汉滩病毒核蛋白部分片段与囊膜糖蛋白G1在昆虫细胞中的融合表达

目的　应用Bac -to -Bac杆状病毒表达系统融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段。方法　构建含有汉滩病毒G1S0 7嵌合基因的杆状病毒表达载体 pFBD -G1S0 7,转化DH10Bac致敏菌 ,利用其含有的细菌Tn7转座系统将嵌合基因重组至穿梭质粒Bacmid上 ,快速筛选出含有G1S0 7嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达该融合蛋白 ,利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果　构建的含G1S0 7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白 ,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别 ,表达产物主要集中在细胞内。结论　在昆虫细胞中表达出具有生物学活性的G1S0 7融合蛋白 ,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础     

T型卡环作用于烤瓷冠的固位力衰减及表面磨损观察

目的观察两种材料的T型卡环作用于烤瓷冠时,其固位力大小的变化趋势以及烤瓷冠相应表面的磨损情况。方法制作烤瓷冠标准试件及钴铬合金和纯钛的T型卡环,采用BOSE Electroforce测试仪进行15000次反复就位、脱位实验,记录分析卡环脱位力的峰值及其衰减曲线。用扫描电子显微镜观察烤瓷冠表面的磨损情况。结果两组卡环固位力衰减规律基本符合对数曲线,拟合曲线方程钴铬合金卡环为y=-5.043lnx＋51.494,纯钛卡环为y=-2.622lnx＋29.519。电镜可见钴铬合金卡环组烤瓷冠表面明显断层结构及较大面积的材料缺失;纯钛卡环组烤瓷冠材料剥脱较少,断层较薄。结论钴铬合金和纯钛的T型卡环固位力变化符合对数衰减;纯钛卡环的固位力维持优于钴铬合金卡环。对烤瓷冠表面的磨损程度,纯钛卡环明显低于钴铬合金卡环。     

2008-2009年肠道病毒71型贵州省分离株的基因特征分析

肠道病毒71型(EV71)感染主要引起手足口病,近年来,EV71病毒的流行在亚太地区呈上升趋势,其中最令人关注的就是EV71的流行引起患儿的神经症状甚至死亡.贵州省自该病纳入法定传染病管理以来发现2009年感染EV71的患儿及重症病例比2008年多,同时在2009年初实验室诊断因EV71感染引起了患儿死亡,疫情也比2008年开始的早,我们对2008-2009年的手足口病临床标本进行了实验室诊断,并进行了基因测序及特征分析,以期发现是否发生了抗原漂移,分析引起重症的EV71毒株是否与核苷酸序列有相关性,现将结果报告如下.     

神经营养素-3重组腺病毒Ad-NT-3的培养和鉴定

目的 培养和鉴定重组腺病毒载体Ａｄ－ＮＴ－３。方法 在２９３细胞中培养扩增Ａｄ－ＮＴ－３，用组织培养半数感染量测测定其滴度。从病毒培养上清中提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应技术扩增ＮＴ－３部分基因片段，将扩增产物克隆并进行序列分析以测定Ａｄ－ＮＴ－３中ＮＴ－３的存在及种属。结果 Ａｄ－ＮＴ－３扩增后获得了较高滴度的病毒。从形态学证实Ａｄ－ＮＴ－３扩增后获得了较高滴度的病毒。从形态学证实Ａｄ－ＮＴ－３含有     

基于广义锥理论的血管三维重建方法

给出一种血管三维重建的新方法。该方法根据广义锥理论,可以由多幅血管的微米级连续切片图像,通过计算投影图像和中轴线,得到该血管直径和血管中轴线的三维坐标,从而给出血管的三视图投影图像,并实现血管的三维重建。并将问题的数学解法通过计算机程序实现。本文的独创性在于引入广义锥理论给出了实用的算法,并对计算精度进行了细致的改进。实验证明本文的方法实用、简便、准确,便于在实用工作中采用。     

人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因在Sp2／0细胞中的初步表达

目的 在前期工作的基础上,进一步将人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因转染到鼠骨髓瘤细胞Sp2/0并进行初步表达。方法 将含人源性NHFRS本轻链基因的真核表达载体VkEpSV-neo,用脂质体法转染鼠骨髓瘤细胞Sp2/0,用RT－PCR法和免疫组化法染色法检测转染及表达结果。结果 RT－PCR和免疫组化染色结果表明人源性抗HFRS病毒抗轻链基因不仅已成功地转染进Sp2/0细胞,并得到了良好的表达。结论 在鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中成功表达人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因,对抗HFRS病毒抗体人源化的研究具有重要意义。     

扩增鼠源性mAb和人源性抗体k轻链基因中引物的作用

目的 比较扩增鼠源性mAb和人源性抗体Vk基因中引物的作用。方法 从5株抗HFRS病毒鼠源性mAb杂交瘤细胞系和人PBL中提取细胞总RNA。逆转录后,用不同的引物进行PCR扩增,克隆后测定核苷酸序列并比较不同引物的作。结果 5株mAb杂交瘤细胞的Vk基因及人源性抗体的Vk基因,需采用不同的引物组合才可得到。结论 5‘端引物在PCR扩增抗体Vk基因中起重要作用。