将人PDLC接种到珊瑚或CHA上建立体外三维立体培养模型，珊瑚和CHA均有望成为牙周组织工程的支架材料。     

23例恒牙根管机械预备断针的原因分析和处理

目的：近年来，临床上通过镍钛机用根管器械，采用逐步深入法进行患牙根管预备的病例越来越多，导致根管内断针的病例也在逐渐增多，对这类断针原因进行分析以减少并发症的发生。方法：针对23例近两年来采用Step-down或Crown-down技术进行机械根管预备后所出现的根管内断针进行分析和根管再处理。结果：断针位于根管上、中、下的比率为4：12：7，原因包括：①未按操作规程。②操作的方法不当。③忽视手动器械的作用。④根管冲洗不到位。⑤使用的器械不当。经过处理后，大部分病例通过取出断针或建立旁路的方法完成治疗。结论：不当操作还可导致根管内产生台阶、穿孔或折裂，同时，金属疲劳和扭矩是影响器械寿命的重要因素。通过合理操作，综合运用机械法、手动法甚至超声法的根管预备技术，大多数并发症均可避免。     

下颌切牙根管形态特征的研究

目的 :研究下颌切牙根管的形态特征、数量及变异情况。方法 :采用X线片法拍下颌切牙唇舌向、近远中向X线片 ,观察根管形态、数量、长形下凹与多根管的关系 ,测量管壁厚度。结果 :下颌切牙根管壁的厚度依次为 :舌侧壁 >唇侧壁 >近远中壁 ,中、侧切牙的根管长度分别为 (12 .96± 6.46)mm和 (11.47± 6.3 2 )mm ;中、侧切牙双根管率分别为 3 5 .9%和 2 7.5 % ;多数存在长形下凹者为单根管。结论 :下颌切牙根管壁近远中向薄 ,双根管率高 ;长形下凹的存在与根管数无显著关系。     

牙骨质粘连蛋白可选择性增强牙周细胞向根面移动和附着

从人类牙骨质中分离了一种特殊牙骨质粘连蛋白(CAP),它由牙骨质来源的细胞产生,不与任何已知的粘连蛋白抗体反应,并对矿化的牙根表面、羟基磷灰石、纤维粘连蛋白(FN)有高度亲和力。为阐述CAP的生物学功能及在牙骨质形成中的作用,作者测试了在     

人重组成釉蛋白C端肽在大肠杆菌中的表达及初步纯化

目的 :在大肠杆菌中表达人重组成釉蛋白C端肽 ,并对重组蛋白进行纯化 ,为进一步制备抗人成釉蛋白抗体和功能研究奠定基础。方法 :将编码人成釉蛋白C端肽的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pRSET -A上 ,构建表达质粒 pRSET -A -AMBN ,以大肠杆菌E .coliBL2 1(DE3)为宿主菌进行诱导表达 ,表达产物经镍 -次氮基三乙酸 (Ni -NTA)柱进行亲和层析纯化。结果 :工程菌在IPTG诱导 3h后 ,在SDS -PAGE上出现一条新的蛋白带 ,相对分子量 (Mr)为 5 2× 10 3 ,以可溶形式存在 ,经Ni-NTA柱纯化后获得纯度大于 95 %的人重组成釉蛋白C端肽。结论 :获得Mr为 5 2× 10 3 的人重组成釉蛋白C端肽。     

膝骨性关节炎的超声表现特点及其相关性研究

目的:通过比较膝骨性关节炎患者膝关节肌骨超声表现与膝关节功能障碍、X线表现的相关性,分析膝关节周围软组织炎症在膝骨性关节炎中的病理作用机制。方法:应用横断面研究方法(证据等级为Ⅲ级)。根据病例筛选标准收集整理2016年9月至2017年1月就诊于门诊的膝骨性关节炎患者,采集全部患者膝关节肌骨超声、X线图像,填写Lysholm膝关节功能评价量表。应用Pearson相关系数检验、t检验及秩和检验分析肌骨超声表现与Lysholm评分、X线表现的相关性。结果:共纳入123例膝骨性关节炎患者。膝关节周围软组织炎症在膝骨性关节炎患者中具有较高的发病率(髌下脂肪垫炎81%),并且滑膜厚度、积液深度、半月板膨出程度均超过了正常范围。相关性分析显示:Lysholm功能障碍评分方面,膝关节积液深度与"下蹲"评分呈负相关(r=-0.21,P=0.02),内侧半月板膨出程度与"支撑"评分呈明显负相关(r=-0.26,P0.01),并与Lysholm总分呈负相关(r=-0.19,P=0.04),外侧半月板膨出程度则与"不稳定"评分呈负相关(r=-0.22,P=0.02)。X线表现方面,膝关节内侧间隙狭窄程度与关节积液深度(r=-0.27,P0.001),滑膜增生厚度呈负相关(r=-0.17,P=0.007),与内侧半月板膨出程度呈正相关(r=0.18,P=0.04),与髌韧带止点炎症、髌下脂肪垫炎有相关性(P0.05),外侧关节间隙狭窄程度则与"髌韧带止点炎症"有相关性(P=0.02)。结论:膝关节周围软组织炎症是KOA患者的主要病理表现,并与膝关节功能障碍、骨性结构病变具有显著相关性,通过影响膝关节功能、促进关节软骨破坏从而影响KOA的疾病进程。     

某油库官兵作业相关疾病患病情况调查

为掌握油库官兵作业相关疾病患病情况,进一步加强相应卫生防护,我们对2006-2010年某油库官兵作业相关各类疾病进行了回顾性调查。现分析报告如下。1临床资料