不同病因对卵母细胞透明带、胚胎发育和妊娠结局的影响

目的:探讨女性不同病因对卵母细胞透明带、胚胎发育和妊娠结局等的影响。方法:回顾性分析因单因素不孕体外受精治疗的197个周期,以输卵管因素为对照组(n=145),比较多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)(n=25)、子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)(n=19)和不明原因不孕症(n=8)等各组的受精率、种植率、妊娠率以及透明带双折射性和透明带厚度。结果:平均获卵数PCOS组(17.9±1.9枚)显著高于其它各组(对照组:11.3±0.6枚,EMs组:9.4±1.2枚和不明原因组:13.1±2.9)(P<0.01),其它各组无统计学差异(P>0.05);PCOS组、EMs组和不明原因组受精率(83.66%、75.40%、77.12%)、优质胚胎率(57.26%、51.14%、59.30%)、种植率(25.53%、17.39%、29.40%)和妊娠率(52.38%、41.18%、42.86%)与对照组(80.13%、58.99%、28.76%、43.70%)间无统计学差异(P>0.05),但EMs组各项指标均低于对照组。透明带双折射值各组间差异极显著(对照组:7.13±0.28,PCOS组:4.97±0.55,EMs组:3.67±0.75,不明原因组:14.19±1.41)(P<0.01),其中EMs组透明带双折射值最低。受精当日透明带厚度EMs组显著高于其它各组(对照组:18.84±0.07,PCOS组:18.48±0.17,EMs组:19.75±0.24,不明原因组:18.98±0.26)。结论:EMs对受精率、妊娠率和透明带双折射值等的影响最明显,透明带的双折射值和厚度可在一定程度上反映不同病因对卵母细胞发育潜力的影响。     

中青年女性肝前脂肪厚度与腹腔内脂肪厚度及肥胖人体测量值的相关性研究

目的探讨应用超声检测中青年女性肝前脂肪厚度与腹腔内脂肪厚度及肥胖人体测量值的相关关系。方法对330例18～47岁中青年女性采用超声检测肝前脂肪厚度和腹腔内脂肪厚度,并测量身高、体重、腰围、臀围等肥胖人体指标,分析肝前脂肪厚度与腹腔内脂肪厚度及人体有关测量值的相关关系。结果直线相关分析显示肝前脂肪厚度与腹腔内脂肪厚度呈正相关关系(P0.05),与体重、体质量指数、腰围、臀围、腰臀比等肥胖人体测量值呈正相关关系(P0.05),而与身高无明显相关关系(P0.05)。结论 18～47岁女性肝前脂肪厚度与腹腔内脂肪厚度及肥胖有关人体测量值呈正相关关系,超声检测肝前脂肪厚度在临床应用中有简单、精确、实用的优点。     

卵母细胞人工激活治疗卵质内单精子注射受精失败的临床应用及研究进展

卵质内单精子注射(ICSI)技术是治疗男性不育的有效手段,但是ICSI周期完全受精失败的发生率为2%～3%,同时男性精子严重畸形仅采用ICSI治疗仍无法正常受精。卵子激活障碍是导致受精失败的最主要因素,而卵子辅助激活可以人工诱发钙振荡激活卵子,促进正常受精。近年来卵母细胞人工激活在临床中的应用越来越广泛,成为治疗ICSI受精失败的主要辅助技术,但该技术临床应用的安全性仍存争议。本文就人卵子辅助激活技术在ICSI受精失败中的临床应用现状及其研究进展进行综述。     

uPA和PAI-1基因克隆及真核表达载体的构建及鉴定

目的：克隆人卵巢上皮癌组织uPA和PAI-1基因cDNA全长,构建表达uPA和PAI-1基因的真核表达载体。方法：采用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA和PAI-1基因的cDNA全长,克隆到pGEM-TEasy Vector上,通过酶切和测序进行鉴定;酶切后与真核表达载体pcDNA3.1/myc-his（-）B连接,酶切及测序再次鉴定;采用脂质体法将重组质粒DNA转染至卵巢癌上皮细胞SKOV3细胞;采用有限稀释法和G418分别加压筛选并培养SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞及对照细胞;Western blot法检测转染前后SKOV3细胞uPA和PAI-1基因的表达。结果：成功扩增出uPA和PAI-1基因的cDNA的全长,并克隆入T载体,DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3.1-uPA和pcDNA3.1-PAI-1,Western blot能检测到uPA和PAI-1基因蛋白分别在SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞中的表达。结论：成功构建了uPA和PAI-1表达基因的真核表达载体,为进一步研究uPA和PAI-1基因在卵巢癌侵袭转移中的作用提供了实验基础。     

非肥胖型PCOS不孕患者超声测量肥胖指标的临床研究

目的:探讨体重指数(BMI)正常的不孕症患者中,多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)即非肥胖型PCOS(NOB-PCOS)与非PCOS(对照组)患者之间内脏脂肪厚度(visceral fat thicknes,VFT)及判断肥胖相关的人体测量值的差异,为更好地治疗NOB-PCOS不孕症提供依据。方法:检测不孕症患者中BMI正常的140例PCOS及81例非P-COS患者的基础性激素,用超声检测腹部皮下脂肪、内脏脂肪、肝前脂肪、肝前皮下脂肪厚度,测量身高、体重、腹围、腰围、臀围等,对两组间上述指标进行分析。结果:NOB-PCOS组血清促黄体生成素(LH)、睾酮(T)明显高于非PCOS组(P<0.05);NOB-PCOS组腹围、腹部皮下脂肪厚度及内脏脂肪厚度明显高于非PCOS组(P<0.05)。结论:NOB-PCOS不孕症患者腹围、腹部皮下脂肪及内脏脂肪厚度等判断肥胖的指标大于非PCOS患者,治疗时应引起重视。     

卵母细胞透明带厚度和双折射值的相关性研究

目的:卵母细胞透明带厚度(ZT)和双折射值(ZB)的相关性。方法:回顾性分析了214个IVF周期中不同年龄病人、不同成熟度的卵母细胞ZB和ZT。结果:20～29岁组ZT和ZB显著高于≥40岁组(18.24±0.16μm vs.16.67±0.41μm;8.77±0.42 vs.5.25±1.72)(P<0.01),也高于30～39岁组(18.24±0.16μm vs.17.58±0.15μm)(P<0.01),(8.77±0.42 vs.7.59±0.52)(P<0.05);ZT和ZB与年龄均呈负相关,分别为rZT=-0.195和rZB=-0.200(P<0.05),ZT和ZB之间呈正相关r=0.255(P<0.01);MII期卵母细胞ZB、ZT值均显著低于GV期(7.91±0.65 vs.20.77±1.88,17.80±0.22μm vs.19.42±0.43μm)(P<0.01),也低于MI期卵母细胞(7.91±0.65 vs.10.99±1.35;17.80±0.22μm vs.19.03±0.63μm)(P<0.05)。MII期和MI期卵母细胞ZT与ZB呈正相关,相关系数分别为r=0.125和r=0.239(P<0.05),但GV期卵母细胞ZT和ZB之间无明显相关性。结论:卵母细胞ZT和ZB均随病人年龄和成熟度增加而降低,除GV期卵母细胞外,ZT和ZB存在相关关系,ZT能反映病人年龄和成熟度对卵母细胞的影响,ZT在一定程度上可以反映ZB值。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子介导的卵巢上皮癌细胞浸润转移体外的实验研究

目地:探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子在卵巢上皮癌浸润转移中的作用机制。方法:用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA基因cDNA全长,克隆至pGEM-T Easy Vector,鉴定后与真核表达载体PCMV-HA连接,酶切及测序。用脂质体法将重组质粒DNA转染至SKOV3细胞。加压筛选并培养PCMV-HA-uPA及对照细胞。分别用RT-PCR和W estern blot方法检测转染前后SKOV3细胞uPA的表达。细胞增殖能力测定用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,细胞周期测定用流式细胞仪法,细胞体外侵袭,迁移和黏附能力测定分别采用Matrigel Invasion,TranswellM igration和Adhersion Assay方法。结果:(1)uPA阳性表达能介导SKOV3细胞克隆形成,与对照组细胞的差异有统计学意义(P<0.05);(2)uPA阳性表达能介导SKOV3细胞的细胞周期中S期比例增加,与对照组细胞的差异有统计学意义(P<0.05);(3)uPA阳性表达介导SK-OV3细胞的体外侵袭,迁移和黏附能力均明显强于对照细胞株,差异有统计学意义(P=0.0002,<0.0001和0.0049)。结论:uPA通过促进肿瘤细胞侵袭,迁移和黏附能力在卵巢上皮癌浸润转移中起了重要作用。     

促排卵方案对卵母细胞发育潜力及透明带的影响

目的:探讨标准长方案、短方案、拮抗剂方案和微刺激方案4种超排处理方法对卵母细胞发育潜力及卵母细胞透明带的影响。方法:回顾性分析170个IVF周期中患者年龄、病因相当的情况下,在标准长方案、短方案、拮抗剂方案和微刺激方案对治疗效果及卵母细胞透明带双折射值(ZB)和透明带厚度(ZT)的影响。结果:发现在不同超排方案的成熟率、受精率、多精受精率、卵裂率、优质胚胎率、附植率、妊娠率和周期取消率之间差异无统计学意义(P>0.05)。长方案组ZB值(6.32±0.37)显著低于拮抗剂方案组(10.16±0.88)和微刺激方案组(10.40±1.99),差异有统计学意义(P<0.01),短方案组MⅡ期卵母细胞ZB值也显著低于拮抗剂方案组。长方案组、拮抗剂方案组的D0ZT显著高于短方案组,长方案和拮抗剂方案组D1ZT均分别高于短方案组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:卵母细胞ZB和ZT值在一定程度上能反映超促排卵方案对卵母细胞质量的影响。     

两组冷冻保护剂对卵裂期胚胎玻璃化冷冻效果的研究

目的：评价两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎的冷冻效果。方法以体外受精-胚胎移植周期患者受精后第3天废弃胚胎为实验对象,共102枚胚胎入选,随机分为乙二醇＋丙二醇（EG＋PROH）组52枚,乙二醇＋二甲基亚砜（EG＋DMSO）组50枚。比较观察两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎冷冻解冻后胚胎的复苏效果。结果玻璃化冻融后两组在复苏率上无显著差异,但在完整胚胎复苏率和卵裂球复苏率上EG＋PROH组显著高于EG＋DMSO组（P＜0.05）。结论对于卵裂期胚胎的玻璃化冷冻,选用EG＋PROH作为冷冻保护剂可取得较好的效果。     

内细胞团及滋养外胚层对体外受精单囊胚移植结局的影响

目的：通过对非选择性单囊胚移植研究,探讨选择性单囊胚移植的临床价值以及内细胞团（ICM）、滋养外胚层（TE）在囊胚发育潜能中的作用。方法选择该中心非选择性单囊胚移植276周期,比较优质单囊胚与非优质单囊胚妊娠率、早期流产率;比较不同ICM和TE妊娠率、早期流产率。结果优质单囊胚移植临床妊娠率较非优质单囊胚临床妊娠率显著增高（ P＜0．05）;ICM A组的临床妊娠率较ICM C组的妊娠率显著增高（ P＜0．05）;TE A组的临床妊娠率较TE B组及TE C组显著增高（ P＜0．05）;各组早期流产率差异无统计学意义;多胎妊娠率为1．16％。结论单囊胚移植多胎率极低;优质单囊胚移植比非优质单囊胚移植可以获得较高临床妊娠率;CC级的囊胚仍有一定的妊娠率,在无其他可移植胚胎的情况下,经充分知情同意,可考虑移植CC级囊胚。