人血浆中格列美脲的LC-MS／MS测定

建立了LC-MS/MS法测定人血浆中格列美脲的浓度.采用C18色谱柱,以格列齐特为内标,流动相为2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.5%甲酸).甲醇(27:73),电喷雾离子化源,选择性正离子多反应监测,检测离子分别为m/z 491.2→m/z352.0(格列美脲)和m/z 324.1→m/z 127.2(格列齐特).结果格列美脲在1~400 ng/ml浓度范围内线性关系良好,相对回收率大于99.1%,提取回收率大于95.7%,日内和日间RSD均小于10.1%.     

液相色谱-质谱法同时测定大鼠血浆中游离型神经甾体

目的建立同时测定SD大鼠血浆中脱氢表雄酮(DHEA)、孕烯醇酮(PREG)和别孕烯醇酮(AP)的高效液相色谱质谱法。方法选择甲睾酮(MT)作为内标。雄性SD大鼠的血浆使用液液萃取后,再经固相萃取、衍生化后,以高效液相色谱质谱检测器测定DHEA、PREG和AP的浓度。采用大气压化学离子源(HPLC/APCIMS),选择离子检测方式。结果血浆中DHEA、PREG和AP线性范围分别为:0.030～2.00ng·ml-1,0.025～2.00ng·ml-1,相关系数分别为0.9988、0.9996和0.9988。低、中、高浓度血样的提取回收率在70.4%～92.4%之间,相对回收率为:92.6%～105.6%,日内、日间RSD均小于15%。正常雄性SD大鼠的血浆PREG和AP分别为0.29±0.24ng·ml-1、0.19±0.20ng·ml-1,每ml血浆DHEA含量均低于定量限。结论本实验方法具有灵敏度高、准确度好及变异较小的特点,适合测定雄性SD大鼠血浆中3种游离型神经甾体的含量。     

吗啡对大鼠大脑皮质星形胶质细胞神经甾体水平的影响

目的 研究吗啡对大鼠大脑皮质星形胶质细胞神经甾体水平的影响。方法 建立原代新生SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞吗啡依赖样模型，并随机分为4组：生理盐水对照组（c组）、吗啡组（M组）、μ受体拮抗剂CTAP＋吗啡组（C＋M组）和扯受体选择性激动剂DAMGO组（D组）。固相萃取结合高效液相色谱．质谱联用法测定细胞培养上清液中神经甾体孕烯醇酮（PREG）、脱氢表雄酮（DHEA）、别孕烯醇酮（AP）、硫酸孕烯醇酮（PS）和硫酸脱氢表雄酮（DS）水平；RT-PCR法观察P450侧链裂解酶（P450scc）转录活性；免疫印迹法观察细胞内p-CREB水平。结果 与C组比较，M组PREG、AP和DS、D组PREG、AP和DS下降（P〈0．05或0．01），P450sccmRNA的表达降低、细胞内p-CREB升高（P〈0．05）；与M组比较，C＋M组PREG和DHEA升高、PS下降（P〈0．05或0．01），P450BccmRNA表达增强、p-CREB降低（P〈O．05）。结论 吗啡可通过扯阿片受体抑制P450scc的转录，影响大鼠大脑皮质星形胶质细胞对神经甾体的合成。     

氧氟沙星片溶出度考察

本文采用紫外分光光度法对日本及国内两个厂家的3批氧氟沙星片在不同介质中进行了体外溶出度测定.结果表明,以 0.1mol/L NaOH为介质时溶出快,但不同厂家的产品溶出速度亦有差异.在此介质中,NJ的产品溶出最快,在4min已达98%;而JP产品在15min时才达溶出98%;BJ产品溶出最慢,15min时仅67.49%.3批氧氟沙星片T_(500,Td具有极显著差异(P<0.01),因此建议控制制剂质量并规定溶出标准.     

人血浆中氟康唑的LC-MS/MS法测定

建立了LC-MS/MS法测定人血浆中氟康唑的浓度.采用C18色谱柱,以甲磺酸酚妥拉明为内标,流动相为甲醇2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸)(60:40),电喷雾离子化源,正离子多离子反应监测,监测离子为m/z 307.2→238.2(氟康唑)和m/z 282.2→212.2(甲磺酸酚妥拉明).氟康唑在0.03～10μg/ml浓度范围内线性关系良好.提取回收率大于90.9%,日内和日间RSD均小于7%.     

反相高效液相色谱法测定血浆中罗红霉素的含量

目的 建立血浆中罗红霉素（roxithromycin）含量测定方法。方法采用C18色谱柱,流动相为甲醇-0.05mol／L磷酸二氢铵溶液（氨水调pH为7.0）（75：25）,流速1.0mL／min,克拉霉素为内标．血浆样品碱化后用正己烷-二氯甲烷-异丙醇（65：32：3）提取浓集,在210nm波长处检测。结果 本方法在0．25～16μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9998）．日内RSD＜5．6％．日间RSD＜9．3％,平均提取回收率为88.5%,平均方法回收率为99．2％。结论 该方法快速、准确,适用于罗红霉素的临床药动学研究和血药浓度检测。     

酒精依赖和戒断时大鼠大脑奖赏回路不同脑区孕烯醇酮及其硫酸酯水平的变化

目的 采用大鼠酒精依赖模型,观察酒精依赖及戒断对大鼠伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马中神经甾体孕烯醇酮(pregnenolone,PREG)、孕烯醇酮硫酸酯(pregnenolone sulfate,PREGS)水平的影响.方法 大鼠自由饮用含6%的乙醇溶液,连续42 d使大鼠形成酒精依赖,并撤除酒精使其自然戒断.断头取脑分离取出伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马脑区.使用液液萃取和固相萃取两步法提取脑组织中的PREG、PREGS,以高效液相色谱-质谱联用法测定神经甾体含量.结果 与对照组相比,酒精依赖大鼠伏隔核PREG、PREGS的水平显著降低(P＜0.05),额叶皮质、杏仁核和海马PREGS的水平显著下降(P＜0.05);酒精戒断6、24 h大鼠伏隔核、额叶皮质、杏仁核和海马PREGS的水平显著降低(P＜0.05);酒精戒断24 h大鼠海马PREG水平显著上升(P＜0.05).结论 酒精依赖形成和戒断对伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马的神经甾体水平具有不同影响.     

反相高效液相色谱法测定人体血浆中奥美拉唑含量

目的建立反相高效液相色谱法测定血浆中奥美拉唑浓度的方法。方法血浆经碱化后以乙酸乙酯-氯仿(4∶1)为提取溶剂,以液-液萃取法处理血浆样品。采用DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为pH=6.8的甲醇-异丙醇-0.5%三乙胺水溶液(37∶10∶53),流速为1.0mL/min,内标为硝苯地平,检测波长为302nm。结果该法血药浓度在7.98～2.024×103ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测限为2ng/mL,精密度日内RSD<3.2%,日间RSD<3.7%,平均提取回收率为84.6%,平均方法回收率为99.6%。结论该方法快速、准确,适用于奥美拉唑的临床药代动力学研究和血药浓度检测。