硫化氢抑制葡萄糖调节蛋白78减轻6-OHDA诱导的PC12细胞损伤

目的：探讨硫化氢（H2S）是否通过改变葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的表达参与其对抗6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法应用具有神经毒性的6-OHDA损伤PC12细胞为帕金森病细胞模型,以硫氢化钠（NaHS）作为H2S的供体;应用CCK-8比色法检测细胞存活率;DFCH-DA染色检测细胞内活性氧（ROS）的水平;Rh123染色检测细胞线粒体膜电位（MMP）;Western blot检测GRP78的表达。结果200μmol/L的6-OHDA引起PC12细胞的存活率显著降低,ROS生成增加及MMP降低,且诱导了GRP78的高表达。应用25~400μmol/L的NaHS预处理30 min,呈浓度依赖性抑制6-OHDA引起的细胞存活率降低,其中400μmol/L的NaHS作用最明显,此浓度也可以显著减少6-OHDA引起的ROS增多,提高MMP,同时明显抑制6-OHDA诱导的GRP78高表达。结论 H2S具有抗6-OHDA氧化应激损伤的PC12细胞保护作用,抑制内质网应激分子GRP78的表达可能是其机制之一。     

硫化氢对PC12细胞存活素表达的影响及其神经保护作用

Objective To explore the effect of hydrogen sulfide (H2S) on the expression of survivin in PC12 cells and the neuroprotective function of H2S on PC12 cells.Methods Different concentrations of sodium hydrosulfide (NaHS) were used to treat the PC12 cells at different times.Dose-effect (50-800 μmol/L) and time-effect (0-180 min) on the expression of survivin were evaluated by Western blotting.Cell viability was tested by using cell counter kit-8.Results NariS treatment at the concentrations from 50 to 200 μmol/L for 30 min could up-regulate the expression of survivin in a dose dependent manner,however,when the concentration of NariS was above that,the expression of survivin decreased gradually;when the concentration of NariS reached 800 μmoi/L,the expression level of survivin was lower than the normal level.Treatment with 400 μmol/L NariS within the range of 0-60 min could promote the expression of survivin in a time dependent manner,but with the extension of time,the expression of survivin was declined.On the other hand,400 μmol/L NaHS preconditioning could enhance the expression of survivin promoted by CoCl2 and reduce the injuries of PC12 cells induced by CoCl2 to increase the cell viability.Conclusion H2S increases the expression ofsurvivin in a dose and time dependent manners at certain degree,which may be related to the protection of PC12 cells against chemical hypoxic damage.     

帕金森病病因学与发病机制研究进展

帕金森病是以涉及基底神经核直接与间接通路功能紊乱为特征的锥体外系疾病，后期部分患者伴有黑质外非多巴胺(dopamine，DA)能神经元的损伤，常伴有痴呆表现，严重影响老年人的健康．由此，有关帕金森病病因学与发病机制的研究也成为当前神经科学界关注的热点，笔者就这方面的研究进展作一概述．     

Survivin在PC12细胞对抗化学性缺氧损伤中的作用

目的探讨存活素(survivin)在PC12细胞对抗氯化钴(CoCl2)诱导损伤中的作用。方法应用不同浓度的CoCl2处理PC12细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导PC12细胞损伤的实验模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Western-blot法检测CoCl2诱导缺氧与survivin表达间的量效(200～1000μmol·L-1)和时效(0～48h)关系。结果CoCl2可明显抑制PC12细胞的存活率,且呈浓度和时间依赖性。应用不同浓度CoCl2处理PC12细胞24h,在200～600μmol·L-1浓度范围内,呈浓度依赖性地促进survivin表达,600μmol·L-1CoCl2诱导survivin表达达高峰,超过此浓度,则随着CoCl2浓度的增加,survivin表达逐渐下降,CoCl2浓度达1000μmol·L-1时,survivin基本不表达;应用600μmol·L-1CoCl2处理PC12细胞,在0～36h时间范围内,呈时间依赖性地促进PC12细胞survivin的表达,但随着处理时间的延长,survivin的表达逐渐下降;加入2μmol·L-1Hsp90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG),不仅可以降低600μmol·L-1 CoCl2诱导的survivin高表达,而且加重了600μmol·L-1 CoCl2对PC12细胞的损伤作用,使细胞存活率降低。结论survivin表达上调可能是PC12细胞对抗化学性缺氧损伤的内在防御机制之一。     

p38丝裂原活化蛋白激酶对H2O2预处理的适应性细胞保护作用的影响

3580不影响H2O2预处理的适应性细胞保护作用.50 μmol/L H2O2具有比H2O2预处理更强的激活p38的作用,H2O2预处理能明显地抑制50 μmol/LH2O2对p38的激活作用.结论 H2O2预处理抑制高浓度H2O2对p38的激活可能是其适应性细胞保护机制之一.     

6-羟基多巴胺微量注射对大鼠黑质抗氧化系统的影响

目的黑质内微量注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）复制帕金森病（PD）动物模型并观察其对黑质抗氧化系统的影响。方法应用6—OHDA立体定向微量注射技术制备PD大鼠模型。观察不同天数用不同药物诱发对动物行为学的影响,45d后分别测定各组黑质区GsH—Px、MDA和ROS水平。结果①单侧黑质致密部6-OHDA8μg注射可以成功制备PD动物模型;②6-OHDA使GSH—Px活性降低．ROS、MDA水平升高（P均〈0．01）。结论6-OHDA黑质内微量注射可以建立PD动物模型,其症状稳定;6-OHDA打乱了黑质抗氧化系统的平衡。     

N-乙酰半胱氨酸对化学性缺氧引起HaCaT细胞损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否保护人皮肤永生化角质形成细胞(HaCaT)对抗化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)诱导的损伤及对炎症因子的影响.方法 用2000 μmol/L CoCl2处理HaCaT细胞,建立化学性低氧诱导皮肤细胞损伤的实验模型.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;ELISA试剂盒检测细胞培养基中IL-6、IL-8和TNF-α的水平;罗丹明123(Rh123)染色/荣光显微镜照相术检测线粒体膜电位(MMP);谷胱甘肽试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的含量.结果 不同浓度的NAC预处理HaCaT细胞2 h能明显对抗CoCl2引起的存活率降低;CoCl2处理HaCaT细胞4 h能使IL-6、IL-8和TNF-α的释放显著增加,GSH水平及MMP降低;2000μmol/L NAC预处理2 h能使IL-6和IL-8的释放显著减少,并能使细胞内GSH含量增多,MMP升高.结论 氧自由基清除剂NAC能对抗CoCl2诱导的HaCaT细胞损伤及炎症反应,此作用可能与其减轻细胞内的氧化应激反应有关.     

硫化氢对PC12细胞存活素表达的影响及其神经保护作用

目的 探讨硫化氢(H2s)对PC12细胞存活素表达的影响及其神经保护作用.方法 应用Western blot检测不同浓度(50～800 μmol/L)的H2S供体硫氢化钠(NaHS)处理PC12细胞不同时间(0～180min)诱导PC12细胞存活素表达的量效和时效关系;细胞计数Kit-8(CCK-8)比色法检测细胞的存活率.结果应用不同浓度NaHS处理PC12细胞30 min后.在50～200 μmol/L浓度范围内呈浓度依赖性地促进存活素表达:但随着NaHS浓度的增加,存活素表达逐渐下降,当NaHS 浓度达800 μmol/L时存活素表达低于正常.应用400 μmo/L NariS处理PC12细胞不同时间,在0～60min时间范围内呈时间依赖性地促进PC12细胞存活素的表达,但随着处理时间的继续延长,存活索的表达逐渐下降.另一方面.400 μmo/L NariS预处理还能增强氯化钴(COCl2)对存活素表达的促进作用.并可显著减轻CoCl2对PC12细胞的损伤作用,使细胞存活率增加.结论 在一定浓度和时间范围内H2S可上调存活素的表达,此作用可能与其保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤有关.     

开展大学生科研活动 提高综合素质的方法探讨

本科教育既是培养应用型人才,也是为一部分研究型人才进入更高层次深造打下良好基础的关键过程。随着我国研究生培养规模的扩大,有相当一部分学生将进入硕士阶段学习和开展科研工作,因此,提高学生综合素质,     

17β-E2抗6-OHDA致雌鼠黑质听觉P50诱发电位异常的研究（摘要）

目的观察6-OHDA及性腺雌激素对雌鼠黑质听觉P50诱发电位的影响；并进-步探讨性腺雌激素抗6-OH—DA致雌鼠黑质听觉P50诱发电位的作用及其可能机制．方法将137只成年雌性Sprague—Dawley鼠随机分为9组：正常对照组（INT—N组）、6-OHDA帕金森病模型组（INT-6-OHDA组）、维生素C溶剂对照组（INT—VitC组）、去卵巢空白对照组（OVX—N组）、去卵巢＋6-OH—DA帕金森病模型组（OVX＋6-OHDA组）、去卵巢＋雌激素替代组（OVX＋E2-N组）、去卵巢＋雌激素替代＋6-OHDA帕金森病模型组（OVX＋E2＋6-OHDA组）、去卵巢＋橄榄油溶剂对照组（OVX＋Oil-N组）、