经圆窗径路导入正庚醇建立老年性聋模型的实验研究

目的 研究经耳后圆窗径路向C57BL/6Cnc小鼠内耳导入正庚醇对其听性脑干诱发电位(ABR)的影响,并建立老年性耳聋模型.方法 选取30只健康4周龄C57BL/6Cnc小鼠,随机分成实验组和对照组,每组15只.实验组经耳后圆窗径路缓慢导入正庚醇5μL,对照组经耳后圆窗径路缓慢导入0.9％氯化钠注射液5μL.各组小鼠分别于术前3天、术后2小时、术后1天、术后3天行ABR检测.结果 所有实验小鼠无感染迹象,无前庭功能受损表现.对照组小鼠术耳各时间点ABR平均阈值差异无统计学意义(P>0.05),实验组小鼠术耳术后ABR平均阈值显著升高(P<0.05),且随着时间推移呈逐渐增高的趋势,具体数值如下:术前3天、术后2小时、术后1天、术后3天分别为(16.67±2.36)dB、(41.02±4.53)dB、(48.02±2.07)dB、(56.67±2.35)dB.同一时间点实验组小鼠32 kHz频率ABR平均阈值高于12 kHz ABR平均阈值,差异有统计学意义(P<0.05).结论 正庚醇经耳后圆窗径路损伤C57BL/6Cnc小鼠耳蜗后其听觉功能呈逐渐下降改变,成功建立老年性耳聋模型.     

莫西沙星序贯治疗社区获得性下呼吸道感染

目的评价莫西沙星序贯治疗社区获得性肺炎(CAP)和慢性支气管炎急性加重期(AECB)等下呼吸道感染的疗效和安全性以及治疗费用。方法88例中、重度下呼吸道感染患者随机分为莫西沙星序贯治疗组(序贯组)和莫西沙星静脉滴注组(对照组),其中序贯组44例,于治疗当天开始,给予莫西沙星注射液400mg/250mL静脉滴注,每日1次,3~5d后,换用莫西沙星片剂400mg口服,每日1次,总疗程7~10d;对照组44例给予莫西沙星注射液400mg/250mL静脉滴注,每日1次,总疗程7~10d。结果①序贯组和对照组痊愈率分别为65.9%(29/44)和68.2%(30/44),临床有效率分别为88.6%(39/44)和90.9%(40/44);②细菌清除率分别为93.7%(30/32)和94.4%(34/36)。痊愈率和细菌清除率两组差异无统计学意义;③序贯组和对照组平均住院费用分别为(3658±456)元和(6825±387)元;序贯组和对照组平均住院日分别为(8.8±2.2)d和(13.7±1.5)d。两组间比较差异均有统计学意义;④不良反应发生率分别为序贯组11.4%(5/44)和对照组13.6%(6/44),均可耐受,无中途停药者,两组间差异无统计学意义。结论莫西沙星序贯治疗社区获得性呼吸道感染可以获得与莫西沙星全程静脉滴注给药相似的疗效,其不良反应少见,并且可以显著节省治疗费用,缩短住院时间,值得临床推广应用。     

中耳加压对豚鼠膜迷路积水的治疗作用及其机制

目的 探讨中耳加压对豚鼠膜迷路积水的治疗作用及其机制.方法 选择50只豚鼠,随机分为对照组、加压对照组、积水4周组、积水8周组、加压组,每组10只.积水4周组、积水8周组、加压组采用腹腔注射醛固酮制备膜迷路积水动物模型.加压治疗豚鼠在第5周起在压力舱内进行加压治疗,共3周.分别观察各组耳蜗形态和功能,并用免疫组化SP法及Western blotting检测各组耳蜗水通道蛋白1(AQP1)的表达.结果 对照组及加压对照组无膜迷路积水,成模各组均出现不同程度膜迷路积水,积水8周组蜗管与蜗管加前庭阶的面积比较积水4周组、加压组明显升高(P均＜0.01).各组实验前听性脑干反应(ABR)阈值比较无统计学意义;造模成功后,各成模组ABR阈值较实验前明显升高(P均＜0.01),且积水8周组较其余各组明显升高(P均＜0.05).AQP1表达主要在螺旋韧带基底部、Corti's器基底膜等处,积水8周组AQP1表达较积水4周组、加压组表达减少(P均＜0.01).结论 加压治疗可显著减轻豚鼠膜迷路积水且可改善耳蜗功能,其作用机制可能与AQP1表达改变有关.     

双脱甲氧基姜黄素对肺腺癌细胞A549生长活性影响的初步研究

目的初步探讨中药姜黄的主要活性单体成分双脱甲氧基姜黄素体内外抗肺癌生长活性的作用.方法(1)应用形态学观察、MTT、流式细胞仪技术等研究双脱甲氧基姜黄素对传代培养人肺腺癌细胞系A549的生长形态、细胞周期等生物学特性的影响;(2)建立裸鼠人肺腺癌细胞A549移植瘤模型,腹腔注射双脱甲氧基姜黄素,研究其对裸鼠移植瘤生长的影响,同时观察双脱甲氧基姜黄素与传统化疗药顺铂联用对抑制裸鼠移植瘤生长有无增效作用.结果(1)双脱甲氧基姜黄素对体外培养的A549细胞有增殖抑制效应,显微镜下可见明显的形态改变,其IC50为12.108μg/ml,流式细胞仪显示细胞周期主要阻滞在S期,浓度增至15μg/ml时,出现明显的细胞凋亡现象;(2)双脱甲氧基姜黄素具有较好的抗人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤生长作用,移植瘤重量及体积显著低于阴性对照组(P＜0 01);(3)双脱甲氧基姜黄素与顺铂联合应用能显著抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长,裸鼠移植瘤体积及瘤重均显著低于双脱甲氧基姜黄素和顺铂单药治疗组(P＜0 01).结论(1)双脱甲氧基姜黄素有明确的抑制体外培养人肺腺癌细胞A549恶性表型的作用;(2)双脱甲氧基姜黄素能明显抑制人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的生长;(3)双脱甲氧基姜黄素与顺铂联用对抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长具有相加作用.     

PAX2慢病毒表达载体的制备及鉴定

目的 构建大鼠PAX2慢病毒表达载体,以期在大鼠肾脏中高效、稳定表达.方法 设计引物引入Age I酶切位点,使用PCR方法从质粒pcDNA3.1-PAX2中扩增小鼠PAX2基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化.用In-Fusion技术将Age Ⅰ内切酶消化后目的片段交换连接入Age Ⅰ酶切的pGC-FU载体,构建PAX2慢病毒表达载体pGC-FU-PAX2.酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-PAX2与慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,Western-blot验证PAX2在转染293T细胞中表达.结果 通过PCR扩增获得了PAX2基因,将PAX2克隆到慢病毒转移质粒pGC-FU中,并在293T细胞中包装产生慢病毒颗粒.结论 成功构建了PAX2慢病毒表达载体,为进一步从分子水平探讨PAX2功能奠定了基础.     

以颈部蜂窝织炎伴呼吸困难首诊的气性坏疽一例

患者男,43岁,以左侧牙痛、面颊部肿胀半个月,呼吸困难1d于2006年11月14日14:00入院.1个月前有左下列磨牙拔牙史,拔牙后半个月患者出现左侧拔磨牙处疼痛,并出现左面部、颈部肿胀,在当地医院治疗不见好转,1天前病情加莺,出现呼吸困难,门诊以颈部蜂窝织炎并呼吸困难的诊断急诊入院.     

小细胞肺癌脑转移防治现状及进展

正肺癌是目前世界上发生率和病死率最高的肿瘤,小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)占肺癌总数15%左右~([1-2])。SCLC因其侵袭力强、瘤体倍增时间短、早期即可发生远处转移,而成为恶性程度最高的肺癌类型。易发生脑转移(brain metastases,BM)是SCLC的重要特征,约有15%的患者在确诊时已存在脑转移,这类患者中位生存期仅为4~6     

沉默WNT4基因对稳定转染PAX2基因大鼠肾小管上皮细胞迁移和侵袭能力的影响

目的：探讨沉默WNT4基因对稳定转染配对盒基因2（PAX2）大鼠肾小管上皮细胞迁移和侵袭能力的影响,阐明PAX2基因是否通过WNT4基因调控细胞生物学活性。方法：选取对数生长期的PAX2基因稳转细胞系,分为稳转组和对照组。稳转组细胞分为稳转对照组（不应用WNTsiRNA沉默）和沉默72 h组（应用WNTsiRNA沉默72h）。Western blotting法检测稳转组和对照组大鼠肾小管上皮细胞中PAX2和WNT4蛋白的相对表达量,Realtime PCR法检测稳转对照组和沉默72 h组大鼠肾小管上皮细胞中WNT4 mRNA相对表达量,细胞划痕实验检测稳转对照组和沉默72 h组大鼠肾小管上皮细胞的细胞迁移率,Transwell实验检测稳转对照组和沉默72 h组大鼠肾小管上皮细胞的穿膜细胞数。结果：Western blotting法检测,稳转组大鼠肾小管上皮细胞中PAX2和WNT4蛋白相对表达量高于对照组（P<0.05）。Real-time PCR法检测,沉默72 h组大鼠肾小管上皮细胞中WNT4 mRNA相对表达量低于稳转对照组（P<0.05）。细胞划痕实验10 h后,沉默72 h组大鼠肾小管上皮细胞的细胞迁移率低于稳转对照组,但组间比较差异无统计学意义（P>0.05）;细胞划痕实验18 h后,沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞的细胞迁移率低于稳转对照组（P>0.05）。Transwwell实验,沉默72 h组大鼠肾小管上皮细胞的穿膜细胞数低于稳转对照组（P<0.05）。结论：PAX2基因可能通过WNT4基因调控细胞的生物学活性。     

WNT信号通路对类风湿关节炎中炎性因子的影响

摘要:目的　探讨WNT信号通路对类风湿关节炎（RA）大鼠炎性因子的影响。方法　2012年 10 月-2013年 9 月在辽宁医学院实验动物中心将关节炎模型建立成功且关节炎指数大于 2 分的 3 0只大鼠随机分为胶原诱导的关节炎模型组,WNT信号通路特异性阻断剂（WIF）低、中、高剂量组。另有 6 只大鼠为正常对照组。分别予以生理盐水 1 ml/d（对照 组,模型组）、WIF 5 mg/（kg-1d-1）、10 mg/（kg-1d-1）、15 mg /（kg-1d-1）腹腔注射,44 d 后 处死。应用单因素方差分析观察应用WNT阻断剂前后各组足趾容积,关节炎指数,IL-6、IL-8mRNA和蛋白表达情况。结果　模型组足趾容积,关节炎指数,IL-6、IL-8mRNA和蛋白较对照组明显升高,应用WNT信号通路特异性阻断剂（WIF）后足趾容积,关节炎指数,IL-6、IL-8mRNA和蛋白水平明显下降。结论　在RA发病过程炎性因子呈明显高表达状态,而 WNT信号通路阻断可以明显抑制炎性因子的释放。     

紫杉醇脂质体联合顺铂对比吉西他滨联合顺铂一线治疗伴有区域淋巴结转移的晚期非小细胞肺癌的临床研究

背景与目的：区域淋巴结转移与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者预后显著相关,本研究旨在比较紫杉醇脂质体联合顺铂(liposomal paclitaxel plus cisplatin,LP)与吉西他滨联合顺铂(gemcitabine plus cisplatin,GP)一线治疗伴有区域淋巴结转移的NSCLC的近期疗效、远期生存及不良反应。方法：共随机入组55例患者(LP组和GP组分别为29例和26例),分别采用注射用紫杉醇脂质体(175 mg/m2)联合顺铂(75 mg/m2)和注射用吉西他滨(1 000 mg/m2)联合顺铂(75 mg/m²)进行治疗,21 d为1个周期。结果：对于肺癌原发灶,LP和GP组客观缓解率分别为37.9%和30.8%,疾病控制率分别为93.1%和80.8%,差异无统计学意义(P>0.05);对于区域转移的淋巴结,LP和GP组的客观缓解率分别为44.8%和15.4%,差异有统计学意义(P=0.022);LP组疾病控制率(93.1%)高于GP组(73.1%),差异无统计学意义(P=0.101)。LP和GP组的中位生存期分别为17.0个月和12.0个月,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者1年生存率分别为86.2%(25/29)和57.7%(15/26),差异有统计学意义(P=0.039)。LP组血小板减少、胃肠道反应发生率明显低于GP组(P<0.05),而贫血、粒细胞减少、肝肾功能损伤、过敏反应等发生率两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论：对于伴有区域淋巴结转移的NSCLC患者,LP方案可能更能使患者获益,不良反应更轻,耐受性好,值得进一步研究和临床推广应用。