基于中国居民疾病发病和死亡情况的环境重金属污染健康风险评估标准探讨

重金属污染日趋严峻,严重影响了人们的生活质量,而健康风险评估可有效地应用于环境管理决策.基于健康风险评估标准制定的原则,通过结合中国居民慢性病的患病率和死亡率现状,参照不同国家的健康风险评估标准,对适合中国人群的环境重金属污染健康风险评估标准进行探讨.     

壳聚糖作为敏感膜材料的研究

以壳聚糖为膜材料制成薄膜，运用生物素－亲和素系统将辣报过氧化物酶（ＨＲＰ）固定在膜上，固定化过程对ＨＲＰ的活性无影响，而其稳定生提高，运用Ｌｕｍｉｎｏｌ－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ化学发光体系，对水样中微量Ｈ２Ｏ２进行检测，在１０＾－６～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ范围内线性关系良好，回归方程：Ｙ＝２０．６４８Ｘ－２１５．２３９（Ｘ：ｎｍｏｌ／Ｌ），检测灵敏度为０．５ｎｍｏｌ／Ｌ。实验研制的壳聚糖膜可制成生物传感顺     

细菌发光的分子生物学及发光基因的应用

本文对发光细菌生物发光的分子生物学、发光基因在转染细胞中的表达、发光基因在分子生物学中的应用以及基因工程发光菌的应用进行了综述。     

化学发光法检测CYP1A1基因多态性

目的　建立增强化学发光法 (enhancedchemiluminescence,ECL)检测CYP1A1基因多态性的方法。方法　实验方法同ELISA法 ,鲁米诺过氧化氢增强化学发光体系加入酶标板的每一个孔中 ,用单光子计数器检测其发光强度 ,即可鉴定样本基因型。结果　 30个标本的检测结果与ELISA相同 ,其灵敏度比琼脂糖凝胶电泳高 10 0 0倍 ,比ELISA法高 10倍 ,辣根过氧化物酶标记DIG抗体的量为0 .2mU ,比ASA ELISA法少 ,1h杂交便可以判断标本的基因型 ,最佳杂交时间为 1.5～ 2h ,杂交温度为4 0～ 5 5℃。结论　该方法是一种更加灵敏和简便 ,极具发展前景的检测基因多态性的方法。     

聚合酶链反应-增强化学发光检测结核分枝杆菌

目的探讨微孔板杂交技术结合增强化学发光(ECL)检测结核分枝杆菌(MTB).方法同时应用聚合酶链反应(PCR)-ECL、PCR-比色法与PCR电泳检测60例活动性肺结核和54例健康对照痰标本,比较结果.结果 PCR-ECL、PCR-比色法与PCR电泳总阳性率分别为76.7%、63.3%、50.0%,其中PCR-ECL阳性率显著高于PCR电泳(P<0.05);对涂片阳性标本,阳性率分别为85.7%、85.7%、71.4%,差异无显著性(P>0.05);对涂片阴性标本,阳性率分别为73.9%、56.5%、43.5%,PCR-ECL阳性率高于PCR电泳(P<0.05).另外PCR-ECL、PCR-比色法与PCR电泳特异性分别为92.6%、96.3%、96.3%,差异无显著性(P>0.05).结论 PCR-ECL灵敏度高,能提高临床标本MTB检出率,尤其是对涂片阴性痰标本,并且该方法操作简单,结果客观.     

73例RHD阴性献血者RH表型及RHD基因型的研究

目的　探讨 RHD阴性献血者中 RHD基因的存在情况及血清学表型与 RHD基因型两者间的关系。了解长沙地区 RHD阴性者中 RHD基因的多态性情况。　方法　应用 SSP- PCR方法检测长沙地区 73名常规血清学 RHD阴性献血者的 RHD基因外显子 3、4、7的存在情况。　结果　 73例 RHD阴性献血者中 ,完全存在所测外显子的 15例 ,其中表型为 Cc或 CC占 14例 ,表型 cc Ee 1例 ;部分存在所测外显子的 4例 ,其中 1例 ccee存在 RHD基因外显子 7。完全缺失所测外显子 5 4例。　结论　所测的 RHD阴性者的 RHD基因呈现多态性。 RHC表型的 RHD阴性者存在 RHD基因的比例最高     

错配杂交化学发光法定量检测p16基因过甲基化

目的建立一种基于错配杂交化学发光检测p16基因启动子区过甲基化的定量分析方法。方法用亚硫酸氢钠修饰基因组DNA,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化。设计合成1对不含CpG位点的引物,同时扩增甲基化或非甲基化目的DNA片段,用2条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物进行杂交及化学发光检测,通过探针杂交信号强度比确定样品DNA中甲基化的p16基因的比例。结果错配杂交化学发光法具有较好的精密度(CV=5·2%~6·4%)和灵敏度(2·5×10-4pmol),检测已知混合样品的p16基因甲基化率分别为0%、23%、52%、70%及93%,与实际结果一致。结论本研究建立的错配杂交化学发光法是一种检测快速、操作简便的p16基因甲基化的定量检测方法。     

利用化学发光抑制效应测定尿碘含量

碘 (Iodine)是一种具有重要生理功能的微量元素 ,人体平均含碘 14mg ,主要分布在甲状腺 ,用于合成甲状腺素。体内碘离子 (Iodide)主要通过尿液排泄 ,通常情况下 ,当每天尿中碘离子排泄量少于 80 μg时 ,是机体缺乏碘的信号[1 ] 。因此 ,尿碘的测定具有重要的生理意义。碘的测定方法有很多 ,目前尿碘的测定方法是砷 -铈催化比色法 ,该法干扰因素较多 ,重现性不理想。化学发光分析由于其灵敏度高、分析快捷而广泛应用于痕量成份的检测[2 - 3] ,本文介绍了一种基于化学发光技术的尿碘测定方法。碘离子对高锰酸钾 -鲁米诺化学发光体系具有强烈…     

化学发光法在DNA杂交分析中的应用

化学发光法在ＤＮＡ杂交分析中的应用袁津玮，周宜开（武汉同济医科大学环境医学系武汉４３００３０）用于检测特异ＤＮＡ和ＲＮＡ序列的核酸杂交分析技术，作为分子生物学的最基本技术之一，已广泛应用在生命科学，尤其是医学的各个领域。传统的核酸分子杂交采用的是放射...     

巢式PCR法检测不同类型标本中p16基因启动子过甲基化

目的 介绍一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法，即巢式甲基化特异性。PCR法(nested-MSF，nMSP)，探讨该方法最佳应用条件，并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态。方法 将基因组DNA变性成为单链，用亚硫酸氢盐修饰单链DNA，所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物，进行巢式PCR扩增，最后经凝胶电泳检测目的片段。结果 在3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子的甲基化，比普通的甲基化特异性PCR法具有更高的灵敏度。结论 巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法，可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析。