Src羧基端激酶结合蛋白影响线粒体分裂及NK细胞杀伤肺癌细胞活性的分子机制探讨

目的:探究Src羧基端激酶结合蛋白（csk-binding protein,CBP）在人肺癌组织中的表达水平,及其对线粒体分裂和自然杀伤（natural killer,NK)细胞杀伤肺癌细胞活性的影响。方法:免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测肺癌组织及癌旁组织中CBP的表达;含CBP慢病毒感染人肺癌细胞株A549,通过荧光倒置显微镜、qRT-PCR 和Western blot检测细胞感染效果;CCK-8法检测各组A549细胞活性,Mito-Tracker染色观察各组A549细胞内线粒体形态和长度变化,Western blot检测各组A549细胞线粒体动态相关蛋白Mfn1、Mfn2、Drp1的表达,免疫荧光染色检测各组A549细胞内细胞色素C（Cyt C）的表达,流式细胞术检测各组A549细胞凋亡情况;从人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中分离NK细胞并进行鉴定,乳酸脱氢酶释放实验检测NK细胞对各组A549细胞的杀伤率。结果:肺癌组织中CBP的表达水平较癌旁组织中明显下降（P＜0.01）;感染CBP过表达慢病毒的A549细胞中CBP mRNA和蛋白的相对表达量均升高,培养48 h、72 h、96 h后细胞增殖活性下降,线粒体呈椭圆状或短杆状,长度明显缩短,线粒体分裂相关蛋白Mfn1、Mfn2蛋白表达减少,Drp1蛋白表达增加,有大量Cyt C从线粒体释放,细胞凋亡率升高,同时NK细胞对A549细胞的杀伤率明显提高,差异均具有统计学意义（P＜0.01）;而在使用线粒体分裂蛋白抑制剂Mdivi-1预先处理A549细胞后再感染CBP过表达慢病毒,线粒体分裂受到抑制,Mfn1、Mfn2蛋白表达增加,Drp1蛋白表达减少,Cyt C释放减少,细胞凋亡率降低,NK细胞对A549细胞的杀伤率也受到抑制,差异均具有统计学意义（P＜0.01）。结论:CBP在人肺癌组织中低表达,在A549细胞中过表达CBP能够促进线粒体分裂与细胞凋亡,并提高NK细胞对A549细胞的杀伤率。     

中医外治法治疗食管癌评述

中医外治法中的针刺、艾灸、穴位贴敷、按摩、中药保留灌肠、耳穴、放血、足浴、药熨等治疗方法,在食管癌治疗中应用广泛。能够有效缓解患者吞咽困难、恶心、呕吐、腹胀、便秘、疼痛等临床症状,提高机体免疫力和生活质量,增强防病抗病能力。其中,针刺疗法在缓解吞咽困难、呃逆及术后身体机能的恢复方面,效果较好;艾灸疗法在治疗腹胀方面优于其他方法;穴位贴敷常用于恶性肿瘤,贴敷药物不同,治疗效果有所差异;推拿疗法更适合治疗食管癌术后腹胀、肠梗阻;中药保留灌肠疗法可有效治疗患者胃肠功能紊乱;耳穴疗法具有诊断和治疗的双重作用,所治疗病症较多。但中医外治疗法缺乏实验室数据,临床机理尚不明确,临床样本量较小。未来可进行大样本临床研究,为中医外治法治疗食管癌的推广和应用奠定基础。     

消痰化瘀通噎颗粒配合通道开结丸联合化疗治疗食管癌的临床疗效研究

背景 食管癌病因复杂，愈后较差，严重威胁患者的生命健康，中西医结合的个体化治疗具有一定的优势。目的 观察消痰化瘀通噎颗粒配合通道开结丸联合CF方案（氟尿嘧啶+顺铂）治疗Ⅲ～Ⅳ期痰瘀互结型食管鳞癌的临床疗效。方法 选取2020年2月—2021年2月在河南省中医院、安阳市肿瘤医院及河南省肿瘤医院诊治的Ⅲ～Ⅳ期辨证为痰瘀互结型食管鳞癌患者99例为研究对象。将患者随机分为对照组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组，每组均为33例。对照组给予CF方案治疗，治疗Ⅰ组给予消痰化瘀通噎颗粒联合CF方案，治疗Ⅱ组给予消痰化瘀通噎颗粒配合通道开结丸联合CF方案，21 d为1个疗程，共4个疗程。观察三组患者在中医症候积分、生活质量评分、功能状态（KPS）评分、病灶缓解率、癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞癌抗原（SCC）及毒副作用方面的差异性。结果 三组患者性别、年龄、体质量、肿瘤分期比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与治疗前相比，三组患者治疗后胸骨后疼痛、恶心呕吐、咯吐黏液、呕吐物评分及总积分均降低，对照组和治疗Ⅱ组吞咽困难、食少、大便干燥评分均降低（P<0.05）；与治疗前相比，三组患者治疗后生活质量评分均...     

虎七散加减方治疗食管癌有效性及安全性的Meta分析※

目的:评价虎七散(壁虎、三七)加减方治疗食管癌的有效性及安全性。方法:计算机检索中外文数据库,时间自各库建库至2020年7月所收录的相关文献。提取纳入文献基本信息,运用Cochrare系统评价方法对纳入文献质量进行综合评估,运用Revman5.3软件进行Meta分析。结果:最终纳入文献共17篇,样本总量为1619例。Meta分析后显示:虎七散加减方联合放化疗在提高食管癌患者近期临床疗效、提升吞咽缓解率、生活质量状况(KPS)及降低不良反应(骨髓抑制、白细胞减少、血小板降低、消化道反应)方面较对照组更佳,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:虎七散加减方可以提升食管癌患者近期临床疗效,缓解吞咽困难症状,降低不良反应的发生率,提高患者生活质量。     

马纯政分阶段治疗食管癌经验撷菁※

马纯政教授认为食管癌病因主要为气滞、痰凝、血瘀、癌毒，常以降气化痰、活血祛瘀、疏肝行气、清热解毒等为主要治疗方法；治疗上，以辨证论治为基础，对患者分成早、中、晚期三个阶段进行治疗，并佐以抗癌散结类药物；临床诊疗中，善于运用威灵仙、冬凌草、壁虎、三七、红豆杉、石上柏等特色药物治疗食管癌。     

丁香管食通含化丸单用及联合附桂管食通颗粒治疗晚期食管癌的临床研究

背景 中医药已成为不能手术、放疗、化疗或化疗后疾病进展的晚期食管癌患者的重要选择，本研究旨在探讨丁香管食通含化丸单用及联合附桂管食通颗粒的应用效果，以期提高晚期食管癌患者生活质量，为食管癌的中医治疗提供疗效确切的方案。目的 评价丁香管食通含化丸单用及联合附桂管食通颗粒对食管癌患者治疗6周后生存率和生活质量的影响。方法 选取2020年1月—2021年4月河南中医药大学第一附属医院、林州市中医院、郏县中医院等9个中心收治的晚期食管癌患者109例为研究对象。利用区组随机法将晚期食管癌患者分为三组：对照组、试验1组、试验2组，各40例。对照组给予当归补血汤合桂枝人参汤颗粒；试验1组给予丁香管食通含化丸联合附桂管食通颗粒；试验2组给予丁香管食通含化丸，疗程6周。比较三组患者治疗6周后的生存率及治疗前后生活质量（QOL）评分、体力状况（KPS）评分、中医证候积分（吞咽困难、胸骨后疼痛、呕吐黏液、食欲减退、神疲乏力），并进行安全性评价。结果 治疗6周后，对照组生存率为72.7%，试验1组生存率为88.6%，试验2组生存率为86.8%，三组患者治疗6周后生存率比较，差异无统计学意义（χ2=4.036,...     

附桂管食通颗粒提高晚期食管癌生存率临床研究

目的：研究附桂管食通颗粒对脾肾阳虚、顽痰痼血型晚期食管癌患者治疗后42 d 生存率、T 细胞 亚群、食管癌相关肿瘤标志物的影响。方法：纳入9 个中心共120 例患者，利用区组随机法分为试验1 组、试 验2 组、对照组各40 例。试验1 组给予附桂管食通颗粒合丁香管食通含化丸；试验2 组给予丁香管食通含化 丸；对照组给予当归补血汤合桂枝人参汤颗粒，疗程为42 d。比较3 组治疗42 d 后的生存率、T 细胞亚 群（CD3+、CD4+、CD8+） 及癌胚抗原（CEA）、鳞状上皮细胞癌抗原（SCCA），并进行安全性评价。结果：试 验1 组生存率88.6%、试验2 组生存率86.8%、对照组生存率72.2%，3 组比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）。治疗后，3 组CD4+、CD8+、CEA 在时间上差异均有统计学意义（P＜0.05），组间差异无统计学意 义（P＞0.05）。3 组CD3+、SCCA 在组间和时间上差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：附桂管食通颗粒可 一定程度提高晚期食管癌患者生存率，并提高机体免疫功能。     

共培养体系中IL-15通过激活NK细胞ULBP1/NKG2D信号抑制食管癌细胞的迁移和侵袭北大核心CSCD

目的:探讨IL-15对食管癌细胞和自然杀伤(NK)细胞共培养体系中NK细胞活性以及对食管癌细胞迁移和侵袭的影响和机制。方法:qRT-PCR和Western blot检测人正常食管上皮细胞(HEEC)和食管癌细胞系TE-1中IL-15水平。TE-1与NK细胞共培养,共培养体系分为对照组(无处理)、IL-15组(0.2、0.4、0.8μg/ml的IL-15)、IL-15+anti-NKG2D组[UL16结合蛋白/自然杀伤组蛋白2D(ULBP1/NKG2D)的阻断剂anti-NKG2D联合IL-15(0.8μg/ml)]、anti-NKG2D组、IL-15+anti-ASIALO-GM1组[NK细胞抑制剂anti-ASIALO-GM1联合IL-15(0.8μg/ml)]及anti-ASIALO-GM1组。细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测TE-1细胞的迁移和侵袭能力,CCK-8法检测NK细胞增殖率,Western blot检测各组NK细胞表面ULBP1/NKG2D表达,免疫共沉淀技术检测NKG2D与ULBP1的相互作用。结果:TE-1细胞中IL-15水平低于HEEC细胞(P<0.05)。0.2、0.4、0.8μg/ml IL-15处理共培养体系提高NK细胞增殖率,但降低TE-1细胞的迁移率和侵袭率(均P<0.05)。在TE-1与NK细胞的共培养体系中,IL-15组(0.8μg/ml)NK细胞膜蛋白ULBP1和NKG2D水平较对照组上调(均P<0.05);anti-NKG2D抑制了NKG2D表达,并抑制了NKG2D与ULBP1的相互作用,与IL-15(0.8μg/ml)组相比,IL-15+anti-NKG2D组NKG2D表达水平和NK细胞增殖率均降低(均P<0.05),但TE-1细胞的迁移率和侵袭率升高(均P<0.05),且NK细胞抑制剂anti-ASIALO-GM1与anti-NKG2D的作用效果一致。结论:IL-15通过激活细胞表面ULBP1/NKG2D信号促进NK细胞活性,从而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭。