5-Aza-CdR对胃癌细胞系生长及Apaf-1基因异常甲基化的影响

目的:观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycitydine,5-Aza-CdR)对体外培养的胃癌SGC7901细胞和BGC823细胞增生、细胞周期和凋亡的影响及其对此两株细胞中Apaf-1基因的甲基化状态的影响.方法:不同浓度5-Aza-CdR处理体外培养的SGC7901细胞和BGC823细胞后,用MTT法检测处理24,48和72 h的细胞增殖活性;PI染色和流式细胞仪检测药物处理后72 h细胞周期分布和细胞凋亡率;MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态;RT-PCR法及Western blot法检测用药前后细胞中Apaf-1的mRNA及蛋白表达的变化.结果:1×10-7,5×10-7,1×10-6和5×10-6 mol/L5-Aza-CdR处理SGC7901和BGC823细胞24,48,72 h后,细胞增生受到抑制,有时间和剂量的依赖性.流式细胞仪分析表明,各药物浓度处理72 h后凋亡率增加明显:SGC7901细胞5×10-7,1×10-6和5×10-6 mol/L组分别为2.53%±1.19%,5.93%±0.86%,10.14%±1.51%,与对照组(0.12%±0.03%)相比差异显著(P＜0.05);BGC823细胞5×10-7,1×10-6和5×10-6 mol/L组分别为1.57%±0.26%,4.64%±1.05%,8.21%±1.46%,与对照组(0.57%±0.03%)相比差异显著(P＜0.05).在5-Aza-CdR处理前未检测到SGC7901细胞系及BGC823细胞系的Apaf-1基因的mRNA及蛋白表达,经过5-Aza-CdR处理后,Apaf-1基因在SGC7901细胞系及BGC823细胞系中甲基化状态得到了逆转,Apaf-1基因的mRNA及蛋白重新表达.结论:5-Aza-CdR对SGC7901细胞和BGC823细胞具有增生抑制作用;Apaf-1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关.     

白藜芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度(0,10,20,50,100,200 μmol/L)Res处理24,48,72 h对SGC7901细胞的抑制率.流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的早期凋亡率.电镜扫描观察SGC7901细胞形态学改变,分光光度法检测caspase-3活性.结果:Res在20-300 μmol/L浓度范围内,以浓度和剂量依赖的方式抑制胃癌细胞的增殖(P＜0.01).经0,10,20,50,100,200 μmol/L Res处理24 h后,细胞凋亡率分别为1.17%,3.73%,8.75%,23.35%,63.97%和70.10%,晚期凋亡和坏死的细胞比例分别为5.66%,7.22%,9.86%,6.91%,12.51%及11.98%,各组之间差异不大.电镜下见到典型的细胞凋亡的形态学改变.100 μmol/L Res处理后6 h caspase-3活性增加,18 h达高峰,24 h后下降,48 h仍高于正常(0.135±0.036 vs 0.069±0.008,P＜0.05).经20,50,100 μmol/L Res处理18 h后的细胞的caspase-3活性分别为0.169±0.017,0.247±0.028,0.353±0.044(P＜0.01),较对照组(0.063±0.006)分别增加2.68倍、3.92倍和5.61倍.结论:Res通过诱导caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

小儿黑热病1例误诊分析

患儿,男,3岁,甘肃籍,居住林场。因反复发热、面色苍白1年5个月,加重3个月,于1995年10月23日入院。曾在当地多家医院先后行4次骨穿,多次以病毒感染、粒细胞缺乏症住院治疗,病情无明显缓解。患病来伴咳嗽、多汗、乏力、纳差、进行性消瘦。查体:体温36.9℃,身高83cm,体重11kg,发育营养较差,贫血貌。全身皮肤松弛,方颅,双肺呼吸音粗,肺底可闻及少许湿啰音,心脏各瓣膜听诊区可闻及3/6级粗糙收缩期杂音;蛙状腹,皮下脂肪菲薄,腹部无压痛、反跳痛,肝肋下5.5cm,脾肋下7.0cm,移动性浊音阴性。双下肢轻度水肿。辅助检查:血红蛋     

姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中VEGF和HIF-1α表达通过PI3K／AKT／FRAP信号传导通路

目的探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用。方法分别加入LY29400225μmol／L、50μmol／L，U012610μmol／L、20μmol／L，rapamycin 5ng／ml、10ng／ml处理人肝癌细胞BEL-7402，30min后加入姜黄素10μmol／L，对照组单独加入0、10μmol／L姜黄素，缺氧环境中培养6h后，行RT—PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达；分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol／L处理人肝癌细胞BEL-7402，缺氧环境中培养6h后，行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达。结果姜黄素10μmol／L＋LY29400225μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋LY294002 50 μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 5 ng／ml组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 10 ng／na组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；而姜黄素10μmol／L＋U012610μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋U0126 20 μmol／L组HIF—1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比差异无统计学意义（P〉0.05）；不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol／L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低，LY294002 25 μmol／L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达，而对总AKT蛋白表达无明显变化。结论姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过P13K／AKT／FRAP信号传导通路。     

宫颈癌组织中miR-320和FOXM1的表达变化及对患者预后的评估价值

目的 探讨宫颈癌组织中微小RNA-320(miR-320)和叉头框蛋白M1(FOXM1)的表达变化及对患者预后的评估价值.方法 选取2016年1月至2021年1月于郑州市第三人民医院诊治的150例宫颈癌患者,纳入研究组.根据不良预后风险水平将研究组患者分为高风险组(65例)和中低风险组(85例).另选取同期收治的50例...     

干扰素治疗慢性丙型肝炎中出现反跳与干扰素抗体关系的研究

目的：探讨干扰素抗体与干扰素治疗慢性丙型肝炎临床疗效的关系。方法：用酶免疫法（EIA）检测41例应用干扰素治疗的慢性丙型肝炎患者治疗前及治疗不同时期血清中的干扰素总抗体,同时应用抗病毒中和生物鉴定法（ANB）检测干扰素中和抗体及其滴度。结果：应答伴反跳组干扰素中和抗体及总抗体的阳性率明显高于完全应答组（P＜0．05）,而安全应答组和无应答组间无显著性差异（P＜0．05）。干扰素中和抗体滴度与患者血清ALT水平间存在相关关系,且NA滴度＜1：800患者的完全应答率明显高于NA滴度≥1：800的患者（P＜0．05）。结论：干扰素抗体的产生可能是影响干扰素临床疗效的因素之一,以中和抗体对疗效的影响为主,中和抗体滴度,干扰素的疗效差。干扰素中和抗体的产生可能是临床应用干扰素治疗慢性丙型肝炎患者出现反跳的原因之一。     

海洛因中毒误诊1例

患者男,39岁,外地打工人员,因意识不清被人急送入院,发病时间、经过及既往史均不详。查体:T35.6℃,P60次/分,R10次/分,BP11.97/7.98kPa,神志不清,压眶尚有反应,左瞳孔1mm,右瞳孔3mm,额纹对称,口角无歪斜。颈软,心肺(一),腹平软,肝脾不大,双下肢不肿,肌张力可,左侧巴氏征(±),余病理征均阴性。入院初步诊断:脑血管意     

姜黄素对人肝癌细胞中血管内皮生长因子表达的影响

姜黄素属于天然酚类抗氧化剂，可作为抗突变剂和抗促癌剂Ⅲ，具有安全、无显著不良反应等特点，美国国立肿瘤所已将其列为第三代癌化学预防药物。姜黄素的抗肿瘤机制是多方面的，其中抑制肿瘤新生血管的生成是姜黄素抗肿瘤作用的重要机制。血管内皮生长因子（VEGF）是肿瘤诱导产生新生血管最主要的细胞因子。而肝癌为富含血管的肿瘤，且VEGF在肝癌中有高表达，对姜黄素是否能抑制人肝癌细胞BEL-7402中VEGF蛋白和mRNA的表达，值得我们深入探讨。     

抑癌基因的甲基化水平与胃癌的关系

胃癌是一种严重威胁人类健康的恶性肿瘤，国内外大量资料显示，胃癌的发生与其他恶性肿瘤一样是多基因多阶段变异累积形成的病理过程，这些基因主要是促进肿瘤发生的癌基因和抑制肿瘤发生的抑癌基因，以及维持基因组稳定的DNA错配修复基因等。抑癌基因功能的丢失可通过多种途径，除基因突变和杂合性丢失以外还与其启动子发生甲基化修饰有关。