mm9_circ_010490在PM2.5诱导小鼠单核巨噬细胞炎症反应中的功能

目的探究mm9_circ_010490在PM_(2.5)暴露小鼠单核巨噬细胞RAW264.7中的表达改变及其在炎症反应中的作用。方法使用0、50、100、150、200μg/ml的PM_(2.5)悬液暴露RAW264.7细胞24、48 h,收集细胞提取总RNA,用qRT-PCR技术检测炎症因子IL-6、TNF-α和mm9_circ_010490表达水平的差异。设计并合成mm9_circ_010490的3条干扰序列(siRNAs)对细胞进行转染,以si-NC空载体作为对照组,联合PM_(2.5)暴露后检测上述指标。结果与对照组相比,PM_(2.5)暴露RAW264.7细胞后,IL-6和TNF-α炎症因子及mm9_circ_010490的水平升高,具有时间、剂量依赖性,且差异具有统计学意义(P0.05);使用mm9_circ_010490的siRNA转染RAW264.7细胞后,IL-6、TNF-α炎症因子和mm9_circ_010490表达水平下调,差异具有统计学意义(P0.05);联合PM_(2.5)暴露后,与si-NC+PM_(2.5)组相比,上述指标呈现低表达趋势,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 mm9_circ_010490表达水平在PM_(2.5)暴露后的RAW264.7细胞中明显上升,且在PM_(2.5)诱导细胞炎症反应中发挥着促炎作用。     

RNAi沉默STAT3基因对人前列腺癌PC3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 探讨pSilencer1．0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法 采用裸鼠前列腺癌模型模拟siRNA—STAT3基因治疗实验，观察siRNA—STAT3重组质粒的抗瘤疗效，Western blot法检测重组质粒对STAT3基因表达的影响，HE及Tunel染色方法观察肿瘤组织形态及细胞凋亡情况。结果 肿瘤接种后第49天重组质粒组肿瘤体积为（391±56）mm^3，盐水对照组为（1111±182）mm^3，空质粒对照组为（981±169）mm^3，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；重组质粒抑制瘤体内STAT3及pTyr-STAT3基因表达率分别为77％及68％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。HE染色证实重组质粒组出现大片细胞核固缩、破碎等凋亡征象，Tunel染色显示癌组织出现大量细胞凋亡。结论 pSilencer1．0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能明显抑制人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤的生长，具有良好的应用前景。     

夏季和冬季大气PM2.5水溶性颗粒物与总颗粒物对BEAS-2B细胞活性与炎症的影响

目的探讨夏季与冬季的大气颗粒物PM_(2.5)水溶性成分与总颗粒物对BEAS-2B细胞的细胞活性与炎症的影响。方法将夏季和冬季采集的PM_(2.5)分别提取水溶性成分与总颗粒物,得到4种PM_(2.5)组分,使用CCK-8法检测25、50、100、200、400μg/ml PM_(2.5)暴露细胞后的细胞活性;以100μg/ml PM_(2.5)处理细胞12、24、48 h后提取RNA,用qRT-PCR技术检测IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8炎症因子与炎症小体NLRP3及caspase-1、IL-18的水平。结果夏季和冬季PM_(2.5)的水溶性成分与总颗粒物分别处理细胞12 h后,部分剂量组细胞活性升高,随着PM_(2.5)暴露时间的增加,细胞活性逐渐得到抑制,差异具有统计学意义(P0.05)。100μg/ml的PM_(2.5)处理细胞后,IL-1α和IL-1β表达水平高于IL-6和IL-8;炎症小体NLRP3、caspase-1和IL-18在100μg/ml的PM_(2.5)处理24、48 h后也呈现升高趋势,差异具有统计学意义(P0.05)。结论夏季和冬季PM_(2.5)水溶性成分与总颗粒物可以抑制细胞活性,并且促使细胞炎症发生,冬季总颗粒物对细胞活性与炎症的影响更明显。     

前列腺癌患者血清中铜、锌与铜/锌比值的变化及意义

目的探讨血清铜、锌含量与前列腺癌之间的关系，并将其与血清前列腺特异性抗原（PSA）比较，探讨其在前列腺癌诊断中价值比较。方法采用原子吸收分光光度法测定76例前列腺癌患者、125例前列腺增生患者和191例健康男性的血清铜、锌含量。结果前列腺癌组血清锌明显低于健康对照组，血清铜和铜/锌比值明显高于健康对照组（P〈0.05）。前列腺癌组血清铜及铜/锌比值与前列腺增生组比较未见显著性差异;前列腺癌组血清锌低于前列腺增生组（P〈0.05）。前列腺增生组血清锌与健康对照组比较未见显著性差异;前列腺增生组血清铜和铜/锌比值高于健康对照组（P〈0.05）。PSA在4.0-10.0ng/ml灰色区域的前列腺癌组，血清锌ROC-AUC（receiver operator characteristic curve-area under curve）为66%，高于PSA的ROC-AUC。结论血清铜、铜/锌比值升高及血清锌降低可能是前列腺癌发生的危险因素，血清锌在PSA（4.0～10.0）ng/ml灰色区域的前列腺癌诊断效率高于PSA，其可能为前列腺癌的诊断提供有价值的指标。     

RNA干扰技术沉默STAT3对人前列腺癌细胞生长的抑制作用

目的: 探讨RNA干扰技术沉默STAT3基因表达对人前列腺癌细胞PC3及LNCaP的生长抑制作用。　方法: 针对STAT3mRNA序列设计合成 3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pSilencer1. 0 U6 siRNA STAT3重组质粒,转染PC3及LNCaP细胞;采用Western印迹、Northern印迹等技术观察重组质粒对STAT3基因表达的影响;用MTT法观察重组质粒对PC3及LNCaP细胞体外生长抑制作用;用流式细胞术(FCM)及吖啶橙染色检测重组质粒诱导细胞凋亡。　结果: 成功构建pSilencer1. 0 U6 siRNA STAT3重组质粒,并成功转染PC3及LNCaP细胞;Western印迹,Northern印迹结果证实重组质粒在mRNA及蛋白水平分别显著抑制STAT3基因表达,抑制率为60% ~75%;MTT及FCM结果证明上述重组质粒可显著抑制PC3及LNCaP细胞的体外生长并诱导PC3细胞凋亡。结论: pSilencer1. 0 U6 siRNA STAT3可抑制STAT3在人前列腺癌细胞中的表达,并抑制肿瘤细胞的生长,促进其凋亡。     

ATRA联合IFN-α对PC-3细胞株的生长抑制作用以及对GRIM-19和STAT 3基因表达的影响

目的:研究ATRA联合IFN-α对人激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞株的生长抑制作用及对凋亡相关基因GRIM-19和原癌基因STAT3表达的影响。方法:采用MTT比色法筛选ATRA和IFN-α联合应用的最佳时间和剂量;相差显微镜及吖啶橙染色观察其对PC-3细胞的促凋亡作用;DNA ladder提取试剂盒检测用药后细胞凋亡;RT-PCR方法观察用药后PC-3细胞GRIM-19 mRNA的表达;Western blot分别检测GRIM-19、STAT3的蛋白表达。结果:ATRA 1μmol/L联合IFN-α1 000 U/mL作用72 h对PC-3细胞有显著的增殖抑制作用,与溶媒对照组、ATRA或IFN-α单独应用组比较,差异显著(P<0.05)。形态学观察两药合用后PC-3细胞呈现典型的凋亡征象。DNA电泳图谱在ATRA和IFN-α两药合用组可见较AT-RA单独应用组更为明显的DNA ladder,IFN-α单独用药组及对照组没有出现DNA降解。RT-PCR结果表明,ATRA和IFN-α两药合用GRIM-19 mRNA表达增强,与对照组和ATRA、IFN-α组比较,差异显著(P<0.05)。Western blot结果显示,两药合用组GRIM-19蛋白表达增强,STAT3蛋白表达减弱,与对照组、ATRA、IFN-α组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:ATRA和IFN-α联合应用可抑制PC-3细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是通过上调GRIM-19基因表达,进而下调原癌基因STAT3表达实现的。     

Rh_2诱导PC-3M细胞凋亡及对新基因GRIM-19表达的影响

目的:研究人参单体皂甙Rh2对PC-3M细胞株(激素非依赖性人前列腺癌细胞)的致凋亡作用及对新基因GRIM-19表达的影响。方法:采用吖啶橙染色观察其对PC-3M胞的促凋亡作用;RT-PCR和Westernblot方法分别检测用药后PC-3M细胞GRIM-19mRNA和蛋白的表达。结果:不同剂量的Rh2作用于PC-3M细胞24h吖啶橙染色结果呈阳性;RT-PCR结果与Westernblot结果相一致,Rh2随浓度的增加GRIM-19mRNA和蛋白表达逐渐增强,Rh2中低剂量组与对照组比较差异显著(P<0.05),Rh2高剂量组GRIM-19表达与对照组比较差异十分显著(P<0.01)。结论:Rh2诱导PC-3M细胞凋亡与上调GRIM-19基因和蛋白表达有关,其表达强度呈剂量依赖性。     

2例硫酸二甲酯职业伤害患者个性化护理效果观察

选取2017年7月收治的硫酸二甲酯接触患者2例，总结其治疗护理等一般资料。2例患者均采取早期、足量、短程应用激素并使用抗感染药物等治疗，根据不同症状实施个性化护理措施。经积极治疗及精心护理，患者病情好转出院且无并发症发生。个性化护理能够为患者提供精神、心理及生理等多方面的护理，强化患者对疾病的认知，提升患者参与治疗及护理的积极性，确保护理得到最大程度的落实。     

共表达野生型p53及siRNA-mdm2质粒的构建及其在PC-3细胞中的表达

目的：构建可同时表达野生型p53 (wt-p53)及siRNA-mdm2的重组真核表达载体用于激素非依赖性前列腺癌的联合基因治疗。方法：利用亚克隆、T-A克隆和PCR技术合成并构建pcDNA3.1-p53、siRNA-mdm2、p53/siRNA-mdm2和siRNA-scramble重组质粒。脂质体法将上述重组质粒转染至PC-3细胞,半定量RT-PCR和Western blotting检测共表达质粒对mdm2和p53表达的影响,MTT法检测共表达质粒转染后PC-3细胞增殖活性。结果：克隆出wt-p53全长及带有U6启动子的siRNA-mdm2序列,经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建上述真核重组表达载体;转染细胞48 h后可见siRNA-mdm2组GFP明显表达; RT-PCR和Western blotting检测显示转染共表达质粒后PC-3细胞中 wt-p53表达增强,mdm2表达下调;MTT检测显示共表达质粒转染后PC-3细胞生长抑制率为40.4%。结论：成功构建p53与siRNA-mdm2共表达质粒,共表达质粒可抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖。     

低浓度接触异氰酸酯作业人员呼出气一氧化氮和肺功能研究

目的 研究低浓度异氰酸酯接触对气道炎症水平和肺功能的影响，探讨呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)在接触异氰酸酯作业人员职业健康检查中的应用。方法 2016—2017年，选择接触异氰酸酯的192名作业工人为研究对象，另选不接触职业病危害因素的91名年龄、性别构成相近的办公、后勤人员作为对照组。收集人员基本信息和近5年作业场所空气中异氰酸酯检测结果，对研究对象行肺功能检查、FeNO测定和沙丁胺醇支气管舒张试验，比较不同特征人群的各项指标的差异。结果 近5年工作场所空气中异氰酸酯检测结果远低于国家职业卫生标准。接触组的用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、第一秒用力呼气量(forced expiratory volume in first second,FEV₁)均高于对照组，FEV₁/FVC低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.001)。接触组和对照组FeNO水平差异无统计学意义(P>0.05)。接触异氰酸酯<7年组FEV_l