PCR-SSCP法检测结核分枝杆菌耐药性

目的：探讨耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药性的关系以及聚合酶链反应-单链构象多态性分析(poly merase chain reaction-single strand cinfomlation polymorphism，PCR-SSCP)方法的临床应用价值。方法：用PCR-SSCP方法检测58株结核分枝杆菌临床分离株katG，rpoB，rpsL基因突变并与常规药敏试验检测结果进行对比。结果：经常规药敏试验检测，58株结核分枝杆菌临床分离株中共有41株耐药，其中，耐异烟肼(INH)为35株，高耐药株27株；耐利福平(RFP)为31株，高耐药株24株；耐链霉素(SM)有31株，高耐药株26株。同时耐3种药物的有21株(51．2％)，耐2种药物的14株(34．1％)，单耐药株6株(14．6％)．PCR-SSCP方法对58株临床分离株katG，rpoB，rpsL基因突变的检测率为40％(23／58)，45％(26／58)，38％(22／58)，其中检出3个基因同时突变的有13株(32％)，2种基因突变的12株(29％)，1种基因突变的有10株(23．8％)．常规药敏试验与PCR-SSCP法检出结核分枝杆菌同时耐3种药物的符合率为61．9％(13／21)，检出耐2种药物的符合率为85．70k，(12／14)，检出耐1种药物的符合率为50％(3／6)．高耐药株中突变率为80．5％(62／77)，低耐药株中突变率为60％(12／20)．结论：PCR-SS-CP方法对耐2种以上药物的结核杆菌检出率较高，且耐药基因突变率随着耐药浓度增高而增高。将PCR-SSCP法与药敏试验联合应用可互相弥补，已成为临床指导用药的好方法。     

人羧肽酶A1活性中心基因的克隆及原核表达

目的：克隆人羧肽酶A1(carboxyrpeptidase A1，CPA1)活性中心基因，构建重组表达载体并对其进行诱导表达。方法：通过RT-PCR方法扩增出正常胰腺组织中CPA1活性中心基因，克隆入载体pGEM-Teasyr，测序分析．将该目的基因亚克隆于表达载体pGEX-4T-1，测序证实序列正确后转化大肠杆菌DH5α，经IPTG诱导表达重组蛋白。结果：获得了人CPA1活性中心基因，构建了重组表达质粒，表达的蛋白以SDS-PAGE分析，在Mr约46000处出现一条新生蛋白带，经凝胶薄层扫描检测，表达量约占菌体总蛋白的22．1％。结论：成功克隆人CPA1活性中心基因并得到了其原核表达产物，为获得分子量小而具有相似活性的蛋白奠定了基础。     

局部晚期宫颈癌新辅助化疗临床应用的进展

局部晚期官颈癌（locally advanced cervical cancer）是指具有预后不良因素的高危宫颈癌，其广义的范围包括宫颈癌Ib2～Ⅳ。期，狭义则指局部肿瘤≥4cm的早期宫颈癌。放射治疗是其传统治疗方法，但5年生存率只有40％左右。因此国内外许多学者试图通过手术技巧、放射设备和技术的不断改进来改变这种状况，但并未奏效，故人们又把注意力转移到化疗。     

18例恶性苗勒混合瘤临床病理分析

目的：探讨女性生殖系统恶性苗勒混合瘤（MMMT）的临床与病理特征。方法：对18例女性生殖系统MMMT进行光镜观察及免疫组化染色，结合临床资料进行分析，对9例进行了术后随访。结果：各部位MMMT的形态特征相似，均含有上皮及间叶两种组织成分，相互间有穿插和移行变化，组织成分形态多样，免疫组化有助于判断。恶性度与异型性、核分裂数及出血坏死程度有关。预后与临床分期有关。化疗有效。结论：MMMT的诊断主要依据组织形态学，预后与临床分期有关。     

人精液中ACE,HYD,ACP和GGT检测的意义

目的探讨人精液中项体酶、透明质酸酶、酸性磷酸酶、γ-谷氨酰基移换酶与男性不育的关系.方法参照WHO标准方法,进行精液常规分析,按精子密度、活动率不同分为(正常、＜20、20～40、＞40)4个组.采用改良的Kennedy法检测精子顶体酶(ACE)活性.用Singer法测透明质酸酶(HYD)活性.采用磷酸苯二钠法检测酸性磷酸酶(ACP).用以Glucana为底物动力学方法测定精液γ-谷氨酰基移换酶(GGT)活性.结果98例不育各组的ACE、HYD、ACP和GGT活性明显低于正常生育组(P＜0.01),并且随精子密度和活动率减少而降低,随精子畸形率增高而下降.结论精液酶类的检测是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标之一,是精液常规参数不可替代的,对男性不育的诊断治疗具有重要价值.     

Beckman EL-ISE电解质分析仪准确性及故障的分析判断

0 引言为了克服离子选择电极（ISE）法的微量电位信号极易受环境温度变化及电子噪声的干扰问题,该仪器采用了参考电极,把参考电极与其测定电极装在同一测量室内,保持其相同的物理环境,使干扰源对所有电极的影响相同. 以内参液作为参考电极的测量对象,测得一个参考电极电位值,再测样品的电极电位值,二者相抵就消除了所叠加的干扰信号.     

子宫内膜不典型增生及其处理

1　子宫内膜不典型增生子宫内膜不典型增生 (atypicalhyperplasia ,AH)是一个组织病理学名称 ,属子宫内膜增生的一种类型 ,其主要的病理学特征为腺上皮细胞出现异型性。根据Kuman为首的美国学者通过对 170例未治疗的子宫内膜增生患者进行 1 2 5年随诊的结果为基础 ,1987年国际妇科病理协会 (IS GP)提出将子宫内膜增生分为 :①单纯性增生 ;②复合性增生 ;③不典型增生 3大类 ,该分类法目前已被国内外普遍采用。其中子宫内膜不典型增生根据增生腺体是否出现背靠背群集 ,分为简单性不典型增生和复杂性不典型增生 ;根据组织学病变程度不同又…     

股骨头部分置换术精准微创治疗中老年ARCO Ⅲ期股骨头缺血坏死的有限元分析

目的通过有限元分析,初步评估股骨头部分置换术后股骨与内植物模型的应力分布和位移。 方法选择一名成年健康志愿者,获取股骨全长CT扫描数据,利用Mimics 20.0软件、Geomagic软件及UG NX 12.0软件建立股骨头缺血坏死模型,骨隧道切除股骨头坏死区域后装配设计开发的股骨头假体,模拟单腿站立环境进行有限元仿真模拟,获取股骨与内植物模型的应力分布和位移数据。 结果股骨应力分布主要集中在股骨颈下方和股骨干皮质骨两侧,最大应力为48.25 Mpa,最大位移为10.98 mm。内植物模型的应力主要分布在金属内植物主体结构下方,最大应力为147.2 Mpa,最大位移为9.58 mm。 结论股骨头部分置换后,假体头与股骨头曲率一致,应力传导模式与正常侧髋关节一致,但在假体头与茎部连接处发生应力集中,应重点考虑选择更大强度的材料。     

单侧椎弓根固定经椎间孔椎体间融合术治疗下腰椎退行性疾病

目的评价单侧椎弓根固定经椎间孔腰椎椎体间融合术(TLIF)治疗下腰椎退行性疾病的疗效。方法采用单侧TLIF术治疗41例下腰椎退行性疾病患者,均为单节段手术。观察手术时间、术中出血量及并发症情况。采用腰痛和腿痛视觉模拟评分(VAS)与Oswestry功能障碍指数(ODI)评价临床效果,并通过影像学检查对椎体间融合情况进行评价。结果 41例均获随访,时间24~59(38±6)个月。手术时间80~180(125±10)min,术中出血量100~550(310±30)ml。手术切口均一期愈合。腰痛VAS分值由术前的(6.5±2.1)分下降至末次随访时的(2.3±0.9)分(P0.01),腿痛VAS分值由术前的(7.6±2.3)分下降至末次随访时的(1.2±0.8)分(P0.01),ODI由术前的54.2±10.9下降至末次随访时的13.8±2.1(P0.01)。末次随访融合率为95%,未发现继发性脊柱侧弯、螺钉松动、断裂及Cage移位等情况。结论单侧TLIF术可有选择地治疗下腰椎退行性疾病,其疗效确切,并具有创伤小、手术时间短、出血少、并发症少等优点。     

结核分枝杆菌新型改良罗氏快速培养基的研究

目的研究结核分枝杆菌（结核菌）快速培养方法，提高阳性率，以协助临床早期诊断。方法在新型改良罗氏快速培养基和改良罗氏培养基上接种结核菌后置5．0％的CO2环境中培养，观察结核菌生长情况。结果10株结核菌生长平均所需时间在改良罗氏培养基上为（17．25±5．88）d，而在新型改良罗氏快速培养基上仅为（9．75±1．64）d，两者差异有显著性（P=0．001）；在后者，结核菌生长更快速，菌落形成茂盛。结论新型改良罗氏快速培养基比改良罗氏培养基培养结核菌所需时间明显缩短，且生长结果更易观察。