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1.
目的 提取、鉴定嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila, AKK)的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),初步探讨AKK的LPS对小鼠巨噬细胞的影响。 方法 试剂盒法提取AKK的LPS并纯化,ELISA法定量;BCA法、紫外分光光度法、SDS - PAGE和银染鉴定提取的LPS的纯度和结构;鲎试剂法检测LPS活性。体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,分为正常对照组、大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) LPS组和AKK LPS组。经LPS作用后,CCK - 8法检测细胞活性;RT - qPCR测定NF - κB、IL - 1β、IL - 6、TNF - α的mRNA表达水平。 结果 纯化的细菌LPS平均产率为7.14%,蛋白、核酸含量分别为0.005 6‰和2.12%;银染结果显示AKK的LPS条带分布与E.coli的LPS不同;鲎试剂测定其活性为7.10×107 EU/ml;部分干预浓度下,AKK LPS干预组细胞存活率低于E.coli LPS组;刺激6 h、12 h、24 h后,与正常对照组相比,AKK LPS干预组细胞内NF - κB的mRNA表达水平在干预6 h后显著上调,差异具有统计学意义(Z = - 3.606,P = 0.001);两种LPS干预组的IL - 1β、TNF - α、IL - 6 的mRNA表达水平在各时间点均高于对照组。 结论 提取的AKK的LPS纯度较高,生物活性良好; AKK 的LPS干预小鼠巨噬细胞,上调相关炎症因子IL - 1β、IL - 6、TNF - α及早期核转录因子NF - κB的转录表达。  相似文献   
2.
目的 探讨复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer, ROU)患者不同时期口腔菌群动态变化规律及其与健康者口腔菌群的差异分析。方法 采用16SrRNA测序技术分别对4例ROU患者和4例健康者多时间点唾液样本中口腔菌群进行检测,运用生物信息学技术分析两组受试者口腔菌群变化,探讨其不同状态和时期口腔菌群的动态变化规律。结果 ROU组不同时期口腔菌群多样性、菌群结构和菌群相对丰度之间存在部分差异,差异虽均无统计学意义,但部分菌群成分与ROU的发生发展过程呈现相关性,其中Streptococcus、Haemophilus和Rothia在ROU发病过程中下降,康复后恢复,而Porphyromonas表现为发病期升高,康复期恢复。ROU组发病时期(RAS)与对照(HC)组之间菌群结构存在显著差异(F=2.27,P=0.009)。在门水平上,RAS组TM7相对丰度显著高于HC组(P=0.011);在属水平上,ROU健康时期(JK)与RAS组Capnocytophaga(P=0.040;P=0.004)、Bulleidia(P=0.013;P=0.017)相对丰度显著高于HC组;在种水...  相似文献   
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