嗜黏蛋白阿克曼菌脂多糖对小鼠巨噬细胞的影响

目的 提取、鉴定嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila， AKK）的脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），初步探讨AKK的LPS对小鼠巨噬细胞的影响。 方法 试剂盒法提取AKK的LPS并纯化，ELISA法定量；BCA法、紫外分光光度法、SDS - PAGE和银染鉴定提取的LPS的纯度和结构；鲎试剂法检测LPS活性。体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7，分为正常对照组、大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） LPS组和AKK LPS组。经LPS作用后，CCK - 8法检测细胞活性；RT - qPCR测定NF - κB、IL - 1β、IL - 6、TNF - α的mRNA表达水平。 结果 纯化的细菌LPS平均产率为7.14%，蛋白、核酸含量分别为0.005 6‰和2.12%；银染结果显示AKK的LPS条带分布与E.coli的LPS不同；鲎试剂测定其活性为7.10×107 EU/ml；部分干预浓度下，AKK LPS干预组细胞存活率低于E.coli LPS组；刺激6 h、12 h、24 h后，与正常对照组相比，AKK LPS干预组细胞内NF - κB的mRNA表达水平在干预6 h后显著上调，差异具有统计学意义（Z = - 3.606，P = 0.001）；两种LPS干预组的IL - 1β、TNF - α、IL - 6 的mRNA表达水平在各时间点均高于对照组。 结论 提取的AKK的LPS纯度较高，生物活性良好； AKK 的LPS干预小鼠巨噬细胞，上调相关炎症因子IL - 1β、IL - 6、TNF - α及早期核转录因子NF - κB的转录表达。

Effects of lipopolysaccharide from Akkermansia muciniphila on mouse macrophages