3种食源性致病菌共增菌及三重PCR检测

目的 建立沙门菌、金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌三重PCR检测方法。方法 3株菌在本实验室自行研制的共增菌培养基(SSV培养基)混合培养16 h,分别对沙门菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、副溶血性弧菌collagenase基因设计特异性引物,建立三重PCR体系,通过对引物浓度、退火温度及循环次数进行优化,从而建立最优体系,并从特异性、重复性、灵敏性3个方面对体系进行评价。结果 三重PCR体系中,invA、nuc、collagenase引物浓度分别为10、12.5和12.5 nmol/L;最佳退火温度为55.6℃;目标菌的引物特异性好,且体系的检测灵敏度高,3株菌在三重PCR体系中的灵敏度都在10² CFU/mL以上。结论 建立的三重PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好。     

温度、pH值、盐度交互作用优化福氏志贺氏菌F2b培养条件

研究温度、pH值、盐度3个因素交互作用下食源性致病微生物福氏志贺氏菌F2b的最优培养条件.在温度、pH值、盐度单因素试验的基础上,应用 Box-Behnken中心组合试验原理,设计三因素交互作用试验.以温度、pH值、盐度为响应因子,以菌液的OD550为响应值,采用响应面法处理试验数据.结果表明,在所选的因素水平范围内,温度、pH值对F2b生长影响显著,温度、pH值之间交互作用显著.获得志贺氏菌F2b的最佳生长条件为温度35.8 ℃,pH值7.7,盐度0.76 g/dL.经过验证,实测值和预测值之间偏差为1.1%,表明响应面法优化F2b培养条件真实、快速、有效.     

副溶血性弧菌的温度预测模型

采用预测食品微生物学的方法研究了副溶血性弧菌的生长规律,测定了4～40 ℃副溶血性弧菌的生长曲线,并在此基础上建立了副溶血性弧菌的初级和二级预测模型.结果表明,在10～40 ℃,副溶血性弧菌的生长曲线呈典型的S形,适合用Gompertz和logistic模型拟合;当温度在4～10 ℃时,适合用线性回归方程拟合.副溶血弧菌的温度模型符合Ratkowsky3式,根据预测模型,副溶血弧菌的最低生长温度Tmin为5.5 ℃,最高生长温度Tmax为47.3 ℃,最适生长温度为34.6 ℃.最后,对模型进行了验证.     

副溶血弧菌多克隆抗体的制备及其特性分析

确定了副溶血弧菌多克隆抗体的制备方法:用体积分数0.05%甲醛于30℃灭活副溶血弧菌4 h制备抗原,并将此抗原分多次,以不同剂量免疫新西兰大白兔获得特异性多克隆抗体,以山羊抗兔IgG-HRP作为酶标二抗,通过间接ELISA法测定其多克隆抗体的效价、敏感性和特异性。结果表明:在免疫的第5周产生大量高效价抗体,效价最高可达1.6×105;此多克隆抗体对副溶血弧菌检测灵敏度为1×105CFU/mL;交叉反应和阻断试验结果显示,此多克隆抗体具有很强的特异性。     

盐度和加曲量对罗非鱼片加工废弃物速酿鱼露的影响

对罗非鱼片加工废弃物速酿鱼露的发酵工艺进行了初步研究，从氨基酸态氮、总酸、TVBN、色度、感官5个指标分析了速酿鱼露在不同盐度（4，7，10，13g／dL）和不同加曲量（质量分数10％、15％、2S％、35%）下的发酵状况，综合各指标的影响确定适宜的速酿发酵条件为：7g／dL盐度和10％的加曲量，在此条件下的鱼露发酵液氨基酸态氮、总酸含量较高、腐败程度低，风味感官评价较好。     

上海市市售水产品中副溶血性弧菌的分离、鉴定及耐药性研究

目的了解上海市市售水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)污染状况和耐药性,为防治Vp引起的食源性疾病提供依据。方法采集上海市各大农贸市场3类水产品共273份检测Vp,用统计学处理分析结果;K-B法进行药敏试验。结果水产品中Vp平均检出率为38.46%,其中甲壳类的检出率为50.96%,贝类为27.12%,鱼类为15.79%,三者间有极显著差异(P<0.01)。药敏试验结果显示,105株分离菌株对头孢曲松、萘啶酸和诺氟沙星100%敏感,对氨苄西林的耐药率达69.52%,有20株对多种抗生素耐药。结论上海市售水产品中Vp污染比较严重,药敏结果对多种抗生素耐药。     

以乳链菌肽为主的复合防腐剂对低温火腿肠保质期、色泽和质构的影响

采用正交试验方案筛选得到以乳链菌肽(Nisin)为主的复合防腐剂,可以延缓低温火腿肠中的微生物引起的腐败,保质期达到3个月.在研究Nisin复合防腐剂延长低温火腿肠保质期的同时,分析了添加Nisin等食品添加剂对低温火腿肠色泽和质构的影响.结果表明低温火腿肠的色泽在辅料A0.25～0.50g/kg,辅料B20～25g/kg,辅料C1.5g/kg,辅料D0.15～0.25g/kg时较理想;低温火腿肠的硬度只与辅料A和辅料B二因素有关,当辅料A0.10g/kg,辅料B20g/kg时硬度较大.低温火腿肠的弹性在辅料A0.10g/kg,辅料B1.5g/kg,辅料C0.15g/kg时较好