CD40配体对套细胞淋巴瘤细胞系增殖的影响

套细胞淋巴瘤（MCL）是一种表达CD5的非霍奇金B细胞淋巴瘤,以中等大小B细胞侵入外套层为特征。CD40L与CD40间的相互作用对B细胞的增殖与分化有重要意义。对于不同阶段的B细胞,CD40L的刺激可产生抑制或诱导分化的作用。在本次研究中,利用SP49和SP53这两个套细胞淋巴瘤细胞系对CD40L反应作了研究。与表达CD40L的鼠淋巴细胞混合培养后,BrdU结合的SP49及SP53细胞减少了1/2～1/3,而BrdU结合的对照细胞系（包括Ramos,BJAB and BALL-1）无反应或增加。抗CD40L抗体在0～20 ng/ml时能封闭CD40L对SP49细胞增殖的抑制作用。这些结果提示CD40L在活体内可能对MCL增殖有抑制作用。     

53 BP1在弥漫大B细胞淋巴瘤和MALT淋巴瘤中的表达及其意义

目的：研究53BP1在弥漫大B细胞淋巴瘤和MALT淋巴瘤中的表达情况,探讨53BP1表达强度在弥漫大B细胞淋巴瘤和MALT淋巴瘤中的意义。方法：采用免疫组化法对12例弥漫大B细胞淋巴瘤、20例MALT淋巴瘤和10例肿瘤周围反应性增生的淋巴结组织切片做53 BP1的抗原标记,检测其各自表达情况,结合临床病理资料分析它们之间的关系。结果：53BP1在弥漫大B细胞淋巴瘤中高强度表达,表达强度与在MALT淋巴瘤和反应性增生的淋巴结组织的表达强度有明显差异（P＜0.01）;在MALT淋巴瘤中和反应性增生的淋巴结组织中呈低强度表达,表达强度无明显差异（P＞0.05）。结论：53BP1在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达强度较高,在MALT淋巴瘤中的表达强度较低,53BP1的表达强度可能作为诊断淋巴瘤恶性程度的潜在指标。     

KLF7对小鼠脱细胞异体神经支架移植后运动功能的影响

目的:探讨核转录因子KLF7对脱细胞异体神经支架(ANA)移植修复坐骨神经缺损后小鼠运动轴突再生和运动功能恢复的影响。方法:制作C57BL/6小鼠坐骨神经缺损模型,用ANA进行桥接修复,在ANA注射腺相关病毒2(AA2)或腺相关病毒2-KLF-7(AAV2-KLF7,2μl,1×10~(11)病毒颗粒)。于修复术后4周,Western Blot和免疫荧光染色检测ANA内KLF7蛋白表达,NF和S100免疫荧光染色检测ANA内轴突再生和髓鞘生成,神经示踪剂荧光金(FG)逆行标记检测运动轴突再生,坐骨神经运动功能指数(SFI)和电生理检测运动功能的恢复。结果:AAV2-KLF7注射ANA后4周,ANA内KLF7蛋白表达显著增高,NF和S100表达显著增加,FG阳性标记脊髓运动神经元的数量增加,坐骨神经功能指数增加,电生理动作电位波幅增大,潜伏期缩短(P0.05)。结论:KLF7促进小鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后运动轴突再生和髓鞘形成,有助于运动功能恢复。     

喉癌中胶原和钙结合EGF域1的表达与VEGF-C和淋巴管生成及预后的关系

目的 探讨胶原和钙结合EGF域1(Ccbe1)在喉癌组织中的表达及其与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、淋巴管生成及预后的相关性.方法 以45例经病理确诊的喉癌组织为实验组,20例喉良性病变组织为对照组,采用免疫组织化学法和Western bolt法对上述组织中Ccbe1和VEGF-C蛋白的表达进行分析,同时应用LYVE-1免疫组化染色计数淋巴管密度(LVD),并结合临床病理特征和生存资料进行相关分析.结果 喉癌组织中Ccbe1和VEGF-C的蛋白表达均高于良性病变组织(P＜0.05),且Ccbe1和VEGF-C的表达具有相关性(r=0.338,P＜0.05);在喉癌组织中Ccbe1的表达与 LVD、淋巴结转移和TNM临床分期密切相关(P＜0.05),Ccbe1阳性表达与生存率负相关(p＜0.05).结论 Ccbe1能够促进喉癌淋巴管生成,其机制可能语 上调VEGF-C表达有关,检测Ccbe1表达可成为判断喉癌预后新的生物学指标.     

双色上转换纳米荧光探针在套细胞 淋巴瘤细胞靶向成像中的应用

目的 构建上转换纳米靶向探针，并探究其在特异性标记套细胞淋巴瘤细胞株中的应用价值，为 体内套细胞淋巴瘤的靶向诊断提供理论依据和指导。方法 采用H2O2 对NaYF4 ：Er3+ 和NaYF4 ：Yb3+，Tm3+ 上 转换纳米粒子表面进行氧化处理，使该粒子由最初的疏水性转变为亲水性；在NHS、EDC 的作用下，亲水性 的NaYF4 ：Er3+ 上转换纳米粒子与CD20 单克隆抗体共价结合，NaYF4 ：Yb3+，Tm3+ 上转换纳米粒子与CD5 单 克隆抗体共价结合；CD20 抗体-NaYF4 ：Er3+ 纳米粒子轭合物和CD5 抗体-NaYF4 ：Yb3+，Tm3+ 纳米粒子轭合 物的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h ；CD20 抗体-NaYF4 ：Er3+ 纳米粒子轭合物和NaYF4 ： Yb3+，Tm3+ 纳米粒子的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h ；NaYF4 ：Er3+ 纳米粒子和CD5 抗体 -NaYF4 ：Yb3+，Tm3+ 纳米粒子轭合物的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h ；未偶联有任何抗体 的NaYF4 ：Er3+ 和NaYF4 ：Yb3+，Tm3+ 上转换纳米粒子的混合液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h ；使用配 备有980 nm 近红外激光的尼康Eclipse Ti-S 倒置荧光显微镜对各组细胞进行上转换成像，观察细胞表面上转 换荧光的强度。结果 实验组细胞表面释放出蓝、绿双色的上转换纳米荧光，但通过观察3 组对照实验，细胞表 面却仅分别释放出单一的绿色荧光、蓝色荧光以及未见任何荧光。结论 上转换纳米粒子与CD20 或CD5 抗体 成功共价偶联，可以对套细胞淋巴瘤细胞株进行特异性标记、成像。     

EB病毒感染套细胞淋巴瘤细胞株的表型研究

目的：建立EBV潜伏感染的体外理想模型。方法：我们利用新霉素耐性的重组遗传基因EBV（NeoR EBV）对套细胞的细胞株SP53进行感染，用G418筛选，选出100％EBV阳性的MCL细胞株SP53／EBV。结果：此细胞株表达EBER1、EB．NAs、LMP1，表现出LCL型的EBV潜伏感染的免疫表型．结论：这次我们建立的SP53／EBV细胞株，具有低增殖功能，没有诱导出活性指标等特点，可考虑为机体内EBV休眠期B细胞具有的特征，期待此细胞株可成为研究体内EBV潜伏感染的良好模型。     

末梢血中EB病毒潜伏感染的静息B细胞模型的建立

目的 应用EB病毒(EBV)感染末梢血CD5⁺B细胞,建立体内储存EB病毒的静息B细胞模型。方法 应用磁珠技术分离脐胎血中的CD5⁺B细胞;从新酶素耐性的Atada-EBV细胞中提取EB病毒对CD5⁺B细胞进行转染制备CD5⁺B/EBV细胞;流式细胞仪、Western blot法检测CD5⁺B/EBV细胞的病毒免疫表型和基因表型;免疫荧光双重染色BrdU、Ki67和EBNA2检测CD5⁺B/EBV细胞增殖活性。结果 流式细胞仪检测显示CD5⁺B/EBV细胞病毒免疫表型CD20、CD80、CD38和CD86表达增强,CD23没有表达;CD5⁺B/EBV细胞EBNA2和LMP1病毒相关潜伏感染基因显著增高;免疫荧光染色检测EBNA2阳性的CD5+B/EBV细胞可见BrdU阴性细胞。经因子激活CD5⁺B/EBV后可见Brdu阴性细胞中有Ki67阳性细胞存在,而在EBNA2阳性细胞中可见Ki67阴性细胞,验证CD5⁺B/EBV细胞中静息B细胞的存在。结论 本研究建立的CD5⁺B/EBV细胞具有体内EBV潜伏感染的静息B细胞的特征。     

二氢睾酮联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子及其受体TrkB表达的影响

目的探讨二氢睾酮(DHT)与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对小鼠脱细胞同种异体神经支架移植坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体Trk B的表达和功能恢复的影响。方法 30只成年C57BL/6小鼠随机分为脱细胞神经支架(ANA)组、ADSC组和DHT+ADSC组。坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比方法检测神经运动功能的恢复,Western印迹检测神经移植体内BDNF及其受体Trk B的蛋白表达。NF200免疫荧光法检测神经支架中轴突表达,并示踪PKH26标记的移植ADSC。结果与ADSC组比较,DHT+ADSC组神经移植体内BDNF和Trk B蛋白相对表达明显增高,NF200表达增强,PKH-26标记的ADSC数量显著增高(P0.05)。与ANA组比较,ADSC组和DHT+ADSC组电生理波幅明显增高、神经传导速度明显增快、延迟期明显缩短、胫前肌湿重比率明显增高,其中DHT+ADSC组神经恢复作用显著优于ADSC组(P0.05),而且DHT+ADSC组SFI明显高于ANA组和ADSC组(P0.05)。结论 DHT联合ADSC移植对小鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的作用优于ADSC组,其机制可能与促进神经移植体内BDNF及其受体Trk B表达,进而促进移植的ADSC存活有关。     

普罗布考对心脏微血管内皮细胞eNOS脱耦联与NADPH氧化应激途径的影响

目的观察普罗布考对心脏微血管内皮细胞内内皮型一氧化氮合酶（eNOS）脱耦联的作用,探讨其作用机制。方法100 mg•L－1牛血清清蛋白糖基化终末产物（BSA AGEs）与5,10,20 μmol•L－1普罗布考作用于心脏微血管内皮细胞24 h,检测四氢生物喋呤（BH4）、一氧化氮（NO）和超氧阴离子（O2 ）,免疫组织化学检测eNOS蛋白表达情况,荧光染色检测活性氧簇（ROS）,Western blot检测p47phox蛋白。结果随着普罗布考浓度增加,NO生成增加,O2 生成减少,eNOS表达减少,BH4含量增加,ROS表达降低,p47phox表达减少（P＜0.01或P＜0.05）。结论普罗布考能抑制AGEs诱导的心脏微血管内皮细胞eNOS脱耦联,其机制可能与抑制NADPH氧化应激有关。     

开心散影响突触可塑性的研究进展

本文综述了中药复方开心散对突触可塑性、长时程增强效应的影响,表明了开心散能够促进突触的长时程增强的形成与巩固,对抗某些物质对长时程增强的抑制作用,显示了良好的促进记忆和学习的作用。