稳定表达stathmin Ser25磷酸化位点突变的肝癌细胞株的建立

目的：建立稳定表达stathmin Ser25磷酸化位点点突变（stathmin S25A）的肝癌细胞株。方法：采用PCR定点突变的方法构建stathmin S25A的重组质粒,并用酶切和测序技术鉴定突变结果;采用脂质体转染的方法,筛选建立stathmin野生型（wt）和突变型（S25A）的肝癌细胞HCCLM6,用Western blotting进行鉴定。结果：定点突变构建stathmin S25A的重组质粒,测序证实stathmin 25位丝氨酸突变为丙氨酸。将stathmin wt和S25A转染HCCLM6,筛选建立稳定表达的肝癌细胞株,Westernblotting检测发现stathmin pS25在stathmin S25A细胞中的表达较stathmin wt和对照组细胞明显下降（P〈0.05）。结论：建立了稳定表达stathmin S25A的肝癌细胞株,为研究stathmin位点磷酸化在肝癌发病中的分子机制提供实验模型。     

CCK-8对糖尿病大鼠胰岛细胞损伤保护相关蛋白质的实验分析

目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对糖尿病大鼠胰岛细胞损伤的保护作用.方法 检测CCK-8对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病大鼠模型的刺激前后血糖和血清胰岛素的水平,采用双向电泳并结合生物信息学方法,观察刺激前后胰腺组织蛋白质表达的差异.结果 初步确定了CCK-8刺激引起胰岛细胞JIP1、RBBP7、PP2AB、PDX1、BCLX 5种蛋白质的表达明显增强,这些蛋白在促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、刺激胰岛素基因表达等方面发挥重要作用.结论 CCK-8可能通过刺激特异蛋白质的表达,对糖尿病大鼠受损胰岛细胞起到一定的保护和恢复作用.     

检验专业医学分子生物学教学改革与实践

为适应新形式下对检验专业本科生素质教育的需要,全面提高教学质量,努力培养高素质的专业人才,对检验专业的医学分子生物学必修课进行了改革探索.通过结合学科和专业特点,在教学内容、教学方法和开放实验教学等方面进行了合理调整和优化改革,研究结果显示,改革后的课程教学体系有利于学生对理论知识的理解和应用,并能提高学生的自主学习能力、动手能力、创新能力和科学思维能力.     

乙醛对大鼠肝星状细胞株HSC—T6激活、增殖及转分化的影响

目的：观察乙醛对大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）激活、增殖并转分化为肌成纤维细胞的影响。方法：HSC—T6细胞常规培养及乙醛处理;VG染色法形态学及MTT法检测细胞增殖;ELISA法检测I型胶原蛋白（TIMPI）、纤维粘连素（FN）的表达;Westernblottin譬检测细咆内效应蛋白0L—SMA的表达。结果：VG染色乙醛束Ij激明显促进HSC贴壁及重叠、明显促进HSC增殖和显著增加胶原纤维蛋白的表达;MTT检测结果发现乙醛刺激明显增强HSC活性（P〈0．05）;ELISA结果表明乙醛刺激组较对照组TIMPI和FN的表达明显上调（P〈0．05）;Western blotting检测结果显示,乙醛刺激明显促进仅一SMA表达（P〈0．05）。结论：乙醛刺激可明显激活HSC～T6细胞株,并促进其增殖及转分化为肌成纤维细胞。     

利用组织芯片研究stahmin在肝癌相关肝病组织中的表达

目的研究stathmin在肝癌相关肝病组织芯片的表达和作用。方法应用组织芯片技术,采用免疫组织化学SP法检测正常肝组织、HBV肝炎、肝硬化和肝癌组织中stathmin的表达。结果 stathmin在正常肝组织、肝炎、肝硬化组织中表达低(积分光密度分别为38.04±6.46、73.69±15.22、84.35±21.95);在肝癌组织中表达高,其中转移的肝癌组织较未转移的肝癌组织表达更高(积分光密度达605.23±99.03vs.387.66±77.41,P<0.01)。结论 stathmin的表达水平与肝癌的发生发展进程相关,为肝癌早期诊断治疗提供理论依据。     

Wnt信号转导通路与组织器官纤维化

Wnt信号转导通路是近年来分子生物学、细胞生物学和肿瘤研究中的一大热点,Wnt蛋白在动物的生长发育过程中,对细胞的增殖、分化和迁移起巨大的调节作用,决定细胞的极性、命运、前体细胞的增殖、体轴的建立,以及细胞的不对称分裂等。在成年以后,则主要参与机体内平衡稳定。Wnt信号转导通路参与了胚胎发育及成体组织细胞增殖、分化及凋亡等调控过程。Wnt通路的过度激活常引起细胞过度增殖及凋亡减弱,     

乙醛对大鼠肝星状细胞株HSC-T6激活、增殖及转分化的影响

目的:观察乙醛对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)激活、增殖并转分化为肌成纤维细胞的影响.方法:HSC-T6细胞常规培养及乙醛处理;VG染色法形态学及MTT法检测细胞增殖;ELISA法检测Ⅰ型胶原蛋白(TIMP Ⅰ)、纤维粘连素(FN)的表达;Western blotting检测细胞内效应蛋白α-SMA的表达.结果:VG...     

医学分子生物学考试模式改革

考试是促使学生时课程全面系统再学习的一个好方法，是检查学生掌握本学科知识的重要手段．也是教学过程的重要组成部分。分子生物学是医学院校各专业一门重要的基础课程。通过多元化考试模式的不断完善．有助于教师及时发现判定教学工作的成效，采取有针对性的改进措施改进教学方法，保证教学质量。     

不同浓度Van Gieson染色液对细胞染色的研究

目的不同浓度VG氏染色液对细胞培养后的染色效果的研究,寻求理想的配置浓度。方法大鼠肝星状细胞（HSC-T6）培养,细胞爬片,经乙醛刺激细胞活化后,通过HE、VG氏染色,观察胶原纤维和肌源性成分的染色效果。结果 VG染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液）,临用前分别按A：B=2：1、1：1、1：2三种配方中肌性纤维和胶原纤维都染成不同程度的品红色。A：B=1：9配方中肌性纤维染成黄色,胶原纤维染成红色。A：B=5：95、1：99配方中两者都染成黄色。结论 A：B=1：9此种染色两种成分明显,效果最佳,其余比例染色效果呈单一色,无鉴别作用。