精确测定rhG-CSF产品化学稳定性的RP-HPLC新方法

研究重组人粒细胞集落刺激因子的化学稳定性,需要寻找一种可靠的分析方法用于纯度测定,特别是用于准确测定其氧化产物。采用两种反相色谱柱C4柱和C18柱,探索出了一种新方法,并与《中国药典》2010版和《欧洲药典》EP6.3版,EP6.8版中的有关物质分析方法进行比较研究,通过对不同储藏条件下的样品进行检测,确定了新方法的最佳操作条件,包括柱温60℃、上样体积20~50μL和柱长15 cm,虽然柱长25 cm具有更高的氧化产物检出灵敏度,但是分离度有所下降。C4柱与C18柱相比,具有更好的灵敏度和分离度。还对新RP-HPLC方法进行了方法学验证,如检测限,专属性和耐用性等,该方法优于现行的《中国药典》2010版和《欧洲药典》EP6.8版的有关物质分析方法。     

葡萄糖氧化酶生物传感器的构建和性能研究

目的以固定化葡萄糖氧化酶酶膜构建葡萄糖生物传感器,并对其性能进行评价。方法优化载体及戊二醛交联固定化条件,制备性能良好的葡萄糖氧化酶酶膜,研究固定化酶的性能并用于构建葡萄糖传感器。结果固定化葡萄糖氧化酶的最适催化温度为40℃、pH为7.0;葡萄糖生物传感器的响应时间小于20 s,在0～1.5 g·L-1葡萄糖浓度范围内有良好的线性,具有很强抗干扰和稳定性。结论该葡萄糖生物传感器性能良好,可用于生物样品中葡萄糖测定。     

重组大肠杆菌产番茄红素的研究进展

番茄红素是一种重要的类胡萝卜素,作为一种强抗氧化剂,具有重要的药用价值。随着番茄红素合成途径的阐明及分子生物学技术的发展,运用基因工程手段生产番茄红素越来越受到研究者的青睐。本文综述了利用重组大肠杆菌生产番茄红素的研究情况和最新进展。     

循环筛选法在除虫链霉菌诱变育种中的应用

考察了诱变因素对除虫链力的产量变异效应，从选择了４种有效的诱变处理方式，并应用于该菌的诱变育种。通过引入循环筛选新方法，仅经４轮诱变筛选程序，得到了３株ａｖｅｒｍｅｅｔｉｎ高产菌，其中ＩＰ８４２突变株在２７℃经５ｄ摇瓶 ａｖｅｒｍｅｅｔｉｎＢ１ａ效价可达４２１ｍｇ／Ｌ，并具有较好的遗传稳定性。     

阿弗菌素研究进展

1976年美国Merck公司研究者从一株来源于日本的链霉菌(Straptomyces avermi-tilis MA-4680)发酵液中发现了一族结构相似的化合物,称为阿弗菌素(avermectin,AVM).随后的研究表明,它们是迄今发现的最有效的杀昆虫剂、杀螨剂和杀寄生虫剂之一,对防治人、畜及农林作物的多种寄生虫和昆虫的危害有着重要的意义.经过多年的努力,20世纪80年代初完成了工业化生产,而且对AVM的各个方面(如分子结构、生物合成、结构修饰、生物活性及生产水平提高等)都展开了深入的研究,形成了一个重要的     

人β-防御素2在大肠杆菌中的高效表达和纯化

目的：研究具有生物学活性的人防御素2（HBD2）多肽在大肠杆菌中的原核高效表达的可行性及融合表达蛋白的分离纯化技术。方法：PCR扩增不合前导序列的HBD2成熟肽的编码框全长的cDNA片段（smHBD2-cDNA），利用BglⅡ和BamHⅠ同尾酶构建多拷贝串联的nsmHBD2-cDNA的克隆载体，利用NcolⅠ和HindⅢ限制性内切酶构建融合表达载体pET32-nsmHBD2-cDNA，在大肠杆菌中BL21（DE3）中诱导表达含HBD2的融合蛋白，SDS-PAGE分析产量。可溶蛋白经亲和层析、肠激酶酶切、离子交换层析等方法分离、纯化HBD2多肽。采用液体培养法，测定重组人β防御素2对大肠杆菌的抑菌活性。结果：构建了n为1、2、4或8倍的多拷贝串联nsmHBD2-cDNA表达载体，1、2和4倍smHBD2-cDNA的可溶蛋白比例分别为52％、48％和31％；而8倍HBD2-cDNA几乎不合可溶蛋白，目标蛋白以包含体形式表达，集中在不可溶部分。重组HBD2对E．coli K12 D31有较强的抑制作用，在终浓度约为0．4至0．5μg／ml时，90％细胞的生长被抑制。结论：采用融合表达、多拷贝串联表达方式，可增加产物长度以弱化蛋白酶的降解作用，也减弱了目标蛋白产物对宿主的毒性；适当的多拷贝串联基因可以提高HBD2的产量，但拷贝数过高会影响重组蛋白表达产量，且易形成不溶蛋白；在大肠杆菌中可达到具有生物学活性的HBD2多肽的原核高效表达。     

中药决明子中蒽醌类活性成分的生化研究进展

综述了中药决明子中蒽醌类活性成分的提取与分离、定性与定量分析、化学成分、药效与生物活性及其机理等研究状况，为该味药食共用的天然产物的进一步研发提供参考。     

浅谈如何强化药剂科的麻醉药品管理工作

在药剂科的管理工作中，麻醉药品的管理属于较为重要的环节，该工作环节出现失误将会造成严重的后果，因此，要强化这一方面的管理工作。首先，要把好药品的入口质量关，其次要完善相关管理制度，并严格按照规范操作程序管理药品。另外，还要完善科室以及药剂科相配合的周密检查制度，加强每一个环节的管理工作，确保麻醉药品的管理科学、高效、规范。